Page 59 - 《中国药房》2022年13期

endothelium was removed or not had no significant effect on the vasodilation of LM49（P＞0.05）. After L-NAME，indomethacin，
TEA and 4-AP was pre-incubated，different concentrations of LM49 had no significant effects on aortic rings precontracted by NE
（P＞0.05）. Glibenclamide and BaCl2 could inhibit the vasorelaxant effects of LM49 on aortic rings precontracted by NE（P＜0.01）.
In the absence of calcium，LM49 could inhibit the contraction caused by calcium influx induced by accumulated CaCl2 after
pre-incubation with KCl，NE，verapamil and TG （P＜0.01）. CONCLUSIONS LM49 evokes significant relaxation of isolated
aortic vascular rings without endothelium dependence；the mechanism of which is inducing ATP-sensitive potassium channel，
inward rectifier potassium channel open and restraining extracellular Ca 2 + influx via voltage-gated calcium channel，
receptor-operated calcium channel and store-operated calcium channel.
KEYWORDS polyphenol compound；2，4′，5′-trihydroxy-5，2′-dibromo-diphenyl-methanone；vuscular rings；vasorelaxant
effects；potassium channel；calcium channel

高血压的全球发病率逐年升高，长期高血压会导致 99％）、硝苯地平原料药（批号 N7634，纯度≥98％）、维
多种并发症。高血压病程的进展，可诱发冠状动脉粥样 拉帕米原料药（批号 V4629，纯度≥99％）、毒胡萝卜素
[1]
硬化，造成心脏损伤，严重威胁人类健康 。高血压发病 原料药（批号 T9033，纯度≥98％）均购自德国 Sigma 公
后会出现血管张力异常。主动脉平滑肌的舒张对高血 司；其余试剂均为分析纯，水为双蒸水。
压的治疗尤为关键，诸多有效的高血压治疗药物最终都 1.3 动物
会直接或间接地引起血管舒张效应 [1－2] 。 本研究所用动物为健康SPF级SD大鼠，共80只，雄
海洋来源的多酚化合物具有抗炎、抗氧化、细胞毒、 性，体质量为 250～300 g，由山西医科大学实验动物中
抑菌等多重生物活性 [3－6] ，是海洋生物研究过程中发现 心提供，实验动物使用许可证号为 SYXK（晋）2019-
的一类新型化合物。本课题组前期以海洋来源的卤酚 0004。将大鼠分笼饲养（每笼 3 只），饲养环境温度为
化合物为先导化合物进行了结构优化和修饰，合成了系 （22±2）℃、相对湿度为40％～60％。饲养期间大鼠正
列多酚化合物。其中 2，4′，5′-三羟基-5，2′-二溴二苯甲 常摄食和饮水，适应性饲养 7 d 后进行实验。本研究经
酮（LM49）具有显著的保护血管内皮细胞 [7－8] 、抗动脉粥 山西医科大学实验动物伦理委员会批准后实施，批准号
[10]
样硬化 、保护缺血再灌注引发的心肌损伤 等药理作 为SYDL2021001。
[9]
用，提示其对于高血压及心血管疾病的治疗具有重要研 2 方法
究价值。鉴于此，本研究选择本课题组前期获得的高活 2.1 大鼠胸主动脉血管环的制备及处理
性多酚化合物 LM49 为研究对象，考察其对大鼠离体胸 2.1.1 内皮完整血管环 将大鼠麻醉后，脱臼处死，取
主动脉的舒张作用，并进一步研究其作用机制，以期为 其主动脉，放入 4 ℃预冷的生理盐溶液（含 144 mmol/L
LM49用于心脑血管疾病的治疗提供实验依据。 NaCl、5.8 mmol/L KCl、1.2 mmol/L MgCl2、2.5 mmol/L
1 材料 CaCl2、11.1 mmol/L 葡萄糖、5 mmol/L HEPES，pH＝7.4）
1.1 主要仪器 中充分分离。将分离干净的血管剪成 3～4 mm 的分段
SV-8 型离体组织器官恒温灌流装置购自成都泰盟 血管环，置于37 ℃充氧的10 mL浴槽中。将血管环的下
软件有限公司；MLT0201/D 型高灵敏度张力传感器、 端固定，上端连接张力传感器，采用PowerLab数据采集
PowerLab数据采集分析系统购自埃德仪器国际贸易（上 分析系统记录血管环的张力变化。将基础张力调至2 g，
海）有限公司。 浴槽内每间隔 15 min 换 1 次生理盐溶液，平衡稳定 1 h。
1.2 主要药品与试剂 然后采用PowerLab数据采集分析系统记录血管环的张
多酚化合物 LM49（批号 20190315，纯度≥99％）为 力，即为血管环基础张力。
本课题组自制；乙二醇双（2-氨基乙基醚）四乙酸（EGTA， 2.1.2 去内皮血管环 取“2.1.1”项下分离的干净血管
批号E8050）购自北京索莱宝科技有限公司；羟乙基哌嗪 环，使用与主动脉内径相当的棉棒穿入血管内摩擦其内
乙硫磺酸（HEPES，批号 H7523，纯度≥99％）、去甲肾上 壁2次，以求完全去除血管内皮。用KCl（60 mmol/L）生
腺素原料药（批号 SML0305，纯度≥97％）、乙酰胆碱 理 盐 溶 液（含 89.8 mmol/L NaCl、60 mmol/L KCl、1.2
原料药（批号 A6625，纯度≥99％）、左旋硝基精氨酸甲 mmol/L MgCl2、2.5 mmol/L CaCl2、11.1 mmol/L 葡萄糖、
酯 原 料 药（L-nitro-arginine methyleste，L-NAME，批 号 5 mmol/L HEPES，pH＝7.4）预收缩血管环 2 次，以诱发
N5751，纯度≥98％）、吲哚美辛原料药（批号 I7378，纯 血管环的最大收缩幅度。待其稳定达到坪值后（连续 2
度≥98％）、四乙基胺（批号T0886，纯度≥99％）、4-氨基 次同样刺激所引起血管环的收缩幅度的差别小于5％），
吡啶（批号 A78403，纯度≥98％）、格列苯脲原料药（批 加入去甲肾上腺素（1×10 －6 mol/L）使血管环收缩。待血
号 Y0001511，纯度≥99％）、BaCl2 （批号 202738，纯度≥ 管张力稳定后，加入乙酰胆碱（1×10 －5 mol/L）检查血管

中国药房 2022年第33卷第13期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 13 ·1589 ·