Page 48 - 《中国药房》2023年13期
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肠炎通常由细菌、病毒和寄生虫等因素引起，临床                          Polygonum bistorta L. 的干燥根茎、罂粟科白屈菜 Cheli‐
          表现为恶心呕吐、腹痛腹泻、稀便血便等，部分患者有发                           donium majus L.的干燥地上部分。
          热或里急后重的感觉。肠炎按病程长短可分为急性和                                 葡聚糖磷酸钠（dextran sulfate sodium salt，DSS）购
                                [1]
          慢性肠炎，其发病率极高 ，且患病人群呈年轻化趋势，                           自北京酷来搏科技有限公司；羧甲基纤维素钠购自上海
                                               [2]
          给人们的健康和生活质量带来了极大影响 。目前，肠                            山浦化工有限公司；人尿粪隐血测定试剂盒（批号C027-
          炎的临床治疗药物主要有柳氮磺吡啶、5-氨基水杨酸、                           1-1）购自南京建成生物工程研究所；苏木素染色液、伊
          糖皮质激素类等，但均会引发不良反应或存在一定的局                            红染色液均购自珠海贝索生物技术有限公司；小鼠磷酸
              [3]
          限性 。近年来中药民族药因疗效好、毒副作用小                      [4―5] ，  甘 油 醛 脱 氢 酶（glyceraldehyde-3-phosphate  dehydroge‐
          逐渐受到研究者的关注。挖掘民族药方多成分、多靶点                            nase，GAPDH）、白细胞介素 6（interleukin 6，IL-6）、IL-
          的特性，是发现治疗药物的有效途径。                                   1β、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor α，TNF-α）、蛋
              吾孜德克（Wuzdekh，WZDK）出自哈萨克族古代医                     白激酶 B1（protein kinase B1，AKT1）、肿瘤蛋白 p53（tu‐
                              [6]
          学经典《奇帕格尔巴彦》（汉译名《医药志》），现载于《中                         mor protein p53，TP53）引物均由生工生物工程（上海）股
          国民族药医院制剂目录（第四卷）》 。该方由白屈菜                            份有限公司合成；TransScrip一步式gDNA去除及cDNA
                                          [7]
          Chelidonii Herba、木香 Aucklandiae Radix、拳参 Bistortae   合成试剂盒（批号AT311-03）、PerfectStart染料法荧光定
          Rhizoma 3 味中药材配伍组成，已在新疆阿勒泰地区应                       量预混试剂盒（批号AQ601-02）均购自北京全式金生物
          用数十年，具有清热解毒、止痢、止痛之功效，可用于急                           技术股份有限公司；甲醇、乙腈、甲酸为质谱纯，其余试
          慢性胃肠炎及消化不良引起的腹泻腹痛等症状，疗效确                            剂为实验室常用规格。
          切。但 WZDK 治疗肠炎的药效物质基础、信号通路、作                         1.3 实验动物
          用靶点等尚未阐明，缺乏实验研究基础。本研究通过液                                本研究所用动物为SPF级雄性C57BL/6小鼠，共70
          相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）技术联合网络药理学和                        只，体质量 18～22 g，由新疆医科大学动物实验中心提
          分子对接技术，筛选WZDK的主要化学成分并进行靶点                           供，实验动物生产许可证号为SCXK（新）2018-0002。将
          预测，构建“化学成分-靶点-疾病”可视化网络，并通过小                         小鼠分笼后常规饲养于新疆维吾尔自治区药物研究所
          鼠急性肠炎模型进行靶点验证，以期为全面深入地探索                            动物房，饲养期间正常饮食。饲养环境温度为 20～
          WZDK治疗肠炎的物质基础和作用机制提供科学依据。                           26 ℃，相对湿度为 40%～60%，12 h/12 h 明暗交替。适
          1 材料                                                应性喂养1周后开始实验。本实验经新疆维吾尔自治区
          1.1 主要仪器                                            药物研究所实验动物伦理委员会批准后实施，伦理号为
              Vanquish 型超高效液相色谱仪、Orbitrap Exploris            XJIMM-20220415001。
          120型高分辨质谱仪、Heraeus Fresco17型离心机均购自                  2 方法
          美国 Thermo Fisher Scientific 公司；BSA124S-CW 型电        2.1 WZDK的制备
          子天平购自德国Sartorius公司；JXFSTPRP-24型研磨仪                      取白屈菜饮片 560 g、木香饮片 420 g，加 10 倍量
          购自上海净信实业发展有限公司；YM-080S型超声仪购                         70% 乙醇提取 1 h×2 次，以 100 目筛滤过，合并滤液，
          自深圳市方奥微电子有限公司；SpectraMax M2 型多功                     60 ℃减压浓缩得相对密度为1.20～1.25的醇提浸膏，备
          能酶标仪购自美谷分子仪器（上海）有限公司；CFX96型                         用。将白屈菜、木香药渣和拳参最粗粉560 g混合，加10
          实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）扩         倍量水提取1 h×2次，以100目筛滤过，合并滤液，60 ℃
          增仪购自美国Bio-Rad公司。                                    减压浓缩得相对密度为 1.20～1.25 的浸膏，与醇提浸膏
          1.2 主要药品与试剂                                         合并（总得率为 24.81%）；60 ℃真空干燥，粉碎过 100 目
              肠炎宁片（批号 2109007，规格 0.42 g/片）购自江西                筛，再与乳糖按质量比1∶1.5的比例混匀，用80%乙醇制
          康恩贝中药有限公司；美沙拉嗪肠溶片（批号210607，规                        作软材，16 目筛制粒，50 ℃干燥，16 目筛整粒，制成
          格0.25 g/片）购自葵花药业集团佳木斯鹿灵制药有限公                        1 000 g的WZDK（每1 g含生药1.54 g）。
          司。木香饮片（批号8210913001，产地云南）购自河北百                      2.2 WZDK化学成分分析
          合健康药业有限公司，拳参饮片（批号 201002，产地甘                            采用LC-MS/MS技术分析WZDK的化学成分。
          肃）购自安徽百岁堂中药饮片有限公司，白屈菜饮片购                            2.2.1 供试品溶液的制备
          自安徽省亳州中药材专业市场，以上 3 种饮片经新疆                             精密称取WZDK 100 mg，加入提取液甲醇-水（4∶1，
          维吾尔自治区药物研究所何江研究员鉴定，分别为菊                             V/V）500 μL，涡旋 30 s，45 Hz 匀浆 4 min，冰水浴超声
          科木香 Aucklandia lappa Decne. 的干燥根茎、蓼科拳参             （频率 40 kHz，功率 480 W）1 h，－40 ℃静置 1 h 后，于


          · 1578 ·    China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 13                            中国药房  2023年第34卷第13期
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