Page 42 - 《中国药房》2023年4期

载其具有活血止血、祛风止痛的功效，可用于治疗跌打 表1 独一味样品来源信息
损伤、风湿痹痛、黄水病等。独一味具有多种化学成分， 样品批次 采集地或购买地 采集或购买时间
S1 青海省玉树藏族自治州杂多县 2021年8月
主要包括环烯醚萜类、黄酮类、苯乙醇苷类以及多糖
S2 青海省玉树藏族自治州囊谦县 2021年8月
[1]
类 。黄酮类成分为广泛存在于自然界植物中的次生代 S3 青海省玉树藏族自治州玉树市 2021年8月
谢产物，现代药理学研究表明该类成分具有抗炎、抗氧 S4 青海省黄南藏族自治州泽库县 2021年8月
S5 青海省果洛藏族自治州久治县 2021年8月
[2]
化、抗病毒、抗肿瘤、抗菌等多种药理活性 。目前已有 S6 青海省海南藏族自治州藏医院 2021年8月
学者发现独一味黄酮类成分具有较好的抗血小板聚集 S7 青海省海南藏族自治州三智治疗所 2021年8月
[4]
[3]
活性 和抗炎作用 。结合独一味功效，本课题组前期通 S8 西藏自治区拉萨市曲水县 2021年7月
S9 西藏自治区拉萨市达孜区 2021年7月
过网络药理学研究发现独一味黄酮类成分可能在其抗 S10 四川省甘孜藏族自治州阿坝县 2021年7月
类风湿性关节炎的过程中发挥了重要作用，特别是木犀 S11 四川省甘孜藏族自治州石渠县 2020年8月
S12 四川省甘孜藏族自治州石渠县 2020年8月
草素 ；且现代药理学研究表明木犀草素具有抗类风湿
[5]
S13 四川省甘孜藏族自治州色达县 2021年7月
性关节炎的活性 。为确证网络药理学的预测结果，本 S14 云南省迪庆藏族自治州德钦县 2021年8月
[6]
课题组前期基于佐剂性关节炎大鼠模型进行了相关研 S15 云南省迪庆藏族自治州香格里拉市 2021年8月
究，结果表明独一味黄酮类成分是独一味抗类风湿性关 2 方法与结果
[7]
节炎的关键药效物质基础之一 。 2.1 独一味总黄酮的制备
[10]
独一味总黄酮具有潜在的药效，但目前国内外学者 根据相关文献 及前期工作基础，取独一味粉末
研究独一味主要围绕其环烯醚萜类成分进行 [8―9] ，对其 100 g加入渗漉桶中，加入95%乙醇没过粉末，静置24 h
后开始提取。95% 乙醇适当流速渗漉，收集渗漉液，于
黄酮类成分的研究较为匮乏，不利于从中医药整体观角
50 °C 减压旋转蒸发回收溶剂，待回收约 30 mL 时将浓
度对独一味质量进行评价和控制。为有效控制独一味
缩的渗漉提取液与预处理的聚酰胺粉（50 g）混匀，50 °C
黄酮类提取物的质量，本研究通过渗漉法提取、聚酰胺
水浴蒸干，上样于已处理好的聚酰胺层析柱中，放置 24
柱纯化了15批不同产地独一味的总黄酮，采用紫外分光
h。先以高纯水（3倍柱体积）洗脱至无色，然后用70%乙
光度法对其含量进行测定，通过高效液相色谱（HPLC）
醇溶液（14 倍柱体积）洗脱，并收集 70% 乙醇洗脱液，减
法对其指纹图谱进行研究，并运用化学计量学对不同产
压浓缩，即得独一味总黄酮。
地独一味总黄酮的质量进行评价，旨在为独一味总黄酮 2.2 独一味总黄酮的含量测定及纯度计算
质量评价奠定基础。 采用紫外分光光度法进行独一味总黄酮的含量测
1 材料 定，并计算其纯度，含量测定方法参考2020年版《中国药

1.1 主要仪器 典》独一味片总黄酮含量测定项方法。
本研究所用主要仪器有 BP121S 型电子分析天平 2.2.1 供试品溶液的制备 取制备的独一味总黄酮样
[赛多利斯科学仪器（北京）有限公司]、DZKW-4 型电子 品 50 mg，精密称定，置于 50 mL 容量瓶中，加 70% 乙醇
恒温水浴锅[中兴伟业仪器（北京）有限公司]、RE-5203 30 mL，超声（功率200 W，频率60 kHz，下同）使溶解，放
型旋转蒸发器[亚荣生化仪器（上海）厂]、KQ-500VDE型 冷，加70%乙醇至刻度，摇匀，即得。
双频数控超声波清洗器[超声仪器（昆山）有限公司]、 2.2.2 对照品溶液的制备 取芦丁对照品 10 mg，精密
称定，置于 50 mL 容量瓶中，加 70% 乙醇 30 mL，超声使
UEF1010033 型紫外-可见分光光度计[美谱达仪器（上
溶解，放冷，加70%乙醇至刻度，摇匀，即得。
海）有限公司]、Ultimate3000 型 HPLC 仪[赛默飞世尔科
2.2.3 线性关系的考察 准确吸取对照品溶液1.0、2.0、
技（美国）公司]。
3.0、4.0、5.0、6.0 mL，分别放入 25 mL 容量瓶中，用 70%
1.2 主要药品与试剂
乙醇溶液补充至 10 mL，然后加入 1 mL 5% 亚硝酸钠溶
木犀草苷对照品（批号 MUST-21111817，纯度≥
液，摇匀后静置 6 min，加 1 mL 10% 硝酸铝溶液，摇匀，
99.0%）、木犀草素对照品（批号MUST-21072311，纯度≥
静置 6 min，再加 10 mL 1 mol/L 氢氧化钠溶液，用 70%
98.0%）均购于成都曼思特生物科技有限公司；芦丁对照
乙醇定容至 25 mL，反应 15 min 后，以相应的溶液为空
品（批号AF21020854，纯度≥98.0%）购于成都埃法生物
白参照，在其最大吸收波长处测定系列浓度下的吸光
科技有限公司；甲醇、乙腈均为色谱纯；亚硝酸钠、硝酸 度。以芦丁质量浓度（μg/mL）为横坐标（X），吸光度为
铝、氢氧化钠及乙醇均为分析纯；水为超纯水。15 批独 纵坐标（Y）绘制标准曲线，得到回归方程为Y＝10.674X，
一味药材经成都中医药大学药学院蒋桂华教授鉴定均 R ＝0.998 8，线性范围为 8.0～48.0 μg/mL。结果表明，
2
为唇形科植物 L. rotata（Benth.）Kudo 的干燥地上部分， 当芦丁质量浓度在 8.0～48.0 μg/mL 范围内线性关系
样品来源信息见表1。 良好。

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