Page 29 - 《中国药房》2023年23期

Pre 130 kDa 3.2.2 细 胞 中 SREBP-1c、SREBP-2 及 其 下 游 靶 基 因
SREBP-1 Pre 130 kDa SREBP-2
（LE） n 68 kDa （LE） n 68 kDa mRNA转录水平检测结果
Pre 130 kDa
SREBP-2
SREBP-1 Pre 130 kDa （SE） 与对照组比较，抑制剂组及益肾通络方各浓度组细
（SE） n 68 kDa n 68 kDa
β-actin 42 kDa β-actin 42 kDa 胞中 SREBP-1c 及其下游靶基因 FASN、ACC1、SCD5、
1 2 3 4 5 1 2 3 4 5
FADS1，SREBP-2 及其下游靶基因 HMGCR、DHCR24、
LE：长曝光；SE：短曝光；1：db/m组；2：db/db组；3：益肾通络方低剂
INSIG-1、FDPS 的 mRNA 转 录 水 平 均 显 著 降 低（P＜
量组；4：益肾通络方中剂量组；5：益肾通络方高剂量组。
图2 各组小鼠肝组织中SREBPs蛋白表达的电泳图 0.01），且抑制剂组与益肾通络方各浓度组上述指标水平
差异均无统计学意义（P＞0.05）。结果见表8、表9。
表4 各组小鼠肝组织中SREBPs蛋白表达水平测定结
表8 各组细胞中SREBP-11c及其下游靶基因mRNA转
果（x±s，n＝3）
录水平测定结果（x±s，n＝3）
组别 Pre-SREBP-1/β-actin n-SREBP-1/β-actin Pre-SREBP-2/β-actin n-SREBP-2/β-actin
db/m组 1.02±0.03 0.97±0.49 1.01±0.02 0.99±0.03 组别 SREBP-1c mRNA FASN mRNA ACC1 mRNA SCD5 mRNA FADS1 mRNA
db/db组 1.87±0.18 a 1.65±0.29 b 1.50±0.14 a 1.75±0.23 a 对照组 1.02±0.07 0.98±0.02 1.06±0.03 1.02±0.02 0.98±0.01
益肾通络方低剂量组 1.66±0.07 c 1.30±0.07 c 1.18±0.21 c 1.45±0.24 c 抑制剂组 0.28±0.02 a 0.36±0.05 a 0.32±0.02 a 0.29±0.03 a 0.34±0.04 a
益肾通络方中剂量组 1.44±0.59 d 1.23±0.14 d 0.99±0.14 d 1.09±0.12 d 益肾通络方低浓度组 0.26±0.02 a 0.35±0.01 a 0.48±0.02 a 0.44±0.03 a 0.36±0.03 a
益肾通络方高剂量组 1.25±0.06 d 1.04±0.06 d 1.07±0.12 d 1.11±0.13 d 益肾通络方中浓度组 0.20±0.03 a 0.27±0.04 a 0.38±0.01 a 0.48±0.06 a 0.37±0.04 a
益肾通络方高浓度组 0.15±0.02 a 0.16±0.03 a 0.23±0.04 a 0.35±0.05 a 0.34±0.02 a
a：与db/m组比较，P＜0.01；b：与db/m组比较，P＜0.05；c：与db/db
a：与对照组比较，P＜0.01。
组比较，P＜0.05；d：与db/db组比较，P＜0.01。
表9 各组细胞中 SREBP-22 及其下游靶基因 mRNA 转
表5 各 组 小 鼠 肝 组 织 中 Srebp-11c 及 其 下 游 靶 基 因
录水平测定结果（x±s，n＝3）
mRNA转录水平测定结果（x±s，n＝3）
组别 SREBP-2 mRNA HMGCR mRNA DHCR24 mRNA INSIG-1 mRNA FDPS mRNA
组别 Srebp-1c mRNA Fasn mRNA Acc1 mRNA Scd5 mRNA Fads1 mRNA
db/m组 1.03±0.13 1.00±0.03 1.00±0.02 1.02±0.13 0.98±0.07 对照组 1.05±0.02 a 1.01±0.02 a 0.98±0.03 a 0.99±0.02 a 1.03±0.04 a
抑制剂组
0.28±0.03
0.36±0.05
0.24±0.03
0.23±0.02
0.26±0.02
db/db组 1.76±0.12 a 1.90±0.13 a 2.41±0.12 a 3.67±0.22 a 1.32±0.08 a a a a a a
益肾通络方低剂量组 1.46±0.23 b 1.35±0.17 b 1.91±0.13 b 3.00±0.15 b 1.17±0.07 b 益肾通络方低浓度组 0.42±0.06 a 0.58±0.02 a 0.36±0.03 a 0.24±0.03 a 0.52±0.04 a
益肾通络方中剂量组 1.28±0.13 b 1.21±0.08 b 1.62±0.11 b 2.77±0.24 b 1.10±0.05 b 益肾通络方中浓度组 0.37±0.04 a 0.52±0.04 a 0.28±0.03 a 0.20±0.02 a 0.40±0.05 a
