Page 49 - 《中国药房》2022年15期

梓醇对照品3.375、6.750、10.125 mg，各比例平行3份，按 于 5 mL 容量瓶中，以流动相溶解并定容，经 0.22 μm 微
“2.1.1”及“2.1.3”项下方法制备供试品溶液并处理后，采 孔滤膜过滤，配制成益母草苷质量浓度为1.032 0 mg/mL
[12]
用紫外分光光度法 测定吸光度，再根据标准曲线计算 的单一对照品溶液。取上述各成分单一对照品溶液适
总环烯醚萜苷含量，并计算加样回收率。结果显示，总 量，混合，即得混合对照品溶液。
环 烯 醚 萜 苷 的 平 均 加 样 回 收 率 为 97.39％ ，RSD 为 2.3.3 供试品溶液的制备 精密称量地黄粉末0.5 g，置
1.77％（n＝9），表明该方法准确可靠。 于锥形瓶中，加入60％甲醇50 mL，称定质量；超声提取
2.2 地黄中梓醇的含量测定方法 40 min，冷却至室温，补足减失的质量，过滤；取续滤液
根据 2020 版《中国药典》（一部）地黄“含量测定”项 20 mL于蒸发皿中，水浴挥干，残渣以流动相溶解并定容
[6]
下方法测定梓醇的含量 。精密称取梓醇对照品 5.79 至10 mL容量瓶中，即得。
mg，置于5 mL容量瓶中，加流动相定容，经0.22 μm微孔 2.3.4 系统适用性试验 取“2.3.2”项下混合对照品溶
滤膜过滤，即得梓醇质量浓度为 1.158 mg/mL 的对照品 液和“2.3.3”项下供试品溶液适量，按“2.3.1”项下色谱条件
母液。另按上述药典方法制备供试品溶液。取梓醇对 进样测定，记录色谱图。结果显示，地黄苷D、地黄苷A、
照品母液和供试品溶液适量，按上述方法进样测定，记 益母草苷色谱峰的分离度均较好，无干扰，结果见图2。
录色谱图。结果显示，梓醇色谱峰分离度较好，无干 958.14
扰。结果见图1。
631.57
mAU 益母草苷
648.76
梓醇 305.00 地黄苷A
地黄苷D
432.04 －21.52
mAU 0 2.75 5.51 8.26 11.01 13.77 16.52 19.28
215.33 t/min
A.对照品溶液
－1.39
0 2.17 4.35 6.52 8.70 10.57 13.04 15.22
t/min 216.58
A.对照品溶液
149.23 地黄苷D
mAU 82.00
384.79 地黄苷A 益母草苷
14.83
mAU 191.70 梓醇 －52.42 0 2.75 5.51 8.26 11.01 13.77 16.52 19.28
t/min
－1.39
0 2.17 4.35 6.52 8.70 10.57 13.04 15.22 B.供试品溶液
t/min
B.供试品溶液 图2 地黄苷D、地黄苷A、益母草苷的高效液相色谱图
图1 梓醇的高效液相色谱图 2.3.5 线性关系考察 分别精密吸取“2.3.2”项下地黄
苷D、地黄苷A、益母草苷单一对照品溶液各适量，用流动
取上述梓醇对照品母液，梯度稀释成梓醇质量浓度
分别为 0.063 7、0.379 0、0.593 0、0.741 1、1.158 0 mg/mL 相分别稀释成地黄苷D质量浓度分别为0.037 4、0.074 8、
0.149 5、0.299 0、0.598 0 mg/mL的系列溶液，地黄苷A质
的系列溶液，按2020版《中国药典》（一部）地黄“含量测
量浓度分别为0.026 3、0.100 3、0.196 0、0.306 2、0.382 7、
定”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。以峰面积为
0.598 0 mg/mL 的系列溶液，益母草苷质量浓度分别为
纵坐标（Y）、质量浓度为横坐标（X）进行线性回归，得到
0.045 4、0.173 1、0.338 1、0.660 4、1.032 0的系列溶液，再
回 归 方 程 为 Y＝2 881 963.989X － 159 447.8927（r＝
按“2.3.1”项下色谱条件进样测定。以峰面积为纵坐标
0.999 5），梓醇的检测质量浓度线性范围为 0.063 7～
（Y）、各成分质量浓度为横坐标（X）进行线性回归。结果
1.158 0 mg/mL。
显示，地黄苷 D、地黄苷 A、益母草苷成分在各自质量浓
2.3 地黄中地黄苷 D、地黄苷 A、益母草苷成分的含量
度范围内均呈现出良好的线性关系，具体见表2。
测定方法
表2 地黄中地黄苷D、地黄苷A、益母草苷的线性关系
2.3.1 色谱条件 色谱柱为 Waters C18 （250 mm×4.6
考察结果
mm，5 μm）；流动相为乙腈-水（体积比 4 ∶ 96）；检测波长
成分 回归方程 r 线性范围/（mg/mL）
为 205 nm；流速为 1.0 mL/min；柱温为 30 ℃；进样量为
地黄苷D Y＝4 794 180.406 7X－170 833.623 7 0.999 4 0.037 4～0.598 0
20 μL 。 地黄苷A Y＝8 334 292.044 5X－249 803.175 4 0.999 4 0.026 3～0.598 0
[13]
2.3.2 对照品溶液的制备 分别精密称量地黄苷A、地 益母草苷 Y＝2 425 077.502 0X－458.125 3 0.999 7 0.045 4～1.032 0
黄苷 D 对照品各 5.98 mg，置于不同的 10 mL 容量瓶中， 2.3.6 精密度考察 取“2.3.2”项下各单一对照品溶液
以流动相溶解并定容，经0.22 μm微孔滤膜过滤，配制成 适量，按“2.3.1”色谱条件重复进样 6 次，计算得地黄苷
地黄苷A、地黄苷D质量浓度均为0.598 0 mg/mL的单一 D、地黄苷 A、益母草苷峰面积的 RSD 分别为 3.01％、
对照品溶液。另精密称取益母草苷对照品 5.16 mg，置 2.51％、0.74％（n＝6），表明仪器精密度良好。

中国药房 2022年第33卷第15期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 15 ·1835 ·