Page 60 - 《中国药房》2022年10期
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檗碱对照品（批号 110713-202015，纯度 86.7％）、洛伐他                S5），按“2.1”项下色谱条件连续进样测定6次，以盐酸黄
        汀对照品（批号 100600-202006，纯度 99.6％）均购自中                 连碱为参照峰，计算各共有峰的相对保留时间和相对峰
        国食品药品检定研究院；甲醇、乙腈、磷酸均为色谱纯，                           面积。结果显示，各共有峰相对保留时间和相对峰面积
        其余试剂均为分析纯，水为超纯水。                                    的RSD均小于3.00％（n＝6），表明方法精密度良好。
            13批QTXT（批号分别为YC20190501、YC20200401、             2.3.2  重复性试验      取 QTXT 样品（编号 S5）适量，共 6
        YC20200501、YC20200502、YC20200503、YC20200702-1、      份，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1”项下
        YC20200702-2、YC20200702-3、YC20200802、YC20200802-2、  色谱条件进样测定，以盐酸黄连碱为参照峰，计算各共
        YC20210501、YC20210502、YC20210503，编 号 为 S1～          有峰的相对保留时间和相对峰面积。结果显示，各共有
        S13，规格均为0.8 g）均购自江苏九旭药业有限公司。瓜                       峰相对保留时间和相对峰面积的 RSD 均小于 3.00％
        蒌、黄连、肉桂饮片（批号分别为190701、190401、190701）               （n＝6），表明方法重复性良好。
        均购自芍花堂国药股份有限公司；麸炒枳实饮片（批号                            2.3.3  稳定性试验       取“2.2.2”项下供试品溶液（编号
        190701）购自安徽佳凯药业股份有限公司；红曲饮片（批                        S5），分别于室温下放置 0、2、4、6、8、10、24 h 时按“2.1”
        号 190701）购自杭州双马生物科技股份有限公司；姜半                        项下色谱条件进样测定，以盐酸黄连碱为参照峰，计算
        夏饮片（批号 181001）购自亳州市银桥中药饮片有限公                        各共有峰的相对保留时间和相对峰面积。结果显示，各
        司；上述饮片经江苏九旭药业有限公司林义忠副主任中                            共有峰相对保留时间和相对峰面积的 RSD 均小于
        药师鉴定均为真品。                                           3.00％（n＝7），表明供试品溶液于室温下放置 24 h 内稳
        2 方法与结果                                             定性良好。
        2.1 色谱条件                                            2.3.4 HPLC 指纹图谱的建立          取 13 批 QTXT 样品（编
                                                            号 S1～S13），按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，再按
            以 YMC-Triart C18 （250 mm×4.6 mm，5 μm）为色谱
                                                           “2.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱图。将色谱数据
        柱，以乙腈（A）-0.5％磷酸溶液（B）为流动相进行梯度洗脱
        （0～25.0 min，20％A→25％A；25.0～31.0 min，25％A→           导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）》，以
                                                            保留时间和峰面积适中的 S1 样品图谱作为参照图谱，
        40％A；31.0～44.0 min，40％A→68％A；44.0～50.0 min，
                                                            通过多点校正法进行色谱峰匹配，设时间窗宽度为 0.1
        68％ A→100％ A；50.0～55.0 min，100％ A；55.0～55.5
                                                            min，采用中位数法生成QTXT的HPLC叠加指纹图谱及
        min，100％A→20％A；55.5～60.0 min，20％A）；检测波
                                                            对照指纹图谱（R）。结果显示，13批QTXT共有17个共
        长为 203 nm；柱温为 25 ℃；流速为 1.0 mL/min；进样量
                                                            有峰，详见图1。
        为1 μL。
        2.2  溶液的制备                                            3 500            6
                                                                                                     16
        2.2.1  混合对照品溶液         分别取柚皮苷、橙皮苷、新橙                  3 000    1  2  3  4 5  7 8  9 10  11  12 13  14 15 17
        皮苷、盐酸小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、洛伐他汀                             2 500                                       R S13
                                                                                                          S12
        对照品适量，精密称定，置于20 mL量瓶中，加甲醇溶解                          mAU  2 000                                   S11
                                                                                                          S10
                                                                                                          S9
        并稀释，制成上述 7 种成分质量浓度分别为 2.077、                          1 500                                       S8 S7
                                                              1 000                                       S6
        0.453、1.557、0.766、0.629、0.348、0.172 mg/mL 的混合对                                                    S5
                                                               500                                        S4 S3
        照品溶液。                                                                                             S2
                                                                0                                         S1
        2.2.2  供试品溶液       取QTXT适量，研细，过二号筛，取
                                                                  0   5  10  15  20  25  30  35  40  45  50  55 60
        粉末 0.5 g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，加入甲醇 10                                               t/min
        mL，称定质量，超声（频率 45 kHz，功率 500 W）处理 40                 图 1 13 批 QTXT 的 HPLC 叠加指纹图谱和对照指纹
        min，取出，放冷，用甲醇补足减失的质量，摇匀，经 0.22                           图谱（R）
        μm滤膜滤过，取续滤液，即得。                                     2.3.5  共有峰的指认       通过比对混合对照品色谱图（按
        2.2.3  单味饮片样品溶液          分别取 6 种单味饮片适量，            “2.1”项下方法测得，见图2A）和对照指纹图谱中各色谱
        研细，取粉末，按QTXT制备工艺 制得各单味饮片提取                          峰的出峰时间，结合各色谱峰的紫外光谱信息及紫外-
                                    [20]
        物，再按“2.2.2”项下方法制备各单味饮片样品溶液。                         可见 3D 光谱结果，共指认出 7 个共有峰，分别为柚皮苷
                                            [20]
        2.2.4  阴性样品溶液       按QTXT制备工艺 分别制备缺                （4号峰）、橙皮苷（5号峰）、新橙皮苷（6号峰）、盐酸黄连
        黄连、麸炒枳实、瓜蒌、红曲、姜半夏、肉桂的QTXT阴性                         碱（8 号峰）、盐酸巴马汀（9 号峰）、盐酸小檗碱（10 号
        样品，再按“2.2.2”项下方法制备缺黄连、麸炒枳实、瓜                        峰）、洛伐他汀（14号峰）。以分离度好、保留时间适中的
        蒌、红曲、姜半夏、肉桂的阴性样品溶液。                                 8号峰（盐酸黄连碱）为参照峰，计算得到13批样品各共
        2.2.5 空白溶液      以甲醇为空白溶液。                           有峰相对保留时间的 RSD 为 0.52％～1.34％，相对峰面
        2.3  HPLC指纹图谱的建立                                    积的RSD为7.77％～40.99％，表明不同批次QTXT中的
        2.3.1  精密度试验       取“2.2.2”项下供试品溶液（编号               化学成分组成相似，但各成分含量差异较大。


        ·1206 ·  China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 10                                 中国药房    2022年第33卷第10期
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