Page 53 - 《中国药房》2022年15期

长因子β1的表达，从而对抗肾间质纤维化的发生 [1，5－7] ；此 2.2.2 供试品溶液的制备 取肾复康Ⅱ号胶囊内容物，
外，肾复康Ⅱ号胶囊亦可作用于肝细胞生长因子（hepa- 研细，精密称取0.5 g，置于50 mL具塞锥形瓶中，按料液
tocyte growth factor，HGF）及其受体间质表皮转化因子 比 1 ∶ 100（g/mL）加 80％甲醇 50 mL 使之溶解，称定质
（c-mesenchymal-epithelial transition factor，c-Met），调控 量；超声（频率 40 kHz，功率 300 W）处理 30 min，冷却至
间充质干细胞的旁分泌功能，起到改善肾功能的作 室温，再称定质量，用 80％甲醇补足减失的质量，摇匀；
[8]
用 。为提高肾复康Ⅱ号胶囊的质量控制水平，本研究 经0.22 μm微孔滤膜过滤，取续滤液，即得。
选取该制剂中各组方药材在 2020 年版《中国药典》（一 2.2.3 阴性样品溶液的制备 按照处方制剂工艺，分别
[9]
部） 中的质量控制成分，采用高效液相色谱（high per- 制得缺山茱萸、缺赤芍、缺丹参和缺淫羊藿的阴性样品，
formance liquid chromatography，HPLC）法测定山茱萸中 再分别按“2.2.2”项下方法制备各阴性样品溶液。
2.3 系统适用性试验
的莫诺苷、马钱苷，赤芍中的芍药苷，丹参中的丹酚酸B
取上述供试品溶液、混合对照品溶液和阴性样品溶
和淫羊藿中的淫羊藿苷含量，首次建立了该制剂的含量
液各10 μL，注入HPLC仪，按“2.1”项下色谱条件进样测
测定方法，以期保障其临床使用的有效性和安全性。
定，记录色谱图（图1）。由图1可知，肾复康Ⅱ号胶囊中
1 材料
莫诺苷、马钱苷、芍药苷、丹酚酸B、淫羊藿苷均能达到有
1.1 主要仪器
效分离，理论板数分别为20 522、52 856、55 345、347 545、
Agilent 1260 系列 HPLC 仪系统（包括 VWD 检测器
259 194，分离度分别为 1.63、1.72、2.80、2.77、2.69，阴性
和 Agilent Chem Station 工作站）购自美国 Agilent 公司；
样品无干扰，表明该方法系统适用性良好。
KQ-100 型超声波清洗机购自昆山超声仪器有限公司； 500 2
BS210S 型电子分析天平（d＝0.1 mg）、BT25S 型电子分 mAU 400 1 4 5
300
析天平（d＝0.01 mg）均购自北京赛多利斯天平有限 200 3
100
0
公司。 0 5 10 15 20 25 30 35 40
t/min
1.2 主要药品与试剂 A.混合对照品溶液
肾复康Ⅱ号胶囊由陕西省中医医院生产，规格为 120 4
100
0.3 g × 45 粒/瓶 ，批 号 分 别 为 20201101、20201110、 mAU 80 1 2 3
60
40
20210724、20210929、20211013。莫诺苷对照品（批号 20 0 5
0 5 10 15 20 25 30 35 40
P11M11F2846，纯度≥98.0％）、马钱苷对照品（批号 t/min
P24O11F128801，纯度≥98.0％）、丹酚酸B对照品（批号 B.供试品溶液
70
P13N11F130912，纯度≥98.0％）均购自上海源叶生物科 mAU 60 3
50
40
技有限公司；芍药苷对照品（批号MUST-17031901，纯度≥ 30 4 5
20
10
99.3％）购自成都曼斯特生物科技有限公司；淫羊藿苷对 0 0 5 10 15 20 25 30 35 40
t/min
照品（批号0737-200111，纯度≥98.0％）购自中国食品药 C.缺山茱萸阴性样品溶液
品检定研究院；乙腈（色谱纯）购自美国 Thermo Fisher 60
50
Scientific公司。其他试剂均为分析纯，水为超纯水。 mAU 40 1 2 4 5
30
2 方法与结果 20 0
10
20
2.1 色谱条件 0 5 10 15 t/min 25 30 35 40
采用 Agilent 5 TC-C18 色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 D.缺赤芍阴性样品溶液
μm）；流动相为乙腈（A）-0.1％磷酸溶液（B），梯度洗脱 60
50
30
（0～20 min，10％A→20％A；20～30 min，20％A→30％ mAU 40 1 2 3 5
20
10
A；30～40 min，30％A→40％A）；柱温为30 ℃；流速为1 0
0 5 10 15 20 25 30 35 40
mL/min；检测波长为240 nm；进样量为10 μL。 t/min
E.缺丹参阴性样品溶液
2.2 溶液的制备 60
50
2.2.1 混合对照品溶液的制备 精密称取莫诺苷、马钱 mAU 40 3 4
30
苷、芍药苷、丹酚酸 B、淫羊藿苷对照品各适量，置于 10 20 1 2
10
0
mL 容量瓶中，加 80％甲醇稀释并定容，即得含莫诺苷 0 5 10 15 20 25 30 35 40
t/min
0.240 mg/mL、马钱苷0.242 mg/mL、芍药苷0.350 mg/mL、 F.缺淫羊藿阴性样品溶液
丹酚酸B 0.236 mg/mL、淫羊藿苷0.259 mg/mL的混合对 1：莫诺苷；2：马钱苷；3：芍药苷；4：丹酚酸B；5：淫羊藿苷
照品溶液。 图1 肾复康ⅡⅡ号胶囊中5个成分的HPLC图
中国药房 2022年第33卷第15期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 15 ·1839 ·