Page 54 - 《中国药房》2022年15期

2.4 线性关系、定量限和检测限考察 表2 莫诺苷等5个成分的准确度考察结果（n＝6）
精密量取上述混合对照品溶液 0.2、0.5、1、2、5、10
mL，用80％甲醇分别定容至10 mL容量瓶中，再按“2.1”
项下色谱条件进样 10 μL，记录峰面积。以对照品的质
量浓度为横坐标（X）、峰面积为纵坐标（Y）进行线性回
归，得到5个成分的回归方程、相关系数（r）和线性范围，
结果见表1。再以信噪比10∶1、3∶1分别计算定量限和检
测限，求得莫诺苷、马钱苷、芍药苷、丹酚酸 B和淫羊藿苷
的定量限分别为0.166、0.198、0.877、0.220、0.260 μg/mL，
检测限分别为0.056、0.066、0.292、0.073、0.086 μg/mL。
表1 5个成分的线性回归考察结果
成分 回归方程 r 线性范围/（μg/mL）
莫诺苷 Y＝15 866X－3.404 1 0.999 9 4.80～240.00
马钱苷 Y＝15 881X+9.005 2 0.999 9 4.84～242.00
芍药苷 Y＝5 166X+22.674 0 0.999 8 7.00～350.00
丹酚酸B Y＝13 513X+7.384 7 0.999 8 4.72～236.00
淫羊藿苷 Y＝10 083X+2.913 2 0.999 9 5.18～259.00
2.5 精密度考察
取混合对照品溶液，按“2.1”项下色谱条件连续进样
测定6次，记录各成分峰面积。结果显示，莫诺苷、马钱
苷、芍药苷、丹酚酸 B 和淫羊藿苷峰面积的 RSD 分别为
0.42％、0.54％、1.62％、0.38％和 0.23％（n＝6），表明仪
器精密度良好。
2.6 稳定性考察
取同一批肾复康Ⅱ号胶囊（批号 20201101）制备的
供试品溶液，室温存放，分别于 0、2、4、8、12、24 h 时按
“2.1”项下色谱条件进样测定，记录各成分峰面积。结果
显示，莫诺苷、马钱苷、芍药苷、丹酚酸 B 和淫羊藿苷峰
面积的 RSD 分别为 0.65％、2.03％、0.62％、0.36％和
2.36％（n＝6），表明供试品溶液在室温下放置 24 h 内稳
定性良好。
2.7 重复性考察
取同一批肾复康Ⅱ号胶囊（批号 20201101），共 6
份，分别按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1”
项下色谱条件进样测定，记录各成分峰面积，以外标法
计算样品中 5 个成分的含量。结果显示，莫诺苷、马钱
苷、芍药苷、丹酚酸 B 和淫羊藿苷含量的 RSD 分别为
1.66％、2.36％、1.09％、0.17％和 1.45％（n＝6），表明该
方法重复性良好。
2.8 准确度考察
精密称取莫诺苷、马钱苷、芍药苷、丹酚酸B和淫羊
藿苷对照品各适量，加80％甲醇溶解并稀释，制成上述5
个成分质量浓度依次为 1.000、0.816、2.984、2.860、0.616
mg/mL 的单一对照品溶液。精密称取已知 5 个成分含
量的肾复康Ⅱ号胶囊（批号 20201101）内容物约 0.25 g，
共6份，精密加入各单一对照品溶液，再按“2.2.2”项下方
法制成供试品溶液后，按“2.1”项下色谱条件进样分析，
计算各成分的平均加样回收率，结果表明方法准确度良
好，详见表2。
·1840 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 15
取样量/ 已知量/ 加入量/ 测得量/ 加样回 平均加样 RSD/
成分
g mg mg mg 收率/％ 回收率/％ ％
莫诺苷 0.250 6 0.506 0 0.500 0 0.988 7 96.54 98.95 2.07
0.250 5 0.505 8 0.500 0 1.006 2 100.08
0.250 7 0.506 2 0.500 0 1.011 4 101.04
0.251 0 0.506 8 0.500 0 1.011 1 100.86
0.250 7 0.506 2 0.500 0 0.999 3 98.62
