Page 71 - 《中国药房》2021年24期
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类及挥发油等成分，其中五味子甲素、五味子乙素、五味                          均为木兰科植物五味子S. chinensis（Turcz.）Baill.的干燥
        子丙素、五味子醇甲、五味子醇乙和五味子酯甲等木脂                           成熟果实。根据本课题组前期所得最优酒制工艺进行
        素类化合物为其主要活性成分 ，具有改善心肌缺血/再                          炮制：取净五味子药材1 kg，加黄酒200 g，拌匀，闷润30
                                  [4]
        灌注引起的心肌损伤、心肌肥大、心肌氧化损伤和保肝                           min，置于罐或适宜容器内，密闭，隔水加热，蒸约 2 h 至
        护肝、调节中枢、增强免疫、改善肾功能、抗菌抑菌等作                          酒尽，待药材颜色变黑时，取出，于60 ℃下干燥，即得酒
        用 。目前，关于生五味子的指纹图谱研究较多                     [6－7] ，也  五味子饮片（共15批，编号依次为S1～S15）。15批五味
          [5]
        有通过建立指纹图谱区分南、北五味子并比较两者化学                           子药材来源信息见表1。
                  [8]
        成分的研究 ；而关于酒五味子的研究则主要集中在补肾                                    表1 15批五味子药材来源信息
        功效评价、酒制前后木脂素类成分含量变化等方面                     [9－11] 。   Tab 1 Sample source of 15 batches of S. chinensis
        酒五味子饮片在临床及成方制剂中多有应用，如2020年                          药材编号     产地      批号     药材编号      产地      批号
                                                     [12]
        版《中国药典》（一部）收载的人参养荣丸、健脑丸等 。                          Y1     河北承德     20191110  Y9   黑龙江庆安     20191215
                                                            Y2     河北遵化     20191112  Y10  黑龙江牡丹江 20191220
        酒五味子饮片虽被收载于《山东省中药饮片炮制规范
                                                            Y3     河北保定     20190910  Y11  黑龙江牡丹江 20191210
                    [13]
       （2012 年版）》 和《安徽省中药饮片炮制规范（2019 年                      Y4     河北承德     20190918  Y12  吉林长白山     20190311
            [14]
        版）》 中，但并未有指纹图谱的规定。因此，基于指纹                           Y5     吉林白山     20191010  Y13  吉林通化      20190908
                                                            Y6     辽宁抚顺     20190401  Y14  河北迁西      20191030
        图谱的质量控制研究有限，使得酒五味子饮片的整体质
                                                            Y7     吉林通化     20191006  Y15  辽宁本溪      20191202
        量无法得到全面评价，五味子酒制前后的成分差异未能                            Y8     吉林白山     20190920
        被完全阐明，制约了酒五味子炮制机制及药效作用的深                           2 方法与结果
        入研究。                                               2.1 指纹图谱的建立
            中药指纹图谱具有重现性好、专属性强、稳定性好                         2.1.1  色 谱 条 件    以 Diamonsil C18 （2）（250 mm × 4.6
                                                  [15]
        的特点，可全面系统地表征中药化学成分的特征 。化                           mm，5 μm）为色谱柱，以甲醇（A）-水（B）为流动相进行
        学模式识别分析能鉴别药材样品之间的差异，综合评估                           梯度洗脱（0～8 min，5％A→10％A；8～25 min，10％A→
        中药的质量     [16－17] 。基于此，本研究建立了酒五味子的高                60％A；25～55 min，60％A→68％A；55～64 min，68％A→
        效液相色谱（HPLC）指纹图谱，并结合聚类分析、主成分                        70％A；64～90 min，70％A→80％A；90～93 min，80％A；
        分析等对其质量进行评价，旨在为酒五味子的质量控制                           93～94 min，80％A→5％A）；检测波长为 250 nm；流速
        提供参考。                                              为1 mL/min；柱温为30 ℃；进样量为10 μL。
        1 材料                                               2.1.2  供试品溶液的制备          取酒五味子饮片粉末（过四
        1.1  主要仪器                                          号筛，下同）约1 g，精密称定，置于25 mL锥形瓶中，精密
            本研究所用主要仪器有 2695 型 HPLC 仪及配备的                   加入甲醇 25 mL，称定质量，超声（功率 250 W，频率 40
        2998 型二极管阵列检测器、Empower 2 色谱工作站（美                   kHz，下同）处理 30 min，放冷，再次称定质量，用甲醇补
        国 Waters 公司），AB135-S 型十万分之一电子分析天                   足减失的质量，摇匀，经 0.45 μm 微孔滤膜滤过，取续滤
        平[梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司]，FA2104 型万                     液，即得供试品溶液。
        分之一电子分析天平（上海精密科学仪器有限公司），                           2.1.3  混合对照品溶液的制备            分别取5-羟甲基糠醛、
        SB-5200 DTDN 型超声波清洗机（宁波新芝生物科技股                     五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子酯乙、五
        份有限公司）等。                                           味子甲素、五味子乙素、五味子丙素对照品 0.98、3.44、
        1.2  主要药品与试剂                                       0.91、1.24、1.03、0.71、0.93、0.38 mg，置于 10 mL 量瓶中，
            5-羟甲基糠醛对照品（批号111626-202013）、五味子                加甲醇适量，超声使其完全溶解，冷却，用甲醇定容，经
        醇甲对照品（批号 110857-201815）、五味子酯甲对照品                   0.45 μm 微孔滤膜滤过，取续滤液，即得混合对照品
       （批号 111529-201706）均购自中国食品药品检定研究                     溶液。
        院，纯度均大于 95％；五味子酯乙对照品（批号 58546-                     2.1.4  精密度试验       取“2.1.2”项下供试品溶液（编号
        55-7，纯度97.2％）购自上海诗丹德标准技术服务有限公                      S1），按“2.1.1”项下色谱条件连续进样测定6次，记录色
        司；五味子醇乙对照品（批号 151113）、五味子甲素对照                      谱图，以五味子醇甲为参照峰，计算各共有峰的相对保
        品（批号 131111）、五味子乙素对照品（批号 151113）、五                 留时间和相对峰面积。结果显示，20个共有峰相对保留
        味子丙素对照品（批号 140617）均购自成都普菲德生物                       时间的 RSD 为 0.03％～0.96％（n＝6），相对峰面积的
        技术有限公司，纯度均大于98％；甲醇为色谱纯，其余试                         RSD为0.95％～2.00％（n＝6），表明方法精密度良好。
        剂均为分析纯，水为超纯水。                                      2.1.5  稳定性试验       取“2.1.2”项下供试品溶液（编号
            15 批五味子药材（编号 Y1～Y15）均购自河北省某                    S1），分别于室温下放置0、3、6、9、12、15 h时按“2.1.1”项
        药材市场、山西省某中药饮片公司或北京同仁堂药店，                           下色谱条件进样测定，记录色谱图，以五味子醇甲为参
        经山西中医药大学中药鉴定教研室裴香萍副教授鉴定                            照峰，计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积。结


        中国药房    2021年第32卷第24期                                            China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 24  ·3009 ·
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