Page 78 - 《中国药房》2023年7期
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3.2 母-子离子对的优化                                       结果显示，藏黄堇药材的基原界定不清晰，生长地域差
              在上述优化条件下，一级质谱图中 3 种生物碱的分                        异性大，市场流通混乱，临床使用不规范。因此，有必要
          子离子峰均为基峰，因此定性、定量分析的母离子均选                            加大藏黄堇的资源调查和品种整理力度，从化学、药理
          择分子离子峰。在 15～80 eV 范围内改变碰撞能量，观                       层次梳理其品种属性，进而界定其基原，提升其质量评
          察荷包牡丹碱（母离子 m/z 368.1）的串联质谱图，发现                      价、资源保护与开发水平。
          m/z 307.0 的碎片离子比较稳定，多为基峰，因此确定其                          综上所述，本文所建立的 UPLC-MS/MS 分析方法
          定量的母-子离子对为m/z 368.1→307.0，在该条件下检测                   选择性好、准确度高，适用于紫堇属植物中荷包牡丹碱、
          的灵敏度最高。同理，获得原阿片碱和黄连碱的 MRM                           原阿片碱和黄连碱的快速分析。3种生物碱总量在不同
          离子对分别为m/z 354.1→188.0、m/z 320.0→204.0。              基原药材中的含量从高到低依次为金球黄堇、尖突黄
              在相同实验条件下进行液相色谱-质谱分析时，如                          堇、矮黄堇、尼泊尔黄堇和斑花黄堇，其中金球黄堇和尖
          果某色谱峰的保留时间与对照品一致，并且在扣除背景                            突黄堇中的生物碱含量比较接近，但斑花黄堇和尼泊尔
          后的质谱或串联质谱图中所选择的离子均出现，则基本                            黄堇中未检测到荷包牡丹碱。
          可以确定该色谱峰的归属。但在复杂基质中，假阳性鉴                            参考文献
          定结果时有发生。为进一步提高定性分析的准确度，                             [ 1 ]  李惠敏，李凤超，张艺，等. 紫堇属药用植物品种及标准
          液相色谱与串联质谱联用技术提供了基于 MRM 定性                                整理研究[J]. 中国中药杂志，2022，47（8）：2257-2265.
          离 子对丰度比的限定标准：＞50%，允许±20% 的偏                         [ 2 ]  卫生部药典委员会 . 中华人民共和国卫生部药品标准：
          差；＞20%～50%，允许±25% 的偏差；10%～20%，允                          藏药：第一册[M].北京：人民卫生出版社，1995：115．
                                                 [10]
          许±30% 的偏差；＜10%，允许±50% 的偏差 。如图 2                     [ 3 ]  中国科学院中国植物志编辑委员会. 中国植物志：第六
                                                                   卷第一分册[M]. 北京：科学出版社，1999：360.
          所示，以荷包牡丹碱为例，质量浓度为58.80 ng/mL的荷
                                                              [ 4 ]  吴江，马如媛，林鹏程. 斑花黄堇质量标准研究[J]. 中成
          包 牡 丹 碱 对 照 品 溶 液 中 MRM 离 子 对（m/z  368.1→
                                                                   药，2022，44（9）：2971-2974.
          307.0、m/z 368.1→276.8）的相对丰度比为 62.9，偏差为
                                                              [ 5 ]  苏丹丹，刘玉萍，张雨，等. 青藏高原特有植物尼泊尔黄
          0.1%，样品中为 65.6，偏差为 4.1%，远小于 20% 的限定                      堇研究现状及其种质资源保护[J]. 农业与技术，2021，41
          值，表明定性结果可靠，样品中该峰为荷包牡丹碱。同                                （7）：1-3.
          理，本文选定的另外2种生物碱的定性分析离子对也符                            [ 6 ]  西藏卫生局. 藏药标准：第一、二分册合编本[M]. 西宁：
          合限定要求，从而提高了色谱峰鉴定的准确度。                                    青海人民出版社，1979：97.
