Page 39 - 《中国药房》2023年18期
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CONCLUSIONS  CDPS  can  alleviate  the  symptoms  of  IBS-C  rats，  which  may  be  related  to  the  inhibition  of  NGF/TrkA  signaling
          pathway.
          KEYWORDS    Cistanches  Herba  polysaccharides；  constipation-predominant  irritable  bowel  syndrome；  nerve  growth  factor/
          tropomyosin receptor kinase A signaling pathway； colon tissue


              肠易激综合征（irritable bowel syndrome，IBS）是一         1.2 主要药品与试剂
          种慢性功能性胃肠道疾病，主要分为 4 种类型：腹泻型                             CDPS[货号BJ-1962，规格200 mg（每克相当于生药
          IBS、便秘型 IBS（constipation-predominant irritable bowel   12.61 g）]购自北京凯诗源生物科技有限公司；枸橼酸莫
                                                [1]
          syndrome，IBS-C）、混合型 IBS 和未分类 IBS 。其中，              沙必利片[阳性对照，批号 20220824，规格 5 mg（按
          IBS-C 约占 IBS 的三分之一，以腹痛、排便不尽、排便习                    C21H25ClFN3O3 ·C6H8O7计算）]购自江苏豪森药业集团有
          惯改变等为主要表现，虽不造成任何器质性病变和生化                           限公司；苏木精-伊红（hematoxylin-eosin，HE）染色试剂
          指标异常，但会严重影响患者（尤其是功能性肠道疾病                           盒（货号E-IR-R117）购自武汉伊莱瑞特生物科技股份有
                                   [2]
          患者）的生活质量和工作效率 。研究指出，与西药治疗                          限公司；RNA提取试剂（Trizol法）、两步法实时荧光定量
          相比，中药治疗能更好地缓解 IBS 患者的相关症状，同                        聚合酶链式反应（quantitative real-time PCR，qRT-PCR）
                            [3]
          时可使其复发率更低 。可见，有必要不断探索可有效                           试剂盒（货号分别为R401-01、R232-01）均购自南京诺唯
          治疗IBS-C的中药。                                        赞生物科技股份有限公司；兔源NGF、甘油醛-3-磷酸脱
              有“沙漠人参”之称的中药肉苁蓉来源于列当科植                         氢酶（GAPDH）多克隆抗体和兔源 TrkA 单克隆抗体（货
          物肉苁蓉 Cistanche deserticola Y. C. Ma 或管花肉苁蓉         号分别为 ab6199、ab9485、ab302524）均购自英国 Abcam
          Cistanche tubulosa（Schenk）Wight 的干燥带鳞叶的肉质          公司；辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔 IgG 二抗（货号
          茎，具有温肾通便、调节内分泌、保护神经等药理作用；                          FNab09778）购自武汉菲恩生物科技有限公司；5-羟色胺
          其活性成分之一的肉苁蓉多糖（以下简称“CDPS”）可调                       （5-hydroxytryptamine，5-HT）酶 联 免 疫 吸 附 测 定
          节肠道菌群结构和组成，促进益生菌生长，对维持肠道                          （ELISA）试剂盒（货号 EK-H12226）购自上海酶研生物
                          [4]
          健康具有重要作用 。研究表明，CDPS可通过恢复肠道                         科技有限公司。
                                                   [5]
          微生物群失调来缓解衰老小鼠的认知能力下降 ，但其                           1.3 实验动物
          对IBS-C的具体作用尚不明确。                                       SPF级雄性SD大鼠，6周龄，体重（200±20）g，购自
              神经生长因子（nerve growth factor，NGF）是一种原            中国农业科学院兰州兽医研究所，动物生产许可证号为
          型神经营养因子，具有维持和诱导外周神经细胞分化的                           SYXK（甘）2020-0002。所有大鼠均在 26 ℃、60% 相对
          能力，可作用于中枢神经系统、免疫系统和内分泌系统；                          湿度的环境下饲养，并自由摄食、饮水。本实验方案经
          原肌球蛋白受体激酶 A（tropomyosin receptor kinase A，         武威市中医医院医学伦理委员会审核批准，批号为2022
          TrkA）是受体酪氨酸激酶家族的关键成员，也是NGF的                        伦审0003号。
                  [6]
          同源受体 。研究发现，NGF介导的TrkA信号转导与炎                        2 方法
          症相关的内脏痛觉过敏的发展有关，且 NGF、TrkA 在                       2.1 大鼠模型的建立与分组
          IBS 患者结肠黏膜组织中的表达均明显上调，故抑制                              所有大鼠适应性饲养 1 周后，将其分为对照组（20
                                      [7]
          NGF 可能是治疗该症的重要策略 ；另一项基于脊髓损                         只）和造模组（90 只）。对照组大鼠正常饲养；造模组大
          伤白化大鼠的研究发现，肉苁蓉提取物中的低聚糖能通                           鼠参照文献方法 ，每天上午8：00灌胃0～4 ℃生理盐水
                                                                           [9]
          过激活 NGF 前体来发挥抗炎、抗氧化应激、抗凋亡作                         2 mL，连续 14 d，以建立 IBS-C 大鼠模型。末次灌胃结
            [8]
          用 。由此可见，肉苁蓉的糖类提取物（如CDPS）可能对                        束后，所有大鼠禁食禁水 4 h，记录这 4 h 内各组大鼠的
          NGF 介导的信号通路具有一定的调控作用。为验证这                          粪便颗粒数，并根据 Bristol粪便性状分型量表 进行评
                                                                                                     [10]
          一假设，本研究拟基于 NGF/TrkA 信号通路探讨 CDPS                    分，若粪便颗粒数、Bristol 评分均显著低于对照组则表
          对 IBS-C 大鼠的影响，以期为探索更多有效治疗 IBS-C                    明造模成功。由于造模期间，造模组大鼠有2只死亡，5
          的方案提供参考。                                           只的粪便颗粒数、Bristol评分与对照组比较差异均无统
          1 材料                                               计学意义（P＞0.05），故本研究随机选择造模成功的 80
          1.1 主要仪器                                           只大鼠，分为模型组、阳性对照组、CDPS 低剂量组、
              本研究所用主要仪器包括 SpectraMax iD5 型多功                 CDPS高剂量组，每组20只。阳性对照组大鼠灌胃枸橼
                                                                                                     [11]
          能微孔酶标仪[美谷分子仪器（上海）有限公司]，E100型                       酸莫沙必利混悬液 1.35 mg/kg（以水为溶剂） ，CDPS
          光学显微镜（日本 Nikon 公司），CFX96 Touch 型荧光定                低、高剂量组大鼠分别灌胃 CDPS 混悬液 50、100 mg/kg
                                                                         [5]
          量聚合酶链反应（PCR）仪、ChemiDoc MP型全能成像系                   （以水为溶剂） ，对照组和模型组大鼠均灌胃等体积水，
          统[伯乐生命医学产品（上海）有限公司]等。                              每天1次，持续28 d。


          中国药房  2023年第34卷第18期                                              China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 18    · 2209 ·
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