Page 74 - 《中国药房》2021年24期
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析可知,S9~S11 为一小类,S5、S7~S8、S12~S13 为一                 期分别对不同色谱柱[Diamonsil C18 (2)(250 mm×4.6
        小类,S6、S15 为一小类,但 S6 和 S15 在空间中相对分                   mm,5 μm)、Brava BDS C18 (250 mm×4.6 mm,5 μm)、
        散,可能是由饮片生产企业工艺不同或药材采收时间差                            Apollo C18 (250 mm×4.6 mm,5 μm)]进行了考察。结果
        异所致。该结果与聚类分析结果基本相同。                                 发现,以 Diamonsil C18 (2)(250 mm×4.6 mm,5 μm)为色
                                                            谱柱时,酒五味子中各色谱峰分离良好,而采用另外两种
                                                            色谱柱时,峰3~7未达到完全分离,分离效果欠佳,故选
                3.00
                       S15
                                                            择Diamonsil C18 (2)(250 mm×4.6 mm,5 μm)为色谱柱。
                2.00         S6
                                                                15批酒五味子饮片指纹图谱的相似度均大于0.98,
              主成分2  1.00 0  S11  S10  S3  S2  S1  S14 S4    表明不同批次酒五味子饮片之间成分差异较小,相似性
                                                            良好。聚类分析结果显示,当距离为 4 时,15 批酒五味
                              S5  S9  S8 S7                 子饮片样品可聚为4类,其中河北产样品S1~S4、S14聚
               -1.00
                           S12  S13
                                                            为一类,黑龙江产样品 S9~S11 聚为一类,吉林产样品
               -2.00
                                                -2.00       S5、S7~S8、S12~S13 聚为一类,辽宁产样品 S6、S15 聚
                  -2.00                     -1.00
                      -1.00  0  1.00   1.00  0              为一类,表明聚类分析可以区分不同产地的酒五味子样
                          主成分1    2.00 2.00  主成分3
            图6 15批酒五味子饮片的主成分分析散点图                           品。主成分分析结果显示,前4个主成分的累计方差贡
        Fig 6 Principal component analysis scatter diagram  献率为85.381%;15批酒五味子饮片分为4类,与聚类分
                                                            析结果基本相同。本研究采用中药指纹图谱相似度评
               of 15 batches of wine-processed S. chinensis
                                                            价和聚类分析、主成分分析等化学模式识别分析对15批
               decoction pieces
                                                            酒五味子饮片的质量进行了评价,所得结果基本一致,
        2.4  五味子酒制前后的HPLC图对比
                                                            可为酒五味子饮片的质量控制提供参考。
            精密称取生五味子(编号 Y1)及酒五味子饮片(编
                                                                有研究发现,生五味子在炮制、煎煮或长时间放置
        号 S1)粉末,按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液,再按
                                                            过程中,其所含葡萄糖等单糖化合物在高温环境下可转
       “2.1.1”项下色谱条件进样测定,记录色谱图。结果显
                                                            化为5-羟甲基糠醛 。5-羟甲基糠醛是一种具有毒性的
                                                                            [19]
        示,与生五味子比较,酒制后的五味子中新增了 5-羟甲
                                                            活性成分:一方面,其具有抗氧化、改善学习记忆、抗心
        基糠醛,且含量较高,而其余色谱峰未见明显差异。结
                                                            肌缺血的作用;另一方面,该成分又具有神经毒性,可致
        果见图7。
                                                            横纹肌麻痹和内脏损害           [20-21] 。本研究结果显示,生五
                             2
          0.30                                              味子中不含 5-羟甲基糠醛;而经酒制后,酒五味子中的
         AU 0.20                                            5-羟甲基糠醛(峰 1)含量显著增加,而其余色谱峰未见
          0.10                        9        15 16  18    明显差异。因此,笔者认为,5-羟甲基糠醛含量可作为
                               3 4  5 6  7  8  10 11  12  13 14  17  19  20
           0
            0   9.40  18.80  28.20  37.60  47.00  56.40  65.80  75.20  84.60  94.00  酒五味子饮片炮制工艺以及质量控制的关键参数。《本
                                t,min                       草纲目》记载,五味子“入补药熟用” 。现代研究发现,
                                                                                           [22]
                              A.生五味子
                                                            酒五味子补肾作用最好           [9-10] ,但 5-羟甲基糠醛是否为酒
                             2
          0.20                                              五味子补肾作用的有效成分,且该成分是否会影响酒五
         AU  0.10  1                  9        15 16  18    味子应用的安全性,尚待后续研究进一步探讨。
           0                   3 4  5 6  7  8  10 11  12  13 14  17  19 20  综上所述,所建HPLC指纹图谱简便、易行,结合聚
            0   9.40  18.80  28.20  37.60  47.00  56.40  65.80  75.20  84.60 94.00
                                t,min                       类分析和主成分分析可用于酒五味子饮片的质量控制。
                              B. 酒五味子                       参考文献
              图7 生五味子及酒五味子饮片的HPLC图                          [ 1 ]  李林福,张赛男,刘海清,等.五味子炮制研究进展[J].中
        Fig 7 HPLC chromatograms of S. chinensis and wine-       国实验方剂学杂志,2015,21(3):232-234.
               processed S. chinensis decoction pieces      [ 2 ]  何颖,邹爱英,曹艳.五味子炮制的历史沿革及现代研

        3 讨论                                                     究[J].天津药学,2014,26(4):42-45.
                                                            [ 3 ]  武天元,张树明.龙九味之五味子研究进展[J].中国中医
            本课题组前期在200~400 nm波长范围内进行了全
                                                                 药科技,2021,28(1):169-171.
        波长扫描,并分别比较了283、250、210 nm波长下指纹图
                                                            [ 4 ]  马艳春,冯天甜,韩宇博,等.五味子的化学成分和药理研
        谱中各色谱峰的出峰情况。结果显示,于 283 nm 波长
                                                                 究进展[J].中医药学报,2020,48(11):67-71.
        下,5-羟甲基糠醛色谱峰的响应最强,其余色谱峰的响                           [ 5 ]  邢楠楠,屈怀东,任伟超,等.五味子主要化学成分及现代
        应较弱;于 210 nm 波长下,色谱图的基线噪音较大;于                            药理作用研究进展[J].中国实验方剂学杂志,2021,27
        250 nm 波长下,所得指纹图谱的色谱信息较全面,基线                            (15):210-218.
        较平稳,故选择250 nm为检测波长。同时,本课题组前                         [ 6 ]  王书云,李钦,刘亚芳,等.五味子高效液相色谱指纹图谱


        ·3012 ·  China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 24                                 中国药房    2021年第32卷第24期
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