Page 65 - 《中国药房》2022年10期

表6 13批QTXT中柚皮苷等7种成分的含量测定结果（n＝2，mg/g）
盐酸黄连碱 柚皮苷 橙皮苷 新橙皮苷 盐酸小檗碱 盐酸巴马汀 洛伐他汀
编号
（外标法） 外标法 QAMS法 偏差/％ 外标法 QAMS法 偏差/％ 外标法 QAMS法 偏差/％ 外标法 QAMS法 偏差/％ 外标法 QAMS法 偏差/％ 外标法 QAMS法 偏差/％
S1 5.922 41.454 40.198 1.54 9.383 8.994 2.12 74.068 71.823 1.54 11.627 11.274 1.54 3.158 3.303 2.25 2.337 2.239 2.16
S2 9.502 68.140 66.075 1.54 13.993 13.413 2.12 129.801 125.868 1.54 24.489 23.747 1.54 4.529 4.738 2.25 3.325 3.185 2.16
S3 9.698 68.117 66.053 1.54 6.524 6.254 2.12 78.733 76.348 1.54 42.690 41.396 1.54 4.233 4.428 2.25 2.191 2.099 2.16
S4 9.325 64.231 62.284 1.54 9.221 8.839 2.12 87.590 84.936 1.54 47.090 45.663 1.54 4.599 4.811 2.25 1.918 1.837 2.16
S5 8.687 79.976 77.552 1.54 6.404 6.138 2.12 79.938 77.515 1.54 44.603 43.251 1.54 4.220 4.414 2.25 2.485 2.380 2.16
S6 8.811 75.198 72.919 1.54 7.625 7.309 2.12 78.565 76.184 1.54 44.805 43.447 1.54 4.455 4.660 2.25 1.901 1.821 2.16
S7 8.658 74.801 72.534 1.54 7.586 7.272 2.12 78.137 75.769 1.54 44.650 43.297 1.54 4.391 4.594 2.25 2.008 1.923 2.16
S8 8.761 75.348 73.064 1.54 7.638 7.322 2.12 78.607 76.225 1.54 45.500 44.122 1.54 4.441 4.645 2.25 2.138 2.048 2.16
S9 7.916 51.674 50.109 1.54 12.839 12.306 2.12 107.230 103.981 1.54 31.435 30.482 1.54 3.641 3.808 2.25 2.107 2.018 2.16
S10 7.804 53.651 52.025 1.54 13.342 12.789 2.12 111.563 108.182 1.54 30.915 29.978 1.54 3.601 3.767 2.25 2.121 2.032 2.16
S11 11.237 53.452 51.832 1.54 7.559 7.246 2.12 82.073 79.586 1.54 47.299 45.866 1.54 4.715 4.932 2.25 2.906 2.783 2.16
S12 11.115 54.591 52.936 1.54 7.357 7.052 2.12 80.344 77.909 1.54 47.714 46.268 1.54 4.747 4.966 2.25 2.855 2.734 2.16
S13 12.020 59.304 57.506 1.54 7.976 7.646 2.12 86.956 84.321 1.54 51.512 49.951 1.54 5.131 5.367 2.25 3.079 2.949 2.16

