Page 52 - 《中国药房》2022年6期
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男性不育症的诊治中起着至关重要的作用。现有研究                             司）、DW-HL678型超低温冰箱（中科美菱低温科技股份
        表明，细胞色素 P450（cytochrome P450，CYP）酶是影响               有限责任公司）、雷磁 PHSJ-3F 型 pH 计（上海仪电科学
        睾酮生成及代谢的主要酶，是肝微粒体混合功能氧化酶                            仪器股份有限公司）、ME215S 型分析天平（北京赛多利
        系统的主要组成部分，是机体代谢药物的重要酶                       [4－5] 。  斯仪器系统有限公司）、MS3微型旋涡混合仪（德国IKA
        CYP1A2、CYP2C19、CYP2C9、CYP2A6、CYP2D6、CYP3A4          公司）、PURELAB Chorus 1 Complete 型超纯水仪（英国
        等CYP酶与药物代谢功能的关联尤为密切，其代谢的药                           ELGA公司）等。
                                         [6]
        物占所有CYP酶代谢药物的80％以上 。药物产生相互                          1.2 主要药品与试剂
        作用的主要原因是CYP酶被抑制或诱导，约70％的代谢                              毛蕊花糖苷对照品（批号 516V079，纯度≥98％）、
        性相互作用主要是通过抑制药物代谢酶而产生的 。                             烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸二钠（批号 310O021，纯
                                                 [7]
            毛蕊花糖苷（结构式见图1）是从列当科Orobancha-                    度≥98％）、葡萄糖-6-磷酸-二钠（批号407H034，纯度≥
        ceae肉苁蓉属Cistanche植物肉苁蓉Cistanche deserticola         98％）、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（批号 821J012，纯度为
        Y. C. Ma中提取的一种含量较高的苯乙醇苷类化合物                 [8－9] 。  90％）、非那西丁对照品（批号517C025，纯度≥98％）、对
        2020 年版《中国药典》（一部）将毛蕊花糖苷列为肉苁蓉                        乙酰氨基酚对照品（批号615C023，纯度≥98％）、7-羟基
                               [10]
        药材质量控制的指标成分 。肉苁蓉是我国传统名贵                             香豆素对照品（批号 923A024，纯度≥98％）均购自北京
        补益类中药，性温、味甘，归肾经，具有补肾阳、益精血等                          索莱宝科技有限公司；4-羟基美芬妥因对照品（批号
             [11]
        功效 。古代中医药典籍记载，肉苁蓉为补肾要药，是                            20J001，纯度≥98％）、右啡烷对照品（批号 202006，纯
        中医治疗男性不育症的核心药物，是历代补肾阳方剂中                            度≥98％）、睾酮对照品（批号202006，纯度≥98％）、6β-
                                 [12]
        使用频率较高的补益药之一 。有研究表明，肉苁蓉醇                            羟基睾酮对照品（批号20J001，纯度≥98％）均购自北京
        提物中的苯乙醇苷类化合物可使大鼠血清睾酮水平和                             汇智泰康医药技术有限公司；吲达帕胺对照品（内标，批
                                  [13]
        CYP 酶表达水平均显著升高 。睾酮水平的升高除了                           号 C10982435，纯度≥98％）、无水磷酸氢二钾（批号
        与其介导的CYP酶表达增多有关外，还与其介导的代谢                           C10124744，纯 度 ≥98％ ）、磷 酸 二 氢 钾（ 批 号
        相关CYP酶被抑制有关 。笔者由此推测，睾酮水平的                           C11768869，纯 度 ≥99.5％）、双 氯 芬 酸 对 照 品（批 号
                             [14]
        升高可能与 CYP 酶被肉苁蓉苯乙醇苷类化合物抑制有                          C10093999，纯 度 ≥98％）、香 豆 素 对 照 品（批 号
        关。基于此，本研究利用超高效液相色谱-串联质谱（ul-                         C10929365，纯 度 ≥98％）、α- 萘 黄 酮 对 照 品（批 号
        tra high performance liquid chromatography-tandem mass  C10983885，纯度≥98％）、磺胺苯吡唑对照品（批号
        spectrometry，UPLC-MS/MS）法结合肝微粒体体外代谢                 C10648002，纯 度 ≥98％）、奎 尼 丁 对 照 品（批 号
          [15]
        法 ，选用《美国食品药品监督管理局药物相互作用评                            C10709588，纯 度 ≥98％）、噻 氯 匹 定 对 照 品（批 号
        价指南》推荐的底物 ，考察毛蕊花糖苷对大鼠肝微粒体                           C11608567，纯度≥98％）均购自上海麦克林生化科技有
                         [16]
        中 6 种 常 见 CYP 酶 CYP1A2、CYP2C19、CYP2C9、              限公司；美芬妥因对照品（批号C34141133C65B，纯度≥
        CYP2A6、CYP2D6、CYP3A4的影响，探讨该化合物是否                    98％）购自北京爱普拜生物科技有限公司；4-羟基双氯
        会引起代谢性相互作用；同时，采用计算机分子对接技                            芬酸对照品（批号Y19O11W125336，纯度≥98％）、毛果
        术对其潜在作用进行验证，以期为毛蕊花糖苷的临床前                            芸香碱对照品（批号Y19O11W125514，纯度≥98％）、酮
        研究和新药研发提供参考依据。                                      康唑对照品（批号 C11573894，纯度≥98％）均购自上海
                                                            源 叶 生 物 技 术 有 限 公 司 ；右 美 沙 芬 对 照 品（批 号
                                                            1911271150R，纯度≥99％）购自广东翁江化学试剂有限
                                                            公司；甲醇（色谱纯）和甲酸（色谱纯）均购自美国 Ther-
                                                            mo Fisher Scientific 公司；其余试剂均为分析纯，水为超
                                                            纯水。
                                                            1.3 其他
                                                                SD大鼠肝微粒体（20 mg/mL）购自北京汇智泰康医
                                                            药技术有限公司，批号为20190910RS。
                     图1 毛蕊花糖苷的结构式
                                                            2 方法与结果
        1 材料                                                2.1 溶液的配制
        1.1 主要仪器                                            2.1.1  对照品溶液      精密称取毛蕊花糖苷对照品适量，
            本研究所用主要仪器包括Acquity型UPLC-三重四                     用甲醇稀释并定容，配制成浓度为 3 000 μmol/L 的贮备
        极杆质谱联用仪（美国 Waters 公司）、Thermo Sorvall ST             液，于4 ℃下保存，备用。临用前，精密量取毛蕊花糖苷
        16R型高速冷冻离心机（美国Thermo Fisher Scientific公             贮备液适量，依次用甲醇稀释成浓度分别为30、10、3、1、
        司）、DK-S26 型恒温水浴锅（上海精宏实验设备有限公                        0.3、0.1 μmol/L的系列对照品溶液。


        ·686 ·  China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 6                                    中国药房    2022年第33卷第6期
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