Page 77 - 《中国药房》2023年7期

368.1→307.0，368.1→276.8 354.1→188.0，354.1→148.9 按“2.2”“2.3”项下色谱和质谱条件进样测定，采用外标
Ratio＝62.9（99.9%） Ratio＝27.1（100.2%）
法计算样品中3种生物碱的含量，结果见表2。由表2可
100 100 知，金球黄堇、尖突黄堇中荷包牡丹碱的平均含量分别
80
80
相对丰度比 60 相对丰度比 60 为328.8、465.8 μg/g，原阿片碱的平均含量分别为2 360、
40
40
20
0 20 0 1 683 μg/g，黄连碱的平均含量分别为115.9、175.5 μg/g；
斑花黄堇未检测到荷包牡丹碱（含量低于检测限），原阿
2.5 3.0 3.5 4.0 3.5 4.0 4.5 5.0 片碱的平均含量为 827 μg/g，黄连碱的平均含量为 17.0
t/min t/min
A.荷包牡丹碱对照品 B.原阿片碱对照品 μg/g；矮黄堇中荷包牡丹碱的平均含量为23.7 μg/g，原阿
320.0→204.0，320.0→175.8 368.1→307.0，368.1→276.8 片碱的平均含量为 807 μg/g，黄连碱的平均含量为
Ratio＝33.2（102.3%） Ratio＝65.6（104.1%）
100 100 282.5 μg/g；尼泊尔黄堇未检测到荷包牡丹碱（含量低于
80 80 检测限），原阿片碱的平均含量为954 μg/g，黄连碱的平
相对丰度比 60 相对丰度比 60 均含量为106.6 μg/g。
40
40
20
0 20 0 表2 27 批藏黄堇样品中 3 种生物碱的含量测定结果
（x±s，n＝3）
4.0 4.5 5.0 4.5 2.5 3.0 3.5 4.0
t/min t/min 荷包牡丹碱 原阿片碱 黄连碱
C.黄连碱对照品 D.样品中的荷包牡丹碱 编号
含量/（μg/g） RSD/% 含量/（μg/g） RSD/% 含量/（μg/g） RSD/%
354.1→188.0，354.1→148.9 320.0→204.0，320.0→175.8 A1 23.7±1.7 7.3 807±12 1.4 282.5±10.7 3.8
Ratio＝27.7（102.2%） Ratio＝32.8（101.0%）
JQ1 735.1±14.1 1.9 1 914±28 1.5 84.5±5.7 6.7
100 100
JQ2 835.6±7.1 0.8 3 418±11 0.3 173.0±9.9 5.7
80 80
相对丰度比 60 相对丰度比 60 JQ3 23.6±1.7 7.2 379±16 4.1 116.2±7.1 6.1
7.6
16.9±1.3
JQ4
5.8
388±15
3.7
120.2±6.9
40
40
32.7±2.6
20
1.8
7.6
65.5±5.0
JT1
2 918±54
0 20 0 JQ5 1 012.3±5.7 7.8 5 701±4 0.1 85.6±5.1 5.9
0.6
3.5 4.0 4.5 5.0 4.0 4.5 5.0 4.5 JT2 177.9±9.2 5.2 786±17 2.2 123.0±6.7 5.4
t/min t/min JT3 1 010.7±18.4 1.8 1 353±27 2.1 91.0±5.4 5.9
E.样品中的原阿片碱 F.样品中的黄连碱
JT4 711.3±11.4 1.6 2 946±8 0.3 155.4±8.5 5.5
图2 混合对照品与样品的离子相对丰度比 JT5 257.9±12.6 4.9 882±16 1.8 283.1±13.1 4.6
JT6 607.2±7.4 1.2 1 765±13 0.7 421.2±9.6 2.3
品中3种生物碱的含量。结果显示，荷包牡丹碱、原阿片
JT7 515.9±9.9 1.9 1 916±4 0.2 408.6±10.5 2.6
碱、黄连碱含量的 RSD 分别为 1.8%、1.9%、2.0%（n 均为 JT8 390.3±11.3 2.9 1 775±13 0.7 251.8±12.2 4.8
6），表明该方法重复性良好。 JT9 318.5±10.0 3.2 1 440±26 1.8 137.4±7.4 5.4
2.4.5 加样回收率试验 取已知含量的藏黄堇（编号 JT10 315.4±9.2 2.9 1 246±17 1.4 112.0±7.3 6.5
JT11 304.8±10.1 3.3 1 418±24 1.7 115.0±6.8 5.9
JQ1）粉末 6 份，每份 0.25 g，精密称定，再分别精密吸取
JT12 335.2±10.2 3.1 1 144±22 1.9 109.9±6.9 6.3
荷包牡丹碱对照品溶液（117.60 μg/mL）1.5 mL、原阿片 JT13 294.8±11.1 3.8 1 489±23 1.5 126.8±7.6 6.0
碱对照品溶液（107.40 μg/mL）5 mL、黄连碱对照品溶液 JT14 734.9±17.4 2.3 2 737±27 1.0 212.9±9.6 4.5
（97.00 μg/mL）0.25 mL，置具塞锥形瓶中，挥干甲醇，然 JT15 － － 1 432±23 1.6 19.1±1.3 6.6
NBE1 － － 954±12 1.3 106.6±6.9 6.4
后按“2.1.2”项下方法制备藏黄堇加样回收样品溶液，按
BH1 － － 691±16 2.2 35.6±2.3 6.4
“2.2”“2.3”项下色谱和质谱条件进样测定，计算加样回 BH2 － － 1 772±31 1.8 24.8±1.8 7.1
收率。结果显示，荷包牡丹碱、原阿片碱、黄连碱的平均 BH3 － － 976±23 2.3 21.1±1.5 7.3
加样回收率分别为 97.41%、98.89%、105.44%，RSD 分别 BH4 － － 343±10 2.8 3.7±0.3 8.0
为3.2%、3.8%、4.8%（n均为6），表明该方法准确度良好。 BH5 － － 354±10 2.9 － －
2.4.6 检测限与定量限 分别取荷包牡丹碱、原阿片 －：未检出
碱、黄连碱对照品储备液加 0.1% 甲酸水溶液逐级稀释 3 讨论
后按“2.2”“2.3”项下色谱和质谱条件进样测定，以信噪 3.1 实验条件的优化
比3∶1的对照品溶液质量浓度为检测限，以信噪比10∶1 碱性化合物很容易加合质子，带正电荷，适合用ESI
的对照品溶液质量浓度为定量限。结果显示，荷包牡丹 正离子模式检测 [12―14] 。本文的3个目标分析物均为生物
碱的检测限为1.17 ng/mL，定量限为2.35 ng/mL；原阿片 碱，预实验结果验证了ESI正离子模式下的信噪比显著高
碱的检测限为0.54 ng/mL，定量限为1.07 ng/mL；黄连碱 于ESI负离子模式下的信噪比。由于酸性系统容易加合质
的检测限为0.49 ng/mL，定量限为1.46 ng/mL。 子，更适合ESI正离子模式，故本研究考察了甲醇-0.05%
2.5 样品测定 甲酸水溶液、甲醇-0.1%甲酸水溶液、乙腈-0.05%甲酸水
取不同基原的 27 批藏黄堇药材，每批次平行 3 份， 溶液、乙腈-0.1%甲酸水溶液等多种流动相体系，最终确
分别按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液。分别精密吸 定以乙腈-0.1% 甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱，所
取“2.4.1”项下系列标准溶液与上述供试品溶液各5 μL， 得色谱图峰形对称、分离效果好、基线平稳。
中国药房 2023年第34卷第7期 China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 7 · 835 ·