Page 72 - 《中国药房》2021年24期

果显示，20 个共有峰相对保留时间的 RSD 为 0.02％～ 将 15 批酒五味子饮片的 HPLC 叠加指纹图谱与上述混
0.97％（n＝6），相对峰面积的 RSD 为 0.59％～1.99％ 合对照品溶液色谱图进行对比，共指认了其中8个共有
（n＝6），表明供试品溶液于室温下放置 15 h 内稳定性 峰，分别为5-羟甲基糠醛（峰1）、五味子醇甲（峰2）、五味
良好。 子醇乙（峰 5）、五味子酯甲（峰 9）、五味子酯乙（峰 10）、
2.1.6 重复性试验 取酒五味子饮片（编号S1）粉末，共 五味子甲素（峰13）、五味子乙素（峰18）、五味子丙素（峰
6份，按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1.1”项 20）。由于五味子醇甲（峰2）的峰面积较大、出峰时间居
下色谱条件进样测定，记录色谱图，以五味子醇甲为参 中、峰形好，且与相邻色谱峰分离较好，故选择五味子醇
照峰，计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积。结 甲为参照峰。
果显示，20 个共有峰相对保留时间的 RSD 为 0.02％～ 0.40 2
0.56％（n＝6），相对峰面积的 RSD 为 0.89％～2.06％ 0.30
AU 0.20
（n＝6），表明方法重复性良好。
0.10 1 5 9 10 13 18
2.1.7 指纹图谱的建立及对照指纹图谱的生成 取 15 0 20
0 9.40 18.80 28.20 37.60 47.00 56.40 65.80 75.20 84.60 94.00
批酒五味子饮片粉末，按“2.1.2”项下方法制备供试品溶
t，min
液，再按“2.1.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱图。 注：1. 5-羟甲基糠醛；2.五味子醇甲；5.五味子醇乙；9.五味子酯甲；
采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012 版）》对 10.五味子酯乙；13.五味子甲素；18.五味子乙素；20.五味子丙素
所得酒五味子的色谱图进行分析，以分离度较好的 S1 Note：1. 5-hydroxymethyl furfural；2. schisandrol A；5. schisandrol
为参照图谱，采用中位数法生成叠加指纹图谱和对照指 B；9. schisantherin A；10. schisantherin B；13. deoxyschizandrin；18.
γ-schisandrin；20. pseudo-γ-schizandrin
纹图谱。结果显示，15 批酒五味子饮片共有 20 个共有
图3 5-羟甲基糠醛等成分混合对照品溶液的HPLC图
峰。酒五味子饮片的 HPLC 叠加指纹图谱见图 1，对照
Fig 3 HPLC chromatograms of mixed control of
指纹图谱见图2。
5-hydroxymethyl furfural and other components
600 2.1.9 相似度评价 以酒五味子饮片的对照指纹图谱
560 2
520 为参照，采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012
480
440 版）》进行相似度评价。结果显示，15批酒五味子饮片指
400 18
360 1 5 6 9 13 14 16 纹图谱的相似度均大于0.98。结果见表2。
mv U， 320 3 4 7 8 10 11 12 15 17 19 20 R 表2 15批酒五味子饮片的相似度评价结果
280
S14
240 S15
S13
S12 Tab 2 Similarity evaluation of 15 batches of wine-pro-
200 S11
160 S10 cessed S. chinensis decoction pieces
S9
120 S8 S7
80 S6 S5 编号 相似度 编号 相似度
40 S4 S3
0 S2 S1 S1 0.990 S9 0.992
S2 0.989 S10 0.989
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52 56 60 64 68 72 76 80 84 88 92
t，min S3 0.987 S11 0.983
图1 15批酒五味子饮片的HPLC叠加指纹图谱 S4 0.986 S12 0.989
S5 0.998 S13 0.998
Fig 1 HPLC superimposed fingerprints of 15 batches
S6 0.997 S14 0.994
of wine-processed S. chinensis decoction pieces S7 0.999 S15 0.984
S8 0.999
300
280 2 2.2 聚类分析
260
240
220 以15批酒五味子饮片指纹图谱中20个共有峰的相
200
mv 180 对峰面积为变量，利用 SPSS 22.0 软件，运用 Ward 法以
U， 160
140
120 平方Euclidean距离为测度进行聚类分析。结果显示，当
100
80 18 距离为20时，15批酒五味子饮片可聚为两类，其中S1～
60 1 5
40 6 9 13 14 16
20 3 4 7 8 10 11 12 15 17 19 20 S4、S14 聚为一类，其药材生品的产地均为河北；S5～
0
S13、S15聚为一类，其药材生品的产地为东北地区（黑龙
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52 56 60 64 68 72 76 80 84 88 92
t，min 江、吉林和辽宁）。当距离为6时，15批酒五味子饮片可
图2 酒五味子饮片的对照指纹图谱
聚为 3 类，其中 S1～S4、S14 聚为一类，其药材生品的产
Fig 2 Control fingerprint of wine-processed S. chinensis
地均为河北；S5、S7～13聚为一类，其药材生品的产地为
decoction pieces 黑龙江和吉林；S6、S15 聚为一类，其药材生品的产地均
2.1.8 共有峰的指认 取“2.1.3”项下混合对照品溶液， 为辽宁。当距离为 4 时，可进一步将 S5、S7～13 分为两
按“2.1.1”项下色谱条件进样分析，记录色谱图（图 3）。 类，其中 S9～S11 聚为一类，其药材生品的产地为黑龙
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