Page 69 - 《中国药房》2022年10期

的样品用于理化性质表征。 性指数为0.274±0.012，Zeta电位为－（17.81±1.63）mV
2.3 DAZ分析方法的建立 （n＝3）。粒径分布结果见图2。
2.3.1 色谱条件 色谱柱为 Diamonsil C18 （250 mm×4.6 14
mm，5 μm），流动相为乙腈-甲醇-水（30 ∶ 40 ∶ 30，V/V/V）， 12
流速为 1 mL/min，检测波长为 270 nm，进样量为 20 μL， 10
柱温为25 ℃。 8
2.3.2 溶液制备 精密称量 14.8 mg DAZ 原料药，用流 强度/％ 6
动相溶解并稀释成148 μg/mL的DAZ储备液，再取DAZ 4
储备液适量并用流动相稀释至30 μg/mL，作为对照品溶 2
液。取“2.2”项下制备的DAZ-SC复合纳米粒适量，置于 0 1 10 100 1 000 10 000
25 mL量瓶中，加入流动相，超声（频率40 kHz，功率500 粒径/nm
W，下同）溶解并定容，用0.45 µm滤膜过滤，得供试品溶 图2 DAZ-SC复合纳米粒的粒径分布
液。取适量 SC，按供试品溶液的配制方法制备得到阴
2.4.2 纳米混悬液稳定性的考察 取 DAZ-SC 复合纳
性对照溶液。
米粒适量，分散于去离子水中形成纳米混悬液，保存在
2.3.3 方法学考察 （1）专属性考察：分别取“2.3.2”项
（25.0±0.5）℃条件下，于不同时间点测定其粒径与Zeta
下供试品溶液、阴性对照溶液和对照品溶液适量，按
电位。结果显示，14 d 内纳米混悬液外观不变，粒径与
“2.3.1”项下色谱条件进样检测。结果显示，DAZ对照品
Zeta 电位也基本无变化（图 3），证明 DAZ-SC 纳米混悬
溶液与供试品溶液在相同的保留时间存在相同的色谱
液的稳定性良好。
峰，且SC对纳米粒中DAZ的检测无干扰（图略）。（2）线 粒径
性关系考察：精密量取“2.3.2”项下 DAZ 储备液适量，用 Zeta电位
流动相分别稀释成质量浓度为 0.59、1.56、5.92、11.80、 300 20
29.60、59.20 μg/mL的对照品溶液，按“2.3.1”项下色谱条
15
件进样检测。对DAZ的峰面积（A）和质量浓度（C）进行 200
线性回归，得线性回归方程为 A＝26.808C－13.451（r＝ 粒径/nm 10 Zeta电位/mV
0.999 9）。该结果说明，DAZ 的质量浓度在 0.59～59.20 100
μg/mL 范围内与峰面积的线性关系良好。（3）精密度试 5
验：取“2.3.2”项下对照品溶液，按“2.3.1”项下色谱条件
0 0
连续进样 6 次，得 DAZ 峰面积的 RSD 为 0.27％（n＝6）， 1 3 5 7 9 11 13
说明仪器精密度良好。（4）重复性试验：按“2.3.2”项下方 时间/d
法平行制备 6 份供试品溶液，按“2.3.1”项下色谱条件进 图3 DAZ-SC纳米混悬液的稳定性情况
样检测，得 DAZ 含量的 RSD 为 0.18％（n＝6），说明方法 2.4.3 溶解度的测定 分别取适量的 DAZ 原料药和
重复性良好。（5）稳定性试验：按“2.3.2”项下方法制备供 DAZ-SC 复合纳米粒样品粉末，投入 2 mL 水中，封装于
试品溶液，分别于室温下放置 0、2、4、8、12、24 h 时按 截留分子量 14 000 Da 的透析袋内，将透析袋置于 200
“2.3.1”项下色谱条件进样检测，得 DAZ 峰面积的 RSD mL 水中，于 25 ℃恒温摇床中振摇 72 h 后，取样经 0.45
为0.87％（n＝6），说明供试品溶液在室温下放置24 h内 µm 滤膜过滤，按“2.3.1”项下色谱条件进样测定续滤液
稳定性良好。（6）加样回收率试验：精密称量 9 份 SC，分 中 DAZ 的含量并计算溶解度。结果，DAZ 原料药在水
别按照处方原料量的 120％、100％和 80％加入 DAZ 对 中的溶解度为（2.80±0.02）μg/mL，而 DAZ-SC 复合纳
照品溶液，混合，按“2.3.2”项下方法制备供试品溶液，各 米粒在水中的溶解度为（126.94±0.19）μg/mL，比原料
浓度平行制备3份，按“2.3.1”项下色谱条件进样检测，计 药提高了约45倍，说明SC的存在较大地提升了DAZ的
算样品中DAZ的加样回收率。结果显示，平均加样回收 溶解度。
率 分 别 为 100.10％ 、100.40％ 、99.94％ ，RSD 分 别 为 2.4.4 微观形态的考察 使用 TEM 观察 DAZ-SC 复合
0.28％、0.66％、0.33％（n＝3），说明方法准确度良好。 纳米粒在冻干前的微观形态：将样品滴加于铜网上，自
2.4 DAZ-SC复合纳米粒的表征 然晾干后置于显微镜内观察。使用 SEM 观察 DAZ-SC
2.4.1 粒径、Zeta 电位的考察 取适量 DAZ-SC 复合纳 复合纳米粒冻干后的尺寸和外观形态：用双面铜导电胶
米粒，以水稀释后使用动态光散射纳米粒度分析仪测定 将样品黏于铝块上，喷涂金层后选择合适的放大倍数观
其粒径与Zeta电位，测定3批样品取平均值。结果显示， 察。TEM观察发现，DAZ-SC复合纳米粒冻干前为双层
DAZ-SC复合纳米粒的粒径为（223.7±12.5）nm，多分散 的球状结构。SEM观察发现，DAZ-SC复合纳米粒冻干

中国药房 2022年第33卷第10期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 10 ·1215 ·