3 讨论 溶液和各阴性样品溶液色谱图进行比对，初步确定了17
3.1 提取溶剂的选择 个共有峰的归属，即 7～10 号峰为黄连的专属峰；3～6、
本课题组前期分别考察了水、甲醇、乙醇、60％乙醇 11～13号峰为麸炒枳实的专属峰；14号峰为红曲的专属
等不同提取溶剂对指纹图谱的影响，结果显示，以甲醇 峰；1号峰为黄连和红曲的共有峰；2、15号峰为麸炒枳实
为提取溶剂时，所得图谱的色谱峰信息较多，且各色谱 和红曲的共有峰；16、17 号峰为 6 味饮片的共有峰。此
峰的响应值相对较大，故选择甲醇为提取溶剂。 外，本研究发现，瓜蒌和姜半夏在指纹图谱色谱条件下
3.2 色谱条件的优化 的响应较弱，未发现其对应的专属峰，可能与其特征成
本课题组前期采用二极管阵列检测器对样品进行 分的含量过低（低于检测限）有关。
了全波长（190～800 nm）扫描，结果显示，在 203、238、 3.4 化学模式识别结果分析
346、283 nm 波长处得到的色谱峰信息较多；同时，本课 聚类分析结果显示，13 批样品可聚为 3 类，其中 S2
题组又分别比较了各色谱峰在上述波长下的响应情况， 为一类，S1、S9、S10 为一类，S3～S8、S11～S13 为一类，
结果显示，在203 nm波长下，供试品的色谱峰数量最多， 表明不同批次样品质量存在差异，这可能与不同批次样
且响应较强，故选择203 nm为检测波长。本课题组还考 品的原料、生产时间、贮存方式等因素不同有关。主成
察了不同流动相体系（乙腈-0.5％磷酸溶液、乙腈-0.1％ 分分析结果显示，前 3 个主成分的累计方差贡献率为
磷酸溶液、乙腈-水、甲醇-水、乙腈-1％磷酸溶液）对指纹 85.120％，13批样品可分为4类，其中S2为一类，S1为一
图谱的影响，结果显示，当以乙腈-0.5％磷酸溶液为流动 类，S9、S10为一类，S3～S8、S11～S13为一类，与聚类分
相时，所得图谱中各色谱峰的峰形尖锐，分离度较好，故 析相比，主成分分析进一步将S1与S9、S10样品区分开；
选择乙腈-0.5％磷酸溶液为流动相。同时，在此基础上 正交偏最小二乘法-判别分析结果显示，有7个共有峰的
考察了不同梯度洗脱条件下各色谱峰的分离效果，最终 VIP值大于1，依次为10号峰（盐酸小檗碱）、9号峰（盐酸
选择“2.1”项下梯度洗脱条件。此外，本课题组还对不同 巴马汀）、5 号峰（橙皮苷）、11 号峰、8 号峰（盐酸黄连
进样量（1、2、5 μL）进行了考察，结果显示，当进样量为1 碱）、12号峰、6号峰（新橙皮苷），表明这7个成分可能为
μL时，各色谱峰的峰形及分离度均较好，故选择进样量 影响QTXT质量的标志性成分。
为1 μL。 3.5 含量测定结果分析
3.3 指纹图谱结果分析 QAMS法测得柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、盐酸小檗
本研究建立了13批QTXT的HPLC指纹图谱，并通 碱、盐酸巴马汀和洛伐他汀的含量分别为 40.198～
过相似度评价分析了不同批次样品的相似性，结果显 77.552、6.138～13.413、71.823～125.868、11.274～49.951、
示，13批样品的相似度为0.987～0.999，表明QTXT的整 3.303～5.367、1.821～3.185 mg/g；外标法测得柚皮苷、
体质量相对稳定。通过与混合对照品溶液色谱图进行 橙皮苷、新橙皮苷、盐酸小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马
对比，结合相关信息，指认了7个共有峰，分别为柚皮苷 汀和洛伐他汀的含量分别为 41.454～79.976、6.404～
（4号峰）、橙皮苷（5号峰）、新橙皮苷（6号峰）、盐酸黄连 13.993、74.068～129.081、11.627～51.512、5.922～12.020、
碱（8 号峰）、盐酸巴马汀（9 号峰）、盐酸小檗碱（10 号 3.158～5.131、1.901～3.325 mg/g，两种方法所得含量测
峰）、洛伐他汀（14 号峰）；同时，通过与各单味饮片样品 定结果（盐酸黄连碱除外）偏差均小于3.00％，表明建立

中国药房 2022年第33卷第10期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 10 ·1211 ·