Page 47 - 《中国药房》2022年22期
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protein90AA1，  etc.  Pharmacodynamic  experiments  showed  that  compared  with  model  control  group，  relieved  cough，  restored  hair
          color，  sensitive  behavior，  stable  respiration  and  increased  body  weight  were  all  found  in  ST-DMN  group；  the  histopathological
          changes  as  the  structure  of  lung  tissue，  infiltration  of  alveolar  epithelial  cells  and  pulmonary  interstitial  inflammatory  cells  were
          improved  to  different  extent；  the  levels  of  PTGS2，  MMP-9  and  IL-2  in  serum，  BALF  and  lung  tissue  were  significantly  reduced
         （P＜0.05 or P＜0.01）. CONCLUSIONS The anti-BA effect of ST-DMN acupoint administration is good， the mechanism of which
          may be associated with decreasing the levels of PTGS2， MMP-9 and IL-2 in serum， BALF and lung tissue.
          KEYWORDS    sinapine   thiocyanate；   dissoluble   microneedle；   acupoint   administration；   bronchial   asthma；   target；

          pharmacodynamics


              支气管哮喘（bronchial asthma，BA）是一种受多种细              器（上海鱼跃医疗设备有限公司）。
          胞和细胞成分影响的下呼吸道异质性慢性炎症性疾                             1.2 主要药品与试剂
            [1]
          病 。BA发病因素较多，主要包括感染、粉尘、自身免疫                             ST-DMN 由本课题组自制；白芥子散敷贴剂（批号
          等，可反复出现喘息、咳嗽、胸闷和呼吸急促等症状，具                          20210720）购自贵州中医药大学第一附属医院；氢氧化
                                            [2]
          有病程长、症状易反复、难以根治的特点 。若该疾病反                          铝佐剂（批号 77161）购自美国 Thermo Fisher Scientific
          复发作，极易引发心血管疾病及肺疾病等严重并发症，                           公司；卵清蛋白（批号 MB1815）购自大连美仑生物技术
          对患者健康造成较大的威胁，对社会造成巨大的疾病负                           有限公司；戊巴比妥钠（批号 P3761）购自美国 Sigma 公
          担，因此，该疾病也被世界卫生组织（WHO）列为四大顽                         司；磷酸盐缓冲液（批号 20210911）购自北京索莱宝科
                [3]
          症之一 。目前，现代医学治疗 BA 主要以药物为主，如                        技有限公司；前列腺素内过氧化物合酶 2（prostaglandin
          支气管 β2肾上腺素受体激动剂、抗胆碱药、茶碱类和激                         endoperoxide  synthase  2，PTGS2）、基 质 金 属 蛋 白 酶 9
          素类药物等。这些药物虽然能在一定程度上缓解病情，                          （matrix metalloproteinase-9，MMP-9）、白细胞介素 2
          但难以从整体上实现根本性治疗，且相关研究发现化学                          （interleukin-2，IL-2）酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒
          药对哮喘的控制效果尚不理想，仍易反复发作                   [4―5] 。    （批号分别为 E-EL-R3021、E-EL-R0792c、E-EL-R0013c）
              白芥子始载于《名医别录》，被列为上品，其味辛，性                       购自武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司；聚乙烯吡咯
          温，无毒，入肺经，具有温肺豁痰利气、散结通络止痛之                          烷酮K30（批号BSF190822）购自合肥巴斯夫生物科技有
            [6]
          功 。有研究发现，将白芥子于穴位外用可有效治疗                            限公司；硫酸软骨素（批号20191028）购自江苏鑫瑞生物
          BA [7―9] 。现代研究表明，白芥子中的芥子碱是抗 BA 的                   科技有限公司；聚乙烯醇（批号 P21501215）购自山东优
          主要活性成分，其主要存在形式为芥子碱硫氰酸盐                             索化工科技有限公司。
                                [10]
         （sinapine  thiocyanate，ST） 。 可 溶 性 微 针（dissoluble   1.3 动物
          microneedle，DMN）是一种新型透皮给药制剂，可突破角                       本研究所用动物为 SPF 级雄性 SD 大鼠，体质量为
          质层障碍，使药物在真皮层中释放，从而解决传统穴位                          （220±20）g，购自北京华阜康生物科技股份有限公司，
          外用时大分子化合物或亲水性化合物难以透过角质层                            动物生产许可证号为 SCXK（京）2019-0008。本研究所
          的问题 。基于此，本课题组将 ST 与 DMN 技术相结                       有动物实验均遵循贵州中医药大学有关实验动物管理
                [11]
          合，制备芥子碱硫氰酸盐可溶性微针（ST-DMN），并结合                       和使用的规定，且均符合3R原则。
          网络药理学方法和分子对接技术，筛选 ST 治疗哮喘的                         2 方法
          作用靶点，然后将 ST-DMN 穴位给药 BA 模型大鼠进行                     2.1 基于网络药理学及分子对接技术筛选ST抗BA的
          动物实验验证，以期为后续ST-DMN的开发及临床应用                         作用靶点
          提供实验依据。                                            2.1.1 获取 ST 靶点 将 ST 的“sdf”结构输入 Pharm‐
          1 材料                                               Mapper（http：//www.lilab-ecust.cn/pharmmapper/）、Swiss
          1.1 主要仪器                                           Target Prediction（http：//www.swisstargetprediction.ch/）数
              本研究所用主要仪器有微针模具（台州薇凯生物科                         据库中进行初步的靶点预测，再将这2个数据库得到的
          技有限公司）、AUY220 型万分之一电子天平（日本 Shi‐                    靶点取并集，然后将取并集后的靶点（即 ST 的预测靶
          madzu公司）、AE/240型十万分之一电子天平（瑞士Met‐                   点）输入 UniProt 数据库（https：//www.uniprot.org/）中获
          tler Toledo公司）、TD5A-120型台式低速离心机（常州金                取标准化基因名。
          坛良友仪器有限公司）、KQ-500DE型数控超声波清洗器                       2.1.2 获取 BA 靶点 将“asthma”“bronchial asthma”分
         （昆山市超声仪器有限公司）、SPX-70BⅢ型生化培养箱                        别输入TTD（http：//db.idrblab.net/web/search/combination）、
          [菲斯福仪器（河北）有限公司]、Multiskan FC 型酶标仪                  Genecard（https：//www.genecards.org/）、OMIM（https：//
         （美国Thermo Fisher Scientific公司）、402A1型超声雾化           omim.org/）、Drug Bank（https：//www.drugbank.com/）、


          中国药房  2022年第33卷第22期                                              China Pharmacy  2022 Vol. 33  No. 22    · 2729 ·
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