Page 44 - 《中国药房》2023年13期
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型鳖血冻干粉，以增加鳖血服用的便捷性和质量的稳定                            2.2.2 干燥时间
          性，提高鳖血临床应用的便捷性。                                       设置预冻温度为－50 ℃，预冻时间为4 h，真空度为
          1 材料                                                20 Pa，0 ℃后干燥时间为7 h，解析干燥温度为30 ℃。以
          1.1 主要仪器                                            5 ℃为一个升温阶梯，考察 0 ℃前干燥时间为 4.5、9、
              SCIENTZ-20F/A 型冷冻干燥机购自宁波新芝冻干                    13.5、18、27 h（对应升温速率分别为0.1、0.2、0.3、0.4、0.6
          设备有限公司；DHG-9140A 型电热鼓风干燥箱购自上                        h/℃）对鳖血冻干粉溶解度的影响。结果显示，在上述干
          海精宏实验设备有限公司；TGL-16G型高速台式离心机                         燥时间下鳖血冻干粉的溶解度分别为 75.43%、91.92%、
          购自上海安亭科学仪器厂。                                        92.64%、91.98%、92.09%。可见干燥时间在9～27 h时溶
          1.2 中华鳖                                             解度较高。综合考虑效率等因素后选择干燥时间 13 h
              中华鳖由江苏省扬州市宝应县山阳镇众盛生态龟                           为中值进行进一步筛选。
          鳖产销专业合作社提供，经南京中医药大学药学院吴启                            2.2.3 解析干燥温度
          南教授鉴定为鳖科动物中华鳖，并经检疫合格。                                 设置干燥时间为13.5 h，其他条件同“2.2.2”项，考察
          2 方法与结果                                             解析干燥温度为 5、10、15、20、30 ℃时对鳖血冻干粉溶
          2.1 鳖血冻干粉的制备                                        解度的影响。结果显示，在上述解析干燥温度下鳖血冻
          2.1.1 鳖血的前处理                                        干粉的溶解度分别为 90.92%、89.53%、91.22%、93.75%、
            挑选质量为1 kg左右的健康活体中华鳖，清洗表面                          92.64%，本研究选择解析干燥温度 20 ℃为中值进行进
          后，倒挂 30 min，采用断颈法切断其脖颈并将其新鲜血
                                                              一步筛选。
          液收集至无菌离心管中，每收集 5 mL 鳖血便立即加入
                                                              2.2.4 真空度
          0.7 mL CPDA-1 血液保存液轻摇使混匀，防止鳖血凝固
                                                                设置干燥时间为 13.5 h，解析干燥温度为 20 ℃，其
          变质。1 只中华鳖可获得 35～50 mL 抗凝鳖血，密封后
                                                              他条件同“2.2.2”项。考察真空度为20、35、50、65、80 Pa
          冷藏保存，备用。
                                                              时对鳖血冻干粉溶解度的影响。结果显示，在上述真空
          2.1.2 鳖血的真空冷冻干燥
                                                              度 下 鳖 血 冻 干 粉 的 溶 解 度 分 别 为 92.64%、97.77%、
            鳖血的冻干流程为预冻→抽真空→加热。具体工
                                                              95.41%、92.55%、90.17%。可见当真空度为35 Pa时鳖血
          艺如下：提前开启真空冷冻干燥机制冷系统，使冷阱温
                                                              冻干粉的溶解度最高。由于冷冻干燥机运行时的真空
          度降至预冻温度后，将处理好的鳖血置于平底金属盘中
                                                              度大部分时间会自动维持在 20～40 Pa，再结合本实验
         （物料厚度 5～10 mm）送进冷阱，密闭后设置预冻时间
                                                              结果，最终将真空度定为35 Pa。
          开始预冻；预冻完成后开启真空泵，使冷冻干燥机内的
                                                              2.3 鳖血冻干粉的制备工艺优化
          真空度达到设定值；启动隔板加热进入干燥过程，通过
                                                              2.3.1 Box-Behnken实验设计与结果
          前期实验摸索，加热隔板采用斜率升温方式，升温至设
                                                                为确定鳖血真空冷冻干燥最优工艺条件，笔者在单
          定温度后干燥结束，解除真空状态，取出鳖血冻干样品。
          每5 mL鳖血可得到0.7～0.8 g鳖血冻干样品。                          因素实验基础上，结合冻干效果及机器能耗等多方面考
          2.1.3 鳖血的粉碎均质与包装                                    虑，根据Box-Behnken实验设计原理，以溶解度（Y）为响
            将获得的鳖血冻干样品粉碎、均质为细粉末，装入                            应值，选取预冻时间（A）、干燥时间（0 ℃前的干燥时间，
          无菌西林瓶，密封保存。                                         B）、解析干燥温度（C）为因素设计 3 因素 3 水平实验。
          2.2 鳖血冻干粉制备工艺的单因素实验                                 Box-Behnken实验的因素与水平见表1，实验设计及结果
              本课题组前期研究发现，鳖血在真空冷冻干燥过程                          见表2。
          中，预冻时间、干燥时间、解析干燥温度和真空度的变化                                  表 1 Box-Behnken实验的因素与水平
          均会对鳖血冻干粉的溶解度产生影响。因此，本研究以                            水平            A（预冻时间）/h   B（干燥时间）/h  C（解析干燥温度）/℃
          鳖血冻干粉的溶解度为指标，对上述4个因素进行单因                            －1               3           11          15
          素考察。溶解度的测定参照文献[9]方法。                                    0            4           13          20
                                                                  1            5           15          25
          2.2.1 预冻时间
            设置真空度为 20 Pa；以 5 ℃为一个升温阶梯，0 ℃                     2.3.2 模型拟合与方差分析
          前干燥时间为 16 h，0 ℃后干燥时间为 7 h；解析干燥温                       利用 Design-Expert 12 软件对表 2 中数据结果进
          度为10 ℃。考察预冻温度为－50 ℃时，预冻2、3、4、6、                     行二次多元回归拟合，得到各因素对鳖血冻干品溶解
          12 h对鳖血冻干粉溶解度的影响。结果显示，在上述预                          度 的 二 次 回 归 方 程 ：Y＝－379.869  81+74.979  75A+
          冻时间下鳖血冻干粉的溶解度分别为 86.93%、93.51%、                     49.858  62B－0.349  55C+0.332  5AB+0.147  5AC+
                                                                                  2
                                                                                                        2
                                                                                             2
          95.10%、95.57%、97.16%，即预冻时间越长，溶解度越高。                 0.140 5BC－10.095 75A －2.085 81B －0.042 63C 。回
          综合机器能耗选择预冻时间4 h为中值进行进一步筛选。                          归方程的方差分析结果见表3。
          · 1574 ·    China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 13                            中国药房  2023年第34卷第13期
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