          3.3 3种生物碱在藏黄堇中的分布                                   [ 7 ]  嘎务 . 藏药晶镜本草：修订本[M]. 北京：民族出版社，
              藏黄堇药材均需野外采集，药材收集是研究瓶颈。                               1995：1-6.
          迄今为止，仅有少数文献基于有限的样品批次报告了斑                            [ 8 ]  魏怀玲，刘耕陶. 紫堇灵、乙酰紫堇灵及原鸦片碱对小鼠
                              [11]
          花黄堇中生物碱的含量 ，尚未见其他藏黄堇品种及其                                 实验性肝损伤的保护作用[J]. 药学学报，1997，32（5）：
          化合物的含量测定文献。本研究发现，上述3种生物碱                                 331-336.
          在金球黄堇、尖突黄堇和矮黄堇中均有分布，但斑花黄                            [ 9 ]  尚伟庆，陈月梅，高小力，等. 紫堇属藏药的化学与药理
                                                                   学研究进展[J]. 中国中药杂志，2014，39（7）：1190-1198.
          堇和尼泊尔黄堇中未检测到荷包牡丹碱。3种生物碱总
                                                              [10]  闵涛，刘少丹，辛国斌，等.8种常见药（毒）物LC-MS/MS
          量在不同基原药材中的含量从高到低依次为金球黄堇、                                 定性分析的保留时间和离子丰度比[J]. 法医学杂志，
          尖突黄堇、矮黄堇、尼泊尔黄堇和斑花黄堇，其中金球黄
                                                                   2020，36（2）：216-222.
          堇和尖突黄堇中的生物碱含量比较接近。由于矮黄堇                             [11]  王志波，吴江，李成思，等 . HPLC 法同时测定藏药斑花
          和尼泊尔黄堇分别只收集到1批，数据缺乏代表性，仅作                                黄堇中3种生物碱的含量[J]. 中华中医药杂志，2018，33
          参考。荷包牡丹碱是不同黄堇品种间的显著性差异化                                 （7）：3115-3117.
          合物，基于现有样品的分析，荷包牡丹碱含量的高低可                            [12]  QIAO R F，ZHOU L F，ZHONG M Y，et al. Spectrum-
          用于区分斑花黄堇与其他黄堇（表2）。斑花黄堇中除了                                effect  relationship  between  UHPLC-Q-TOF/MS  finger‐
          未检测到荷包牡丹碱外，另2种生物碱的含量也低于其                                 print  and  promoting  gastrointestinal  motility  activity  of
          他品种，表明斑花黄堇与其他品种的化学差异较大，这                                 Fructus aurantii based on multivariate statistical analysis
          与笔者团队前期的指纹图谱研究结果一致。需要指出                                  [J]. J Ethnopharmacol，2021，279：114366.
          的是，斑花黄堇是青海产黄堇的主流品种，尚不能仅以                            [13]  李健康，张敏，刘校妃，等. UPLC-MS/MS快速测定茯苓
                                                                   中去氢土莫酸和茯苓酸的含量[J]. 中国实验方剂学杂
          上述3种生物碱的含量高低来评价其质量优劣。由于藏
          区特殊的生长环境，高原植物多含有丰富的黄酮和多酚                                 志，2017，23（4）：85-88.
                                                              [14]  易欢，彭芳，谢雨宸，等 . HPLC-QqQ-MS 法同时测定八
          类成分。因此，除了生物碱，黄酮、多酚类化合物可能也
                                                                   味小檗皮胶囊中 25 种成分的含量[J]. 中国药房，2022，
          与藏黄堇的药用功效有关。                                             33（14）：1682-1687.
              受地理环境、自然资源、医药文化、研究条件等限                                        （收稿日期：2022-10-31  修回日期：2022-12-01）
          制，藏黄堇的基础研究十分薄弱。笔者团队的前期调研                                                                （编辑：舒安琴）



          · 836 ·    China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 7                               中国药房  2023年第34卷第7期
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