Page 75 - 《中国药房》2023年7期
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黄堇，用于清热解毒、止血镇痛、活血散瘀、祛风利                            剂有限公司；水为屈臣氏蒸馏水，其他试剂均为分析纯。
          气 [1―5] 。在临床与药材市场上，藏黄堇的“地域性”与“多                              表1 27批藏黄堇药材样品信息
          基原”情况很突出，历版藏药典籍、各地方标准、部颁标                           基原/藏文名            编号  采集或购买时间      产地或购买地
          准中关于藏黄堇的基原描述多不一致                [2,6―7] 。西藏以尖突      矮黄堇C. pygmaea/日官孜玛  A1  20210913  山南市乃东区雅拉香布雪山
          黄堇、金球黄堇、尼泊尔黄堇和矮紫堇为主；青海以斑花                           金球黄堇C. chrysosphaera/车日丝哇  JQ1  20210913  拉萨市售商品药材
                                                                                JQ2  20210913  那曲市嘉黎县措多乡
          黄堇为主；云南、四川以尼泊尔黄堇和尖突黄堇为主。
                                                                                JQ3  20210913  林芝市
          紫堇属植物多含生物碱，包括异喹啉类、有机胺类、异吲                                             JQ4  20210913  林芝市
          哚类等，其中原阿片碱与原小檗碱等化合物在紫堇属植                                              JQ5  20211018  山南市
          物中分布较广，并具有广泛的生物活性                 [8―9] 。如原阿片       尖突黄堇C. mucronifera/当日丝哇  JT1  20220117  那曲市安多县帮爱乡
                                                                                JT2  20220117  拉萨市墨竹工卡县尼玛江热乡仲达村
          碱，研究显示其对四氯化碳、硫代乙酰胺、对乙酰氨基酚
                                                                                JT3  20220117  那曲市安多县岗尼乡
          所致的小鼠肝损伤有保护作用，可以显著降低谷丙转氨                                              JT4  20220117  那曲市嘉黎县
                               [8]
          酶水平，减轻肝损伤程度 。不同基原、产地的药材间存                                             JT5  20220117  拉萨市墨竹工卡县门巴乡达珠村
          在化学成分差异，导致药效作用也可能有所区别，因此                                              JT6  20220117  昌都市
                                                                                JT7  20220117  昌都市蓝宝石药材有限公司
          有效区分不同基原、产地藏黄堇活性成分差异是其质量
                                                                                JT8  20220117  那曲市班戈县
          评价的关键环节。                                                              JT9  20220221  拉萨市售商品药材
              藏药材的基础研究相对滞后，现有的藏药质量标准                                            JT10  20220221  拉萨市售商品药材
          缺少完整的检查与含量测定项。有关藏黄堇的含量测                                               JT11  20220221  拉萨市售商品药材
                                                                                JT12  20220221  拉萨市售商品药材
          定，笔者团队仅检索到斑花黄堇中异紫堇定、比枯枯灵
                                                                                JT13  20220221  拉萨市售商品药材
          和四氢巴马汀的高效液相色谱（high performance liquid                                 JT14  20220221  拉萨市售商品药材
                                                 [10]
          chromatography，HPLC）分析，且未见测定结果 。笔者                                    JT15  20220221  西藏藏医学院藏药有限公司
          团队前期收集了27份藏黄堇样本，建立了其HPLC指纹                          尼泊尔黄堇C. hendersonii/热衮巴  NBE1  20220225  那曲市
          图谱，发现荷包牡丹碱、原阿片碱和黄连碱为其特征性                            斑花黄堇C. conspersa/东日丝哇  BH1  20210913  索县藏医院
                                                                                BH2  20210913  西藏昌都日通藏医药研制中心藏药厂
          差异成分，继而尝试建立该 3 种生物碱的 HPLC 含量测                                         BH3  20210913  那曲市嘉黎县
          定方法，但发现HPLC的分离度与检测灵敏度尚不能满                                             BH4  20220314  拉萨市售商品药材
          足一些低含量样品的分析要求（论文待发表）。近年来，                                             BH5  20220314  拉萨市售商品药材
          液相色谱与串联质谱联用技术已广泛应用于复杂样品                            2 方法与结果
          的含量测定，实现了难分离、低含量组分的定量                     [11―13] 。  2.1 溶液的配制
          鉴于此，本研究采用超高效液相色谱-三重四极杆质谱                           2.1.1 混合对照品溶液的制备 精密称取荷包牡丹碱
          联 用（ultra  performance  liquid  chromatography-tandem   对照品11.76 mg、原阿片碱对照品10.74 mg、黄连碱对照
          quadrupole mass spectrometry，UPLC-MS/MS）技术同时       品9.70 mg，分别置于100 mL容量瓶中，加入甲醇溶解并
          测定不同基原藏黄堇中荷包牡丹碱、原阿片碱和黄连碱                           稀释至刻度，即得含荷包牡丹碱 117.60 µg/mL、原阿片
          3 种生物碱的含量，以期为藏黄堇基原的确定和质量标                          碱 107.40 µg/mL、黄连碱 97.00 µg/mL 的单一对照品储
          准的制定提供一定的科学依据。                                     备液。分别精密移取荷包牡丹碱对照品储备液1 mL、原
          1 材料                                               阿片碱对照品储备液10 mL、黄连碱对照品储备液1 mL，
          1.1 主要仪器                                           置于同一 100 mL 容量瓶中，加入 0.1% 甲酸水溶液稀释
              1290/6460 型 UPLC-MS/MS 仪购自美国 Agilent 公         至刻度，即得混合对照品溶液。
          司；XSR105 型十万分之一电子天平、ME-204 型万分之                    2.1.2 供试品溶液的制备 取藏黄堇粉末（过3号筛）约
          一电子天平购自瑞士 Mettler Toledo 公司；KQ-100DE 型             0.5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入 60% 甲醇
          数控超声波清洗器购自昆山市超声仪器有限公司。                             50 mL，密塞，称定质量，浸泡15 min后超声（功率100 W，
          1.2 主要药品与试剂                                        频率 40 kHz）处理 30 min，放冷，再称定质量，用 60% 甲
              27批藏黄堇药材采集或购自西藏各地区，均经江西                        醇补足减失的质量，摇匀，滤过；取续滤液 1 mL 置于
          中医药大学中药资源与民族药研究中心慕泽茎、杜小浪                           100 mL容量瓶中，用0.1%甲酸水溶液稀释至刻度，即得
          2位副教授鉴定为真品（具体样品信息见表1），均备份保                         供试品溶液。
          存于江西中医药大学现代中药制剂教育部重点实验室。                           2.2 色谱条件
          荷包牡丹碱对照品（批号PS2038-0025，含量99.96%）、原                     选 择 Agilent  EC-C18 色 谱 柱（100  mm×2.1  mm，
          阿片碱对照品（批号 PS011355，含量 99.92%）均购自成                  2.7 μm）；流动相为乙腈（A）-0.1% 甲酸水溶液（B），
          都普思生物科技股份有限公司；黄连碱对照品（批号                            梯 度 洗脱（0～1 min，20%A；1～4 min，20%A→30%A；
          DST201105-003，含量≥98.00%）购自成都德思特生物技                 4～6 min，30%A；6～7 min，30%A→40%A；7～8 min，
          术有限公司；乙腈（色谱纯）购自美国 Thermo Fisher                    40%A→100%A）；流速为 0.2 mL/min；柱温为 35 ℃；进
          Scientific公司；甲酸（色谱纯）购自天津市科密欧化学试                    样量为5 μL。


          中国药房  2023年第34卷第7期                                                 China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 7    · 833 ·
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