Page 32 - 《中国药房》2023年23期
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capillary proliferation could be found; the protein and mRNA expressions of inflammatory factors such as IL-1β, IL-6 and TNF-α
were decreased significantly in synovial tissue of rats in administration groups (P<0.05). Compared with the traditional technology
group, most indicators of the ethanol extraction group were significantly reduced (P<0.05), and only heat pain threshold and
mRNA expression of IL-6 in rats were decreased significantly in the water extraction group (P<0.05). The optimal extraction
technology of the raw drugs of Sanse powder gel paste included suitable dose of Sanse powder, 8-fold 55% ethanol, heating reflux
extraction for 90 minutes, extracting twice. The results of 3 times of verification experiments showed that the average contents of
casticin, strychnine and toxiferine were 0.007%, 0.092%, and 0.214%, respectively; RSD were all less than 5%.
CONCLUSIONS The optimized extraction technology for the raw drugs of Sanse powder gel paste is stable and feasible, which
can improve the efficacy of the preparation.
KEYWORDS Sanse powder; gel paste; extraction technology; pharmacokinetics; content determination
膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)是涉及到软 特勒托利多科技(中国)有限公司。
骨、软骨下骨、韧带、关节囊、滑膜以及周边肌肉等结构 1.2 主要药品与试剂
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改变的一种退行性疾病 。近年来由于人们生活习惯的 三色散(由蔓荆子、紫荆皮、当归、木瓜、丹参、赤芍、
改变,KOA已成为一种常见的疾病,对患者个人和卫生 白芷、片姜黄、独活、羌活、天花粉、川牛膝、威灵仙、防
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保健系统都造成很大的影响 。目前,针对KOA的主要 己、防风、马钱子、秦艽、连翘、川芎、甘草按16∶16∶4∶4∶4∶
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治疗手段有口服非甾体抗炎药、对乙酰氨基酚 ,关节腔 4∶4∶4∶4∶4∶4∶4∶4∶4∶4∶4∶2∶2∶2∶1 的质量比混合而成,
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内注射皮质类固醇、玻璃酸钠等 。然而非甾体抗炎药 批号Z04000566)购自江苏省中医院中药房;蔓荆子黄素
虽然具有一定疗效,但易引起心血管疾病,对乙酰氨基 对照品(批号 111554-201705,纯度 98.30%)购自中国食
酚则会引起过敏及胃肠道不良反应;关节腔内注射则易 品药品检定研究院;马钱子碱、士的宁对照品(批号分别
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引起感染,且可能对软骨造成不良影响 。 为 RP200721、RP190320,纯度分别为 99.58%、98.84%)
江苏省中医院自主研发改进的“三色散”方可有效 均购自成都麦德生科技有限公司;RNA extraction kit(批
改善膝关节肿胀、疼痛,以及膝关节功能障碍等临床症 号 RN001)购自上海奕杉生物科技有限公司;BCA 蛋白
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状 ,对软组织急慢性损伤及足跟疼痛也有显著治疗效 检测试剂盒、RIPA强裂解液、5×蛋白上样缓冲液(批号
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果 。本课题组在前期研究中使用三色散药材粉碎后的 分别为 P0012、P0013B、P0015)均购自上海碧云天生物
药粉颗粒制备凝胶贴膏,以综合感官、初黏力、持黏力、 技术有限公司;小鼠肿瘤坏死因子 α(tumor necrosis
剥离强度为评价指标筛选基质处方,得到传统工艺凝胶 factor-α,TNF-α)、白细胞介素 6(interleukin-6,IL-6)、IL-
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贴膏的最佳配比 ,然而也发现药粉颗粒作为原料药制 1β 单 克 隆 抗 体(批 号 分 别 为 sc-52746、sc-57315、sc-
备所得的凝胶贴膏内含杂质较多,手感较为粗糙;但若 12742)均购自美国 Santa Cruz 公司;小鼠 β-actin 单克隆
只进行粉碎过筛,所得产物中含有大量不含药理活性的 抗体(批号 66009-1-Ig)购自武汉三鹰生物科技有限公
成分,在目前固定投药量的制备方法下有效成分的含量 司;辣根过氧化物酶标记的山羊抗小鼠 IgG(H+L)多克
低于溶剂提取方法,且存在不便于贮存及较难制定质量 隆二抗(批号 bs-0296G-HRP)购自北京博奥森生物技术
评价标准的缺点。故本研究通过比较三色散凝胶贴膏 有限公司;胰酶(批号 BL512A)购自南京顺捷生物科技
原料药在不同提取方式下制备所得的凝胶贴膏的抗炎 有限公司;降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related
镇痛药效与方中主要成分的含量,来优化其提取方式。 peptide,CGRP)、前列腺素 E2(prostaglandin E2,PGE2)、
1 材料 P 物质(substance P,SP)及环氧合酶 2(cyclooxygenase-
1.1 主要仪器 2,COX-2)酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒(批号分别
Alliance 2695e 型高效液相色谱仪购自沃特世科技 为 ml003082、ml00303、ml003119、ml058808)均购自上
(上海)有限公司;7500型实时定量PCR仪购自美国Ap‐ 海酶联生物科技有限公司。其余试剂均为分析纯。
plied Biosystems 公司;35150 型冷热板购自意大利 Ugo 1.3 动物
Basile 公司;Enspire 型酶标仪购自珀金埃尔默企业管理 SPF级雄性SD大鼠25只,3月龄,体重250~280 g,
(上海)有限公司;BioPhotometer型核酸蛋白测试仪购自 购自北京维通利华实验动物技术有限公司,生产许可证
德国Eppendorf公司;Mini-protein Tetra型电泳及转膜仪 号为 SCXK(京)2021-0011。大鼠饲养于南京中医药大
购自美国 Bio-Rad 公司;LAS4000 型超灵敏化学发光成 学实验动物中心。实验经过南京中医药大学实验动物
像系统购自美国GE公司;MS105DU型电子天平购自梅 伦理委员会审批(伦理批号A211207)。
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