Page 74 - 《中国药房》2022年9期

JC-1聚合物

JC-1单体

叠加图

空白对照组 补骨脂模型组 补骨脂-五味子低剂量组 补骨脂-五味子中剂量组 补骨脂-五味子高剂量组
图2 各组细胞线粒体膜电位测定的荧光显微图

表 5 各组细胞中 GRP-78、PERK mRNA 表达水平测 中流失时，内质网的功能就会受损，这种情况被定义为
定结果（x±±s，n＝3） 内 质 网 应 激 。 通 过 检 测 内 质 网 应 激 相 关 标 志 物
[25]
组别 GRP-78 PERK GRP-78、PERK 的 mRNA 和蛋白表达水平，可反映内质
空白对照组 1.00±0.06 1.01±0.01 网应激的发生情况 。目前，研究者发现 GRP-78 与肝
[26]
补骨脂模型组 1.30±0.03 a 1.57±0.05 b [27]
补骨脂-五味子低剂量组 1.13±0.01 c 1.26±0.03 d 癌的发生和发展密切相关 。在内质网应激发生初期，
补骨脂-五味子中剂量组 0.94±0.01 c 1.04±0.03 d GRP-78与内质网跨膜信号成分PERK结合后，促进错误
补骨脂-五味子高剂量组 0.80±0.03 c 0.86±0.02 c
折叠蛋白或未折叠蛋白达到正常状态，从而减少内质网
a：与空白对照组比较，P＜0.01；b：与空白对照组比较，P＜0.05；
负荷，并保持细胞内环境的稳定性 。但在长期内质网
[28]
c：与补骨脂模型组比较，P＜0.01；d：与补骨脂模型组比较，P＜0.05
应激的条件下，PERK 与 GRP-78 会迅速分离，进而激活
[29]
GRP-78 72 kDa 下游信号转导，诱导细胞发生内质网应激损伤 。
本研究以补骨脂刺激细胞时，细胞中 AST、ALT、
PERK 150 kDa
ROS 水平及细胞培养液中 MDA 水平明显升高，细胞培
养液中 GSH、SOD 水平和线粒体膜电位明显降低，表明
β-actin 42 kDa
补骨脂可导致 L02 细胞发生氧化损伤。通过对内质网
空白对照 补骨脂模 补骨脂-五 补骨脂-五 补骨脂-五
组 型组 味子低剂 味子中剂 味子高剂 应激相关标志物GRP-78、PERK mRNA及其蛋白表达水
量组 量组 量组
图3 各组细胞中GRP-78、PERK蛋白表达的电泳图 平 进 行 检 测 ，发 现 补 骨 脂 刺 激 后 细 胞 中 GRP-78 和
PERK mRNA 及其蛋白的表达均显著上调，表明补骨脂
表6 各组细胞中GRP-78、PERK蛋白表达水平测定结
激活了内质网应激和相关的凋亡信号通路，从而造成肝
果（x±±s，n＝3）
损伤。而五味子配伍后，显著降低了细胞（或其培养液）
组别 GRP-78/β-actin PERK/β-actin 中 AST、ALT、ROS、MDA 水平，显著升高了 GSH、SOD
空白对照组 0.78±0.04 0.63±0.03
补骨脂模型组 1.12±0.08 a 1.14±0.02 a 水平和线粒体膜电位，说明五味子配伍后产生了抗氧化
补骨脂-五味子低剂量组 0.99±0.07 b 1.00±0.02 c 作用，可启动细胞内的抗氧化机制，从而改善补骨脂导
补骨脂-五味子中剂量组 0.87±0.06 c 0.92±0.05 c 致的肝细胞氧化损伤。并且，五味子配伍后能明显下调
补骨脂-五味子高剂量组 0.57±0.03 c 0.80±0.06 c
细胞中 GRP-78、PERK mRNA 及其蛋白表达，提示补骨
a：与空白对照组比较，P＜0.01；b：与补骨脂模型组比较，P＜0.05；
c：与补骨脂模型组比较，P＜0.01 脂与五味子配伍后可缓解内质网应激。

·1092 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 9 中国药房 2022年第33卷第9期