Page 64 - 《中国药房》2022年10期

内参物的峰面积，Cs为内参物的质量浓度，Ai为待测成分
2.5
[17]
2.0 的峰面积，Ci为待测成分的质量浓度 。结果显示，柚皮
VIP值 1.5 苷、橙皮苷、新橙皮苷、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀、洛伐他
1.0
0.5 汀 fsi 的平均值分别为 1.086、1.392、1.652、1.104、0.926、
0
10 9 5 11 8 12 6 13 4 7 1 2 17 15 3 16 14 0.261，RSD 分 别 为 2.40％ 、1.73％ 、2.06％ 、1.03％ 、
峰号
图8 17个共有峰的VIP值 1.00％、2.21％（n＝6）。
2.8.2 不同实验条件对fsi的影响 取“2.7.1”项下混合对
表4 柚皮苷等7种成分的回归方程、线性范围、检测限
照品溶液，按“2.1”项下色谱条件进样测定，分别考察不
和定量限结果
同检测波长、流速、柱温、色谱柱对fsi的影响。结果显示，
待测成分 回归方程 r 线性范围/（mg/mL） 检测限/（mg/mL）定量限/（mg/mL）
柚皮苷 y＝33.305x－1.265 0.999 6 0.208～5.192 0.009 0.011 各成分fsi的RSD均小于4.00％，表明不同实验条件对各
橙皮苷 y＝55.690x－0.314 0.999 8 0.045～1.132 0.002 0.003 成分fsi的影响较小。结果见表5。
新橙皮苷 y＝63.005x－1.717 0.999 8 0.156～3.891 0.005 0.007
盐酸小檗碱 y＝20.924x－0.367 0.999 8 0.049～1.226 0.004 0.005 表5 不同实验条件下柚皮苷等6种成分的fsi
盐酸黄连碱 y＝29.541x－0.369 0.999 8 0.063～1.572 0.005 0.007 新橙 盐酸小 盐酸巴 洛伐
盐酸巴马汀 y＝20.953x－0.150 0.999 8 0.050～1.245 0.002 0.005 项目 条件 柚皮苷 橙皮苷 皮苷 檗碱 马汀 他汀
洛伐他汀 y＝7.795x－0.015 0.999 9 0.017～0.431 0.005 0.008 检测波长/nm 201 1.156 1.365 1.709 1.152 0.921 0.261
203 1.116 1.361 1.648 1.140 0.920 0.261
色谱条件进样测定，记录峰面积并按外标法计算样品含 205 1.092 1.314 1.661 1.100 0.902 0.260
量。结果显示，柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、盐酸小檗碱、 平均值 1.121 1.347 1.673 1.131 0.914 0.261
盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、洛伐他汀含量的 RSD 分别为 RSD/％ 2.88 2.11 1.92 2.41 1.17 0.22
流速/（mL/min） 0.9 1.148 1.292 1.679 1.105 0.923 0.261
1.21％、1.38％、1.29％、1.36％、1.44％、1.13％、2.07％ 1.0 1.086 1.361 1.648 1.140 0.920 0.261
（n＝6），表明方法重复性良好。 1.1 1.108 1.361 1.625 1.170 0.939 0.260
平均值 1.114 1.338 1.651 1.138 0.927 0.261
2.7.7 稳定性试验 取“2.7.1”项下供试品溶液（编号
RSD/％ 2.82 2.98 1.64 2.86 1.10 0.22
S5），分别于室温下放置 0、2、4、6、8、10、24 h 时按“2.1” 柱温/℃ 23 1.084 1.349 1.648 1.307 0.917 0.260
项下色谱条件进样测定，记录峰面积。结果显示，柚皮 25 1.086 1.361 1.648 1.310 0.920 0.261
苷、橙皮苷、新橙皮苷、盐酸小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴 27 1.073 1.364 1.631 1.320 0.920 0.259
平均值 1.081 1.358 1.642 1.312 0.919 0.260
马汀、洛伐他汀峰面积的 RSD 分别为 0.87％、0.78％、 RSD/％ 0.65 0.58 0.60 0.52 0.19 0.38
0.80％、0.70％、0.70％、0.95％、1.14％（n＝7），表明供试 色谱柱 YMC-Triart C 18 （250 mm×4.6 mm，5 μm） 1.086 1.380 1.648 1.189 0.920 0.261
品溶液于室温下放置24 h内稳定性良好。 ZORBAX Eclipse Plus C 18 （250 mm×4.6 1.138 1.420 1.732 1.234 0.889 0.270
mm，5 μm）
2.7.8 加样回收率试验 取已知含量的QTXT样品（编 CAPCELL PAK C 18（250 mm×4.6 mm，1.103 1.466 1.708 1.255 0.927 0.276
号 S5）适量，研细，过二号筛，取粉末 0.25 g，精密称定， 5 μm）
平均值 1.109 1.422 1.696 1.226 0.912 0.269
共 9 份，分别加入相当于已知量 80％、100％、120％的
RSD/％ 2.39 3.03 2.55 2.75 2.22 2.81
“2.7.1”项下各单一对照品溶液，按“2.7.1”项下方法制备
2.8.3 色谱峰的定位 根据“2.8.2”项下结果，以盐酸黄
供试品溶液，再按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰
连碱为内参物（S），计算柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、盐酸
面积并计算加样回收率。结果显示，柚皮苷、橙皮苷、新
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小檗碱、盐酸巴马汀、洛伐他汀的相对保留时间（Ris ） 。
橙皮苷、盐酸小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、洛伐他
结果显示，在不同检测波长、流速、柱温和色谱柱下，各
汀的平均加样回收率分别为103.5％（RSD＝1.23％，n＝
待测成分Ris的RSD均小于4.00％，表明Ris较为稳定，可
9）、98.1％（RSD＝2.05％，n＝9）、97.6％（RSD＝2.75％，
以用于各待测成分色谱峰的定位。
n＝9）、104.0％（RSD＝0.59％ ，n＝9）、99.2％（RSD＝
2.8.4 含量测定 取13批QTXT样品适量，按“2.7.1”项
0.96％ ，n＝9）、102.5％（RSD＝2.27％ ，n＝9）、98.8％
（RSD＝2.04％，n＝9）。 下方法制备供试品溶液，再按“2.1”项下色谱条件进样测
2.8 QAMS法 定，记录峰面积，分别按外标法、QAMS 法（以盐酸黄连
2.8.1 相对校正因子的计算 取“2.7.1”“2.7.3”项下混 碱为内参物）计算样品含量，每份样品平行测定2次，取
合对照溶液和各系列浓度线性工作溶液适量，按“2.1”项 平均值，并按下式计算偏差：偏差＝|（外标法检测结果－
下色谱条件进样测定6次，记录峰面积。因盐酸黄连碱 QAMS 法检测结果）/（外标法检测结果+QAMS 法检测
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对照品易得且保留时间适中、价格相对低廉，故以其为 结果）|×100％ 。结果显示，两种方法所得含量测定结
内参物（S），按下式计算盐酸黄连碱相对于其他成分的 果（盐酸黄连碱除外）的偏差均小于3.00％，表明两种方
相对校正因子（fsi ）：fsi＝fs/fi＝（As/Cs ）/（Ai/Ci ）。式中，As为 法的测定结果无明显差异。结果见表6。

·1210 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 10 中国药房 2022年第33卷第10期