0.250 6 0.506 0 0.500 0 0.988 8 96.56
马钱苷 0.250 6 0.407 0 0.408 0 0.810 5 98.90 97.22 1.86
0.250 5 0.406 9 0.408 0 0.801 9 96.81
0.250 7 0.407 2 0.408 0 0.814 6 99.85
0.251 0 0.407 7 0.408 0 0.798 5 95.78
0.250 7 0.407 2 0.408 0 0.795 5 95.17
0.250 6 0.407 0 0.408 0 0.801 9 96.79
芍药苷 0.250 6 1.490 2 1.492 0 3.040 7 103.92 101.36 2.14
0.250 5 1.489 6 1.492 0 2.993 7 100.81
0.250 7 1.490 8 1.492 0 2.982 2 99.96
0.251 0 1.492 6 1.492 0 2.977 1 99.50
0.250 7 1.490 8 1.492 0 3.046 3 104.26
0.250 6 1.490 2 1.492 0 2.977 5 99.68
丹酚酸B 0.250 6 1.432 7 1.430 0 2.833 9 97.99 100.53 2.43
0.250 5 1.432 1 1.430 0 2.841 7 98.57
0.250 7 1.433 2 1.430 0 2.897 4 102.39
0.251 0 1.435 0 1.430 0 2.881 7 101.17
0.250 7 1.433 2 1.430 0 2.847 6 98.91
0.250 6 1.432 7 1.430 0 2.921 8 104.13
淫羊藿苷 0.250 6 0.305 8 0.308 0 0.606 7 97.69 98.04 1.19
0.250 5 0.305 7 0.308 0 0.607 4 97.95
0.250 7 0.305 9 0.308 0 0.612 0 99.38
0.251 0 0.306 3 0.308 0 0.604 6 96.85
0.250 7 0.305 9 0.308 0 0.612 3 99.48
0.250 6 0.305 8 0.308 0 0.604 2 96.88
2.9 样品含量测定
取 5 批肾复康Ⅱ号胶囊，分别按“2.2.2”项下方法制
备供试品溶液，再按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录
各成分峰面积，以外标法计算样品中5个成分的含量，每
批样品平行测定3次，结果见表3。
表3 莫诺苷等5个成分的含量测定结果（mg/g，n＝3）
批号 莫诺苷 马钱苷 芍药苷 丹酚酸B 淫羊藿苷
20201101 2.019 3 1.624 2 5.946 5 5.717 0 1.220 3
20201110 2.153 4 1.847 1 5.842 9 5.147 8 1.436 5
20210724 2.360 0 1.802 7 6.828 0 5.381 6 1.754 6
20210929 2.081 5 1.833 3 5.637 7 5.015 9 1.392 7
20211013 2.180 0 1.711 5 5.993 0 5.310 7 1.208 8
3 讨论
3.1 指标成分的选取
现代药理研究证实，山茱萸中的莫诺苷可通过晚期
糖基化终末产物（advanced glycosylation end products，
AGEs）-AGE 受体（receptor of AGE，RAGE）信号通路抑
制 RAGE、核因子κB 蛋白和丝裂原激活蛋白激酶的表
达，减轻氧化应激损伤，从而起到对肾损伤的改善作
用 ；山茱萸中的马钱苷可有效调节 AGEs 诱导 GMCs
[10]
产生的内质网应激，减轻炎症反应，抑制氧化应激，从而
改善肾功能 [11－12] ；赤芍中的芍药苷可以通过抑制硫氧还
蛋白结合蛋白的表达而拮抗氧化应激对GMCs的损伤，
中国药房 2022年第33卷第15期