Page 60 - 《中国药房》2022年13期
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环的内皮是否完整。以去甲肾上腺素刺激血管环收缩 LM49 舒张血管环作用的影响。每组平行考察 6 个血
后的稳定张力为 100％，计算乙酰胆碱引起血管环舒张 管环。
的百分比：舒张血管百分比（％）＝（去甲肾上腺素诱发 2.5 钾通道阻滞剂对LM49舒张血管环作用的影响
的血管环最大收缩张力－加入乙酰胆碱后血管环张力）/ 取“2.1.1”项下内皮完整血管环，分别加入 4 种钾通
（去甲肾上腺素诱发的血管环最大收缩张力－去甲肾上 道阻滞剂——四乙基胺（5 mmol/L）、格列苯脲（1×10 －5
腺素诱发前血管环张力）×100％。该百分比值＞70％视 mol/L）、BaCl2 （0.1 mmol/L）、4-氨基吡啶（1 mmol/L）预孵
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为内皮完整，＜5％视为内皮去除完全 。待内皮功能 育20 min，作为四乙基胺预孵育组、格列苯脲预孵育组、
检测完，更换生理盐溶液使血管环恢复至基础状态，然 BaCl2预孵育组和4-氨基吡啶预孵育组；另设LM49对照
后采用 PowerLab 数据采集分析系统记录血管环的张 组（浓度设置同“2.2”项下），不加入四乙基胺、格列苯脲、
力，即为血管环基础张力。 BaCl2、4-氨基吡啶预孵育。随后各组均加入去甲肾上腺
2.2 LM49对大鼠血管环的舒张作用 素（1×10 －6 mol/L）刺激血管环，使其收缩，记录其张力变
取“2.1.1”项下内皮完整血管环，加入去甲肾上腺素 化。待血管环张力稳定后，各组均按照“2.2”项下方法累
（1×10 －6 mol/L）刺激，使其收缩。待其张力稳定后，分为 积加入 LM49，分别测定各组血管环的张力，并计算
LM49 给药组和硝苯地平阳性对照组，按累积加药法每 LM49 舒张血管百分比，分析钾通道阻滞剂对 LM49 舒
隔10 min加入药物，使LM49的终浓度为3×10 、1×10 、 张血管环作用的影响。每组平行考察6个血管环。
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3×10 、5×10 、1×10 －5 mol/L[溶剂二甲基亚砜（DMSO） 2.6 LM49 对去甲肾上腺素激活的 Ca 收缩血管环作
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的 体 积 分 数 分 别 为 0.000 3％ 、0.001％ 、0.003％ 、 用的影响
0.005％、0.01％]，硝苯地平的终浓度为1×10 －10 、3×10 －10 、 取“2.1.2”项下去内皮血管环，先用无钙生理盐溶液
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1×10 、3×10 、1×10 、3×10 、1×10 、3×10 、1×10 －6 （含144 mmol/L NaCl、5.8 mmol/L KCl、1.2 mmol/L MgCl2、
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mol/L 。将血管环与张力换能器连接，采用 PowerLab 11.1 mmol/L 葡 萄 糖 、5 mmol/L HEPES、0.5 mmol/L
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数据采集分析系统记录血管环的张力变化，并计算药物 EGTA，pH＝7.4）冲洗 30 min，然后将血管环分为 LM49
舒张血管百分比：药物舒张血管百分比（％）＝（去甲肾 预处理组和溶剂对照组。LM49预处理组用不同浓度的
上腺素诱发的血管环最大收缩张力－给药后血管环张 LM49（2×10 、5×10 、1×10 －5 mol/L，溶剂DMSO的体积
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力）/（去甲肾上腺素诱发的血管环最大收缩张力－血管 分数分别为 0.002％、0.005％、0.010％）对血管环进行预
环基础张力）×100％。每组平行考察6个血管环。 处理，溶剂对照组加入相应量 DMSO 进行预处理。20
2.3 LM49对内皮完整和去内皮血管环张力的影响 min后，各组分别加入去甲肾上腺素（1×10 －6 mol/L）和钙
取“2.1”项下内皮完整血管环和去内皮血管环，分别 通道阻滞药维拉帕米（1×10 －6 mol/L），15 min 后累积加
加入去甲肾上腺素（1×10 －6 mol/L）或KCl（60 mmol/L）生 入 CaCl2 （0.1、0.3、1、3、10 mmol/L）。记录血管环张力变
理盐溶液刺激，使其收缩。待血管环张力稳定后，分为 化，并计算血管收缩率：血管收缩率（％）＝（LM49 预处
LM49 给药组和溶剂对照组（加入相应体积分数的 理组累积加入 CaCl2后血管环张力－LM49 预处理组加
DMSO），按照“2.2”项下方法给药。分别测定各组血管 入 CaCl2前血管环张力）/（溶剂对照组累积加入 CaCl2诱
环的张力，并计算LM49舒张血管百分比：LM49舒张血 发的血管环最大收缩张力－溶剂对照组加入CaCl2前血
管百分比（％）＝（去甲肾上腺素或KCl诱发的血管环最 管环张力）×100％。比较LM49预处理组与溶剂对照组
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大收缩张力－给予 LM49 后血管环张力）/（去甲肾上腺 的收缩效应，分析 LM49 对去甲肾上腺素激活的 Ca 收
素或 KCl 诱发的血管环最大收缩张力－血管环基础张 缩血管环作用的影响。每组平行考察6个血管环。
力）×100％。每组平行考察6个血管环。 2.7 LM49对KCl激活的Ca 收缩血管环作用的影响
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2.4 L-NAME 和吲哚美辛对 LM49 舒张血管环作用的 取“2.1.2”项下去内皮血管环，用无钙生理盐溶液冲
影响 洗 30 min，换为无钙 KCl（60 mmol/L）生理盐溶液（含
取“2.1.1”项下内皮完整血管环，分别用一氧化氮合 89.8 mmol/L NaCl、60 mmol/L KCl、1.2 mmol/L MgCl2、
酶抑制剂L-NAME（0.1 mmol/L）或环氧合酶抑制剂吲哚 11.1 mmol/L 葡 萄 糖 、5 mmol/L HEPES、0.5 mmol/L
美辛（1×10 －5 mol/L）预孵育 20 min，作为 L-NAME 预孵 EGTA，pH＝7.4）预孵育 10 min，然后分为 LM49 预处理
育组、吲哚美辛预孵育组；另设 LM49 对照组，不加入 组和溶剂对照组。按照“2.6”项下方法给药，20 min 后，
L-NAME 或吲哚美辛预孵育。随后各组均加入去甲肾 各组均累积加入 CaCl2 （0.1、0.3、1、3、10 mmol/L），记录
上腺素（1×10 －6 mol/L）刺激血管环，使其收缩，记录其张 血管环张力变化，并计算血管收缩率。比较 LM49 预处
力变化。待血管环张力稳定后，各组均按照“2.2”项下方 理组与溶剂对照组的收缩效应，分析 LM49 对 KCl 激活
法累积加入LM49，分别测定各组血管环的张力，并计算 的 Ca 收缩血管环作用的影响。每组平行考察 6 个血
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LM49 舒张血管百分比，分析 L-NAME 和吲哚美辛对 管环。
·1590 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 13 中国药房 2022年第33卷第13期
