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特点  [1―2] 。临床实践表明，该药对癫痫患者认知功能障                      2 方法与结果
                              [3]
          碍具有一定的改善作用 。                                        2.1 色谱条件
              奥卡西平片现行质量标准有关物质的测定均采用                               以 ZORBAX Eclipse Plus C18 （3 mm×150 mm，1.8
          高效液相色谱（HPLC）法         [4―6] 。本课题组前期在对 2020          μm）为色谱柱，乙腈为流动相A、0.01 mol/L乙酸铵溶液
          年版《中国药典》（二部）奥卡西平片“有关物质”项下方                         （用冰醋酸调节pH至6.0）为流动相B进行梯度洗脱（洗
          法进行验证时发现，杂质 K 和杂质 L 的色谱峰重叠，杂                        脱程序见表1）；流速为0.5 mL/min；检测波长为230 nm；
                                                              柱温为35 ℃；进样量为10 μL。
          质 I 的色谱峰拖尾严重；同时，该法流动相的 pH 为 3.0，
                                                                             表1 梯度洗脱程序
          该酸性条件易使奥卡西平生成酰胺-亚胺醇式互变异构
                                                              时间/min            A/%                 B/%
            [7]
          体 ，从而导致干扰峰的出现，分离效果有限。奥卡西平
                                                               0                 25                  75
          片现行进口注册标准所用 HPLC 法的分析时长为 65                         21                 25                  75
          min，流动相组成较为复杂，杂质C和杂质E色谱峰的分                          30                 40                  60
                                                              30.1               25                  75
          离度小于 1.5，分离效果欠佳。为进一步优化奥卡西平                          40                 25                  75
          制剂有关物质的检测方法，加强其质量控制，本研究参                            2.2 溶液的制备
          考《美国药典》（USP 43）、《欧洲药典》（EP 10.0）和进口注                 2.2.1 溶剂 称取适量抗坏血酸，加水溶解，制成浓度
          册标准对已知杂质（杂质 A、B、C、D、E、I、K、L、N）的要                    为 0.01 mol/L 的抗坏血酸溶液，再与乙腈按体积比 1∶1
          求 [5―6] ，采用分析速度快、灵敏度和分离效率高的超高效                      混合，作为溶剂。
          液相色谱（ultra-high performance liquid chromatography，  2.2.2 混合对照品溶液 精密称取奥卡西平对照品适
          UPLC）法对上述杂质进行定量分析，现报道如下。                            量，置于100 mL容量瓶中，加“2.2.1”项下溶剂溶解并稀
          1 材料                                                释至刻度，摇匀，得奥卡西平质量浓度约为0.1 mg/mL的
          1.1 主要仪器                                            对照品溶液；精密称取杂质A、B、C、D、E、I、K、L、N对照
                                                              品各适量，分别置于 25 mL 容量瓶中，加乙腈适量并超
              本研究所用主要仪器包括 Waters Acquity 型 UPLC
                                                              声使溶解，用“2.2.1”项下溶剂稀释至刻度，摇匀，得杂质
          仪（美国Waters公司）、MSA36S-OCE-DH型百万分之一
                                                              A 质量浓度约为 500 μg/mL，杂质 D、I 质量浓度均约为
          电子天平（德国 Satorious 公司）、KQ-500DE 型数控超声
                                                              200 μg/mL，杂质 B、C、E、K、L、N 质量浓度均约为 100
          波清洗器（昆山市超声仪器有限公司，频率40 kHz，功率
                                                              μg/mL的单个杂质对照品储备液；精密量取上述奥卡西
          500 W）等。
                                                              平对照品溶液及单个杂质对照品储备液各1 mL，置于同
          1.2 主要药品与试剂
                                                              一100 mL容量瓶中，用“2.2.1”项下溶剂稀释至刻度，摇
              奥 卡 西 平 对 照 品（批 号 100657-201102，纯 度             匀，得混合对照品溶液。
          99.8%）、杂质A（批号100142-201706，纯度100.0%）均购              2.2.3 系统适用性待测溶液 精密量取“2.2.2”项下奥
          自中国食品药品检定研究院；杂质 B（批号 0202-RC-                       卡西平对照品溶液及单个杂质对照品储备液各0.5 mL，
          0020，纯度 99.8%）购自广州佳途科技股份有限公司；杂                      置于同一 100 mL 容量瓶中，用“2.2.1”项下溶剂稀释至
          质C（批号25-MAY-20-05，纯度99.5%）、杂质D（批号17-                刻度，摇匀，得系统适用性待测溶液。
          MAY-20-06，纯度 99.87%）、杂质 I（批号 19-MAY-20-02，          2.2.4 供试品溶液 将本品粉碎，取细粉适量（约相当
          纯 度 96.3%）、杂 质 K（ 批 号 13-NOV-21-03，纯 度              于奥卡西平100 mg），精密称定，置于100 mL容量瓶中，
          96.27%）、杂质 L（批号 19-SEP-21-04，纯度 97.66%）、杂           加“2.2.1”项下溶剂适量，在 23 ℃下超声 15 min，振摇使
          质 N（批号 11-JUN-18-01，纯度 99.9%）均购自美国 QCC              溶解；再用“2.2.1”项下溶剂稀释至刻度，摇匀，滤过，取
                                                              续滤液，得供试品溶液。
          公司；杂质 E（批号 0872011，纯度 99.9%）购自北京坛墨
                                                              2.2.5 空白辅料溶液 按处方比例称取空白辅料 37.5
          质检科技股份有限公司；奥卡西平片原研制剂（批号分
                                                              mg，置于 25 mL 容量瓶中，用“2.2.1”项下溶剂稀释至刻
          别为 TT434、TV270、T2391，规格均为 300 mg）由瑞士
                                                              度，摇匀，滤过，取续滤液，得空白辅料溶液。
          Novartis 公司生产；奥卡西平片仿制制剂分别由国内Ⅰ
                                                              2.3 系统适用性试验
          企业（批号分别为 18108、19030、19410，规格均为 300
                                                                  取“2.2”项下系统适用性待测溶液、供试品溶液（批
          mg）和国内Ⅱ企业（批号分别为 18054、18043、19003，规                 号 18108）和空白辅料溶液，按“2.1”项下色谱条件进样
          格均为300 mg）生产；空白辅料由国内Ⅰ企业提供；抗坏                        测定，记录色谱图。结果显示，各色谱峰的分离度均
          血酸（批号 XC27K030，纯度≥99.0%，分析纯）购自德国                    大于 1.5，奥卡西平及各杂质色谱峰的理论板数均超过
          CNW 公司；乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为                          5 000，空白辅料和溶剂对主峰无干扰。结果见图 1A～
          超纯水。                                                图1C。


          · 1200 ·    China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 10                            中国药房  2023年第34卷第10期
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