Page 74 - 《中国药房》2021年24期
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析可知,S9~S11 为一小类,S5、S7~S8、S12~S13 为一 期分别对不同色谱柱[Diamonsil C18 (2)(250 mm×4.6
小类,S6、S15 为一小类,但 S6 和 S15 在空间中相对分 mm,5 μm)、Brava BDS C18 (250 mm×4.6 mm,5 μm)、
散,可能是由饮片生产企业工艺不同或药材采收时间差 Apollo C18 (250 mm×4.6 mm,5 μm)]进行了考察。结果
异所致。该结果与聚类分析结果基本相同。 发现,以 Diamonsil C18 (2)(250 mm×4.6 mm,5 μm)为色
谱柱时,酒五味子中各色谱峰分离良好,而采用另外两种
色谱柱时,峰3~7未达到完全分离,分离效果欠佳,故选
3.00
S15
择Diamonsil C18 (2)(250 mm×4.6 mm,5 μm)为色谱柱。
2.00 S6
15批酒五味子饮片指纹图谱的相似度均大于0.98,
主成分2 1.00 0 S11 S10 S3 S2 S1 S14 S4 表明不同批次酒五味子饮片之间成分差异较小,相似性
良好。聚类分析结果显示,当距离为 4 时,15 批酒五味
S5 S9 S8 S7 子饮片样品可聚为4类,其中河北产样品S1~S4、S14聚
-1.00
S12 S13
为一类,黑龙江产样品 S9~S11 聚为一类,吉林产样品
-2.00
-2.00 S5、S7~S8、S12~S13 聚为一类,辽宁产样品 S6、S15 聚
-2.00 -1.00
-1.00 0 1.00 1.00 0 为一类,表明聚类分析可以区分不同产地的酒五味子样
主成分1 2.00 2.00 主成分3
图6 15批酒五味子饮片的主成分分析散点图 品。主成分分析结果显示,前4个主成分的累计方差贡
Fig 6 Principal component analysis scatter diagram 献率为85.381%;15批酒五味子饮片分为4类,与聚类分
析结果基本相同。本研究采用中药指纹图谱相似度评
of 15 batches of wine-processed S. chinensis
价和聚类分析、主成分分析等化学模式识别分析对15批
decoction pieces
酒五味子饮片的质量进行了评价,所得结果基本一致,
2.4 五味子酒制前后的HPLC图对比
可为酒五味子饮片的质量控制提供参考。
精密称取生五味子(编号 Y1)及酒五味子饮片(编
有研究发现,生五味子在炮制、煎煮或长时间放置
号 S1)粉末,按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液,再按
过程中,其所含葡萄糖等单糖化合物在高温环境下可转
“2.1.1”项下色谱条件进样测定,记录色谱图。结果显
化为5-羟甲基糠醛 。5-羟甲基糠醛是一种具有毒性的
[19]
示,与生五味子比较,酒制后的五味子中新增了 5-羟甲
活性成分:一方面,其具有抗氧化、改善学习记忆、抗心
基糠醛,且含量较高,而其余色谱峰未见明显差异。结
肌缺血的作用;另一方面,该成分又具有神经毒性,可致
果见图7。
横纹肌麻痹和内脏损害 [20-21] 。本研究结果显示,生五
2
0.30 味子中不含 5-羟甲基糠醛;而经酒制后,酒五味子中的
AU 0.20 5-羟甲基糠醛(峰 1)含量显著增加,而其余色谱峰未见
0.10 9 15 16 18 明显差异。因此,笔者认为,5-羟甲基糠醛含量可作为
3 4 5 6 7 8 10 11 12 13 14 17 19 20
0
0 9.40 18.80 28.20 37.60 47.00 56.40 65.80 75.20 84.60 94.00 酒五味子饮片炮制工艺以及质量控制的关键参数。《本
t,min 草纲目》记载,五味子“入补药熟用” 。现代研究发现,
[22]
A.生五味子
酒五味子补肾作用最好 [9-10] ,但 5-羟甲基糠醛是否为酒
2
0.20 五味子补肾作用的有效成分,且该成分是否会影响酒五
AU 0.10 1 9 15 16 18 味子应用的安全性,尚待后续研究进一步探讨。
0 3 4 5 6 7 8 10 11 12 13 14 17 19 20 综上所述,所建HPLC指纹图谱简便、易行,结合聚
0 9.40 18.80 28.20 37.60 47.00 56.40 65.80 75.20 84.60 94.00
t,min 类分析和主成分分析可用于酒五味子饮片的质量控制。
B. 酒五味子 参考文献
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本课题组前期在200~400 nm波长范围内进行了全
药科技,2021,28(1):169-171.
波长扫描,并分别比较了283、250、210 nm波长下指纹图
[ 4 ] 马艳春,冯天甜,韩宇博,等.五味子的化学成分和药理研
谱中各色谱峰的出峰情况。结果显示,于 283 nm 波长
究进展[J].中医药学报,2020,48(11):67-71.
下,5-羟甲基糠醛色谱峰的响应最强,其余色谱峰的响 [ 5 ] 邢楠楠,屈怀东,任伟超,等.五味子主要化学成分及现代
应较弱;于 210 nm 波长下,色谱图的基线噪音较大;于 药理作用研究进展[J].中国实验方剂学杂志,2021,27
250 nm 波长下,所得指纹图谱的色谱信息较全面,基线 (15):210-218.
较平稳,故选择250 nm为检测波长。同时,本课题组前 [ 6 ] 王书云,李钦,刘亚芳,等.五味子高效液相色谱指纹图谱
·3012 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 24 中国药房 2021年第32卷第24期