Page 39 - 《中国药房》2023年4期

表1 蓝刺头治疗D-半乳糖诱导骨质疏松的差异代谢物
精确分子量m/z
序号 代谢物名称 分子式 母离子 偏差/ppm 保留时间/min VIP值 lg（2 Fold 值）：模型组－空白组 lg（2 Fold 值）：蓝刺头中剂量治疗组－模型组
实测值 预测值
1 苯丙氨酸 C 9H 11NO 2 [M+H] + 166.087 4 166.086 2 －7.23 6.02 4.77 3.72 －5.13
2 3，4-二羟基氢肉桂酸 C 9H 10O 4 [M+H] + 183.065 8 183.065 2 －3.23 4.02 3.05 0.96 －2.14
3 左旋肉碱 C 7H 15NO 3 [M+H] + 162.113 4 162.112 5 －5.59 2.32 2.71 －9.17 7.43
4 乙酰肉碱 C 9H 17NO 4 [M+H] + 204.124 2 204.123 0 －5.59 2.07 2.29 2.98 －2.59
5 酪氨酸 C 9H 11NO 3 [M+H] + 182.082 4 182.081 2 －6.63 3.87 1.84 5.15 －4.05
6 色氨酸 C 11H 12N 2O 2 [M+H] + 205.097 3 205.095 5 －8.78 15.23 1.42 －7.77 2.85
7 异亮氨酸 C 6H 13NO 2 [M+H] + 132.102 8 132.101 9 －6.60 2.26 1.41 －1.13 5.44
8 尿酸 C 5H 4N 4O 3 [M+H] + 169.035 7 169.037 1 8.28 3.23 1.39 2.86 －1.66
9 吲哚乙酸 C 11H 9NO 2 [M+H] + 176.070 7 176.071 6 5.11 15.23 1.37 －4.65 －0.31
10 花生四烯酸 C 20H 32O 2 [M+H] + 305.249 2 305.247 5 －5.47 33.08 1.25 5.09 －3.43
11 蛋氨酸 C 5H 11NO 2S [M+H] + 150.059 3 150.058 3 －6.34 2.28 1.25 －1.68 2.82
12 二十二碳六烯酸 C 22H 32O 2 [M+H] + 329.248 4 329.247 5 －2.64 30.60 1.19 6.58 －4.05
13 D-麦芽糖 C 12H 22O 11 [M+H] + 343.123 8 343.123 5 －0.84 2.25 1.19 3.07 －2.96
14 17-羟基-二十二碳六烯酸 C 20H 32O 3 [M+H] + 345.242 2 345.242 4 0.71 34.54 1.15 2.29 －2.22
15 组氨酸 C 6H 9N 3O 2 [M+H] + 156.077 7 156.076 8 －5.92 2.42 1.14 －5.75 3.15
16 16（R）-羟基-5，8，11，14-二十碳四烯酸 C 20H 32O 3 [M－H] － 319.227 8 319.225 1 －8.46 3.22 5.99 3.94 －3.26
17 5羟基-6-反式-8，11，14-顺式二十碳四烯酸 C 20H 32O 3 [M－H] － 319.227 8 319.226 4 －4.39 3.04 2.16 3.87 －3.12
18 癸二酸 C 10H1 8O 4 [M－H] － 201.112 9 201.113 2 1.64 1.75 2.13 －0.93 0.85
3.3.4 代谢通路分析的结果 MetaboAnalyst 通路分析 说明蓝刺头具有一定抗氧化作用。
结果显示，蓝刺头用药后共干预15条代谢通路，包括花 为进一步探究 D-半乳糖诱导对大鼠骨代谢水平与
生四烯酸代谢、苯丙氨酸代谢、酪氨酸代谢等。蓝刺头 骨微结构的影响，本研究检测了大鼠血清中 ALP、HYP
治疗骨质疏松症主要影响的代谢通路具体包括花生四 含量，并借助PET/CT检测不同组别大鼠骨微结构变化。
烯酸代谢[－lg（P）＝4.937，P＝0.007 2]、苯丙氨酸代谢 ALP与HYP是反映骨形成和骨吸收平衡的重要标志物，
[－lg（P）＝3.360，P＝0.034 7]和酪氨酸代谢[－lg（P）＝ 若两者含量升高，说明骨吸收大于骨形成，则易诱发骨
[15]
2.421 8，P＝0.028 7]。结果见图5。 质疏松 。本次研究结果也证实了这一点，模型组大鼠
体内 ALP 与 HYP 含量均显著高于空白组，说明模型组
氨酰-tRNA生物合成
大鼠体内骨吸收速率快。此外，PET/CT检测结果显示，
8
与空白组相比，模型组大鼠骨微结构出现一定程度恶
氮代谢
6
（P ） 化，如 Tb·Sp、BS/BV 均显著升高，BMD、BVF、Tb·Th、
－lg 苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成 花生四烯酸代谢
4 Tb·N 均显著降低，进一步证实了骨质疏松症的形成。
苯丙氨酸代谢
酪氨酸代谢 而蓝刺头冻干粉药液的干预则有利于上述不良情况的
2
硫胺素代谢 逆转，如给药后血清中 ALP（蓝刺头低剂量组除外）、
HYP含量和Tb·Sp、BS/BV均显著降低，BMD、BVF、Tb·
0 0.05 0.10 0.15 0.20
Pathway Impact Th、Tb·N 均显著升高。这均是蓝刺头可以改善 D-半乳
图5 蓝刺头提取物干预骨质疏松症的代谢通路分析
糖诱导的骨质疏松症临床症状的有力证据。
4 讨论 此外，代谢组学研究结果显示，蓝刺头通过花生四
老年性骨质疏松症病因包括氧化应激损伤、维生素 烯酸、苯丙氨酸、二十二碳六烯酸等代谢物，进而调控花
D 缺乏、激素变化、缺乏运动的生活方式等。本研究选 生四烯酸代谢、苯丙氨酸代谢等通路，发挥治疗 D-半乳
用D-半乳糖作为衰老诱导剂，通过氧化应激损伤诱发骨 糖诱导的骨质疏松症作用。据相关研究报道，花生四烯
[11]
质疏松症，是多数老年性骨质疏松症的造模方法 。为 酸与二十二碳六烯酸可破坏骨转化平衡，降低BMD；在
明确模型大鼠细胞氧化应激损伤程度与衰老情况，采用 骨质疏松病理状态下，花生四烯酸和二十二碳六烯酸水
MDA、SOD、TAOC 为检测指标。相关研究表明，MDA 平较高 。本次研究结果也具有以上趋势，给予蓝刺头
[16]
[12]
含量反映了体内脂质过氧化的速度 ；血清中的SOD和 冻干粉药液后，以上代谢物水平得以下调，说明蓝刺头
TAOC含量反映机体抗氧化能力 [13―14] 。本研究实验结果 可通过降低体内花生四烯酸和二十二碳六烯酸水平，进
显示，模型组血清中 MDA 含量较空白组显著升高， 而抑制骨转化平衡的破坏进程，维持骨骼组织内部稳
TAOC与SOD含量则较空白组显著降低，提示D-半乳糖 态。苯丙氨酸和酪氨酸代谢是骨组织退化的另一个重
[17]
诱导确能激活细胞氧化反应。而采用蓝刺头冻干粉药 要代谢途径 。苯丙氨酸可诱导氧化应激，且参与老年
[18]
液干预后，模型大鼠体内氧化应激指标明显得到改善， 退行性疾病的病理进展过程 。本研究中 D-半乳糖正

中国药房 2023年第34卷第4期 China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 4 · 417 ·