0.16±0.02
0.30±0.02
益肾通络方高浓度组
0.31±0.03
0.45±0.03
0.22±0.01
益肾通络方高剂量组 1.09±0.08 b 1.00±0.17 b 1.30±0.10 b 2.40±0.25 b 0.96±0.04 b
a：与对照组比较，P＜0.01。
a：与db/m组比较，P＜0.01；b：与db/db组比较，P＜0.01。
4 讨论
表6 各 组 小 鼠 肝 组 织 中 Srebp-22 及 其 下 游 靶 基 因
脂质为阴精，其贮存、分布与肾密切相关。肾虚气
mRNA转录水平测定结果（x±s，n＝3）
化无力，脾失健运，痰瘀内生；肾阴虚滋生内热，灼津炼
组别 Srebp-2 mRNA Hmgcr mRNA Dhcr24 mRNA Insig-1 mRNA Fdps mRNA
db/m组 1.02±0.12 1.00±0.04 1.03±0.02 0.97±0.08 1.01±0.01 液熬而成脂；肾阴亏虚，肝失疏泄，膏脂布化失常。现代
db/db组 1.94±0.08 a 1.33±0.21 a 1.46±0.08 a 1.97±0.16 a 1.41±0.13 a 研究也表明，脂质代谢异常与肾虚血瘀密切相关 [12―13] ，
益肾通络方低剂量组 1.68±0.17 b 1.12±0.18 b 1.25±0.16 b 1.66±0.21 b 1.21±0.04 b 肾虚可导致脂质代谢紊乱、TG 水平升高以及 HDL 值降
益肾通络方中剂量组 1.25±0.12 b 1.03±0.09 b 1.02±0.08 b 1.39±0.16 b 1.11±0.10 b [13―15]
益肾通络方高剂量组 1.10±0.13 b 0.83±0.03 b 0.88±0.07 b 1.19±0.21 b 0.96±0.11 b 低 。而益肾通络方则是基于肾虚血瘀理论所得，以
a：与db/m组比较，P＜0.01；b：与db/db组比较，P＜0.01。 益肾通络、祛瘀化脂为主要治法，在治疗高脂血症及脂
SREBP-1 Pre 130 kDa SREBP-2 Pre 130 kDa 质代谢异常方面具有良好的理论基础。
（LE） n 68 kDa （LE） n 68 kDa
血脂四项水平能反映出脂质代谢情况。体内药效
SREBP-1 Pre 130 kDa SREBP-2 Pre 130 kDa
（SE） n 68 kDa （SE） n 68 kDa 考察结果显示，低、中、高剂量益肾通络方均能有效调节
β-actin 42 kDa β-actin 42 kDa db/db 小鼠血清中 TC、TG、HDL、LDL 水平的异常变化。
1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 油红 O 在脂肪内能高度溶解，可特异性地使组织内 TG
LE：长曝光；SE：短曝光；1：对照组；2：抑制剂组；3：益肾通络方低
浓度组；4：益肾通络方中浓度组；5：益肾通络方高浓度组。 等中性脂肪着色，从而反映细胞内脂质蓄积程度。体内
图3 各组细胞中SREBPs蛋白表达的电泳图 外实验可见，益肾通络方可明显改善 db/db 小鼠肝组织
TG 蓄积及脂肪变性，并且可明显改善 HepG2 细胞内脂
表7 各组细胞中SREBPs蛋白表达水平测定结果（x±
s，n＝3） 质蓄积，且呈现一定的剂量/浓度依赖性趋势。这提示，
益肾通络方能够有效地减少脂质过度蓄积，改善脂质代
组别 Pre-SREBP-1/β-actin n-SREBP-1/β-actin Pre-SREBP-2/β-actin n-SREBP-2/β-actin
对照组 1.01±0.02 1.02±0.01 1.02±0.03 0.98±0.03 谢异常。
抑制剂组 0.50±0.03 a 0.63±0.08 a 0.62±0.04 a 0.61±0.04 a 作为参与脂质代谢调控的重要因子，Pre-SREBPs经
益肾通络方低浓度组 0.90±0.02 bc 0.90±0.03 bc 0.63±0.02 a 0.83±0.04 ac 2 次剪切，释放成熟体 n-SREBPs，最终转位到核内修饰
益肾通络方中浓度组 0.77±0.10 a 0.66±0.04 a 0.61±0.03 a 0.65±0.04 a [6―7]
益肾通络方高浓度组 0.38±0.04 a 0.57±0.06 a 0.65±0.03 a 0.68±0.03 a 活化后，作为转录因子启动下游靶基因 。其中，
a：与对照组比较，P＜0.01；b：与对照组比较，P＜0.05；c：与抑制剂 SREBP-1c主要参与游离脂肪酸从头合成，调控与TG合
组比较，P＜0.05。 成相关的靶基因，如 Acc1、Fasn、Scd5 等，激活脂质合成

中国药房 2023年第34卷第23期 China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 23 · 2839 ·