Page 32 - 《中国药房》2023年18期

100 2.4.6 稳定性试验
峰强度/mAU 60 室温下放置0、2、4、8、12、24 h时按“2.2”项下条件进样测
80
取“2.1.2”项下供试品溶液（批号01211202），分别于
40
20
0 定，记录峰面积。结果显示，甘草酸等6种指标成分峰面
0.4 0.8 1.2 1.6 2.0 2.4 2.8 3.2 3.6 4.0 4.4 4.8
时间/min 积的 RSD 均小于 5.0%（n＝6），表明供试品溶液在室温
A.空白溶液
下放置24 h内稳定性良好。
1 2 3 4 5 6 7
100
2.4.7 耐用性试验
80
峰强度/mAU 60 项下条件分别考察不同流速（0.29、0.3、0.31 mL/min）、流
取“2.1.2”项下供试品溶液（批号01211202），按“2.2”
40
20
0 动相中乙腈初始比例（9%、10%、11%）、柱温（23、25、
0.4 0.8 1.2 1.6 2.0 2.4 2.8 3.2 3.6 4.0 4.4 4.8
时间/min 27 ℃）对试验结果的影响。结果显示，甘草酸等 6 种指
B.混合对照品溶液
标成分峰面积及保留时间的RSD均小于10.0%，分离度
1 2 3 4 5 6 7
100 [19]
和拖尾因子等均符合方法学要求 ，表明本方法耐用性
80 良好。
峰强度/mAU 60 2.4.8 加样回收率试验
40
20
精密称取已知含量的样品（批号01211202）0.5 g，共
0
0.4 0.8 1.2 1.6 2.0 2.4 2.8 3.2 3.6 4.0 4.4 4.8 6份，分别加入一定量的对照品溶液（样品中各成分含量
时间/min
C.供试品溶液（批号01211202） 的 100%），按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，再按
1：芒果苷；2：木犀草苷；3：小檗碱；4：甘草酸；5：内标；6：木香烃内 “2.2”项下条件进样测定，记录峰面积并计算加样回收
酯；7：齐墩果酸。 率。结果显示，甘草酸、芒果苷、木犀草苷、木香烃内酯、
图4 混合对照品溶液、供试品溶液、空白溶液的UPLC-
齐墩果酸和小檗碱的平均加样回收率分别为 100.32%、
MS/MS图
100.00%、100.64%、100.17%、99.05%、101.08%，RSD 均
表2 甘草酸等6种指标成分的回归方程和线性范围
小于2.0%（n＝6），表明本方法准确度良好。
化合物 回归方程 r 线性范围/（ng/mL） 2.4.9 样品的含量测定
甘草酸 Y＝7.588 5×10 X－5.998 1×10 －6 0.999 7 200～10 000
-5
芒果苷 Y＝0.023 0X－0.003 9 0.999 9 200～10 000 取3批样品，按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，再
木犀草苷 Y＝0.095 4X+0.015 4 0.999 5 200～10 000 按“2.2”项下条件进样测定，记录峰面积并按标准曲线法
木香烃内酯 Y＝0.081 8X+0.086 2 0.999 7 200～10 000
齐墩果酸 Y＝0.001 9X+7.202 7×10 －4 0.999 5 200～10 000 计算样品含量，每样品测定3次。结果见表3。
小檗碱 Y＝0.258 3X+0.325 4 0.999 6 200～10 000 表3 甘草酸等 6 种指标成分的含量测定结果（x±s，
n＝3，mg/g）
犀草苷、木香烃内酯、齐墩果酸、小檗碱的定量限分别为
批号 甘草酸 芒果苷 木犀草苷 木香烃内酯 齐墩果酸 小檗碱
200、20、10、1、10、0.5 ng/mL，检测限分别为 100、10、5、 01211202 2.42±0.05 0.85±0.01 0.35±0.01 6.18±0.06 0.99±0.03 5.22±0.03
0.5、5、0.25 ng/mL。 01220701 2.66±0.03 1.16±0.01 0.46±0.01 6.41±0.06 1.29±0.02 5.51±0.05
01220704 2.64±0.03 1.08±0.01 0.42±0.02 6.46±0.08 1.22±0.02 5.56±0.03
2.4.4 精密度试验
取“2.1.1”项下混合对照品溶液（质量浓度 1 000 3 讨论
3.1 样品前处理条件优化
ng/mL），于 1 d 内按“2.2”项下条件连续进样 6 次考察日
本课题组前期对不同提取溶剂（水、甲醇、乙醇）进
内精密度，连续3 d考察日间精密度。结果显示，甘草酸
行了考察，结果显示，以50%甲醇为提取溶剂时，各成分
等 6 种指标成分日内、日间精密度的 RSD 均小于 5.0%
的提取率较高。同时，笔者对不同溶剂体积（30、40、50
（n＝6或n＝3），表明仪器精密度良好。
mL）、提取时间（15、30、45 min）、提取次数（1、2、3次）进
2.4.5 重复性试验
行了考察，结果显示，以 50% 甲醇 50 mL，超声提取 30
精 密 称 取 样 品（批 号 01211202）1 g，共 6 份 ，按
min，提取1次时，所得色谱峰信息较多，提取充分且操作
“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，再按“2.2”项下条件进 简单。

样测定，记录峰面积并按标准曲线法计算样品含量。结 3.2 色谱条件优化
果显示，甘草酸等6种指标成分含量的RSD均小于5.0% 本课题组前期对不同流动相（乙腈-水、乙腈-0.1%
（n＝6），表明本方法重复性良好。 甲酸溶液、甲醇-0.1%甲酸溶液）进行了考察，结果显示，

· 2202 · China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 18 中国药房 2023年第34卷第18期