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效果   [7－8] 。由于多数靶向药物的血药浓度个体差异大，                     2.1.2  质谱条件     离子源为电喷雾离子源（ESI），以多
        且血药浓度与疗效、不良反应的相关性较强                   [9－10] ，因此可   反应监测（MRM）模式进行正离子扫描；碰撞气压力为
        通过血药浓度监测对患者用药剂量进行个体化调整，以                            6.00×10 Pa，气帘气压力为 2.00×10 Pa，雾化气压力为
                                                                   4
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        在保证疗效的同时降低胃肠道等不良反应的发生风                              4.48×10 Pa，辅助气压力为 4.48×10 Pa；喷雾电压为
                                                                                            5
        险。此外，由于吡咯替尼为药物代谢酶细胞色素P450 3A                        5 500 V；雾化温度为550 ℃；去簇电压分别为80 V（吡咯
        （CYP3A）的底物，故影响该酶活性的药物也可能会影响                         替尼）、92 V（内标）；碰撞能量分别为39 eV（吡咯替尼）、
        吡咯替尼的血药浓度，因此在联合用药时可根据吡咯替                            36 eV（内 标）；用 于 定 量 分 析 的 离 子 对 分 别 为 m/z
                                    [11]
        尼的血药浓度对其剂量进行调整 。                                    583.4→138.3（吡咯替尼）、494.5→393.4（内标）。吡咯替
            目前，关于吡咯替尼血药浓度检测的报道较少，仅                          尼和内标的化学结构式及二级全扫描质谱图见图1。
        有采用放射液相色谱法和超高效液相色谱-四极杆-飞行                                          138.3
        时间质谱（UPLC-Q-TOF-MS）法分析吡咯替尼在人体内
        的药动学过程       [11－12] 。但是放射液相色谱法不适用于临                      cps 1.0×10 5
        床血药浓度监测工作的常规开展，而 UPLC-Q-TOF-MS                            intensity，    m/z 138.3
        法所用设备十分昂贵且普及率较低，均难以满足临床吡
                                                                   5.0×10 4
        咯替尼血药浓度监测的需求。液相色谱-串联质谱                                                                    538.4
        （LC-MS/MS）法是目前检测小分子药物的最佳方法，该
        方法灵敏度高、专属性强，在大型三级甲等医院的普及
                                                                               200        400
        率较高，也是国外检测小分子靶向药物血药浓度的主要                                                     m/z
        手段  [13－14] 。基于此，本研究建立了测定人血浆中吡咯替                                          A.吡咯替尼
                                                                            m/z 393.4       393.4
        尼血药浓度的LC-MS/MS法，同时采用该方法对接受吡
        咯替尼治疗的乳腺癌患者体内的药物浓度进行检测，旨                                       5
        在为该药的个体化应用提供参考。                                           cps 1.0×10
        1 材料                                                      intensity，
        1.1  主要仪器                                                  5.0×10 4                        494.5
            本研究所用主要仪器有 API 4000 型三重四极杆串
                                         +
        联质谱系统（美国 AB 公司），1290Ⅱ型 UPHC 及配套的
        G7120 型溶剂泵、G7167B 型进样器、G7116B 型柱温箱                                  200             400
                                                                                    m/z
        （美国 Agilent 公司），5418 型离心机（德国 Eppendorf 公                                   B.内标
        司），DT5-6B 型低速台式自动平衡离心机（北京新时代                        图 1  吡咯替尼和内标的化学结构式及二级全扫描质
        北利医疗器械有限公司），BF-2000 型氮气吹干仪（北京                            谱图
        八方世纪科技有限公司），Milli-Q型超纯水机（美国Mil-                     Fig 1 Chemical structures and full scan MS/MS spec-
        lipore公司）等。                                               tra of pyrrotinib and internal standard
        1.2  主要药品与试剂                                        2.2  溶液的制备
            马来酸吡咯替尼对照品（批号 20061501，纯度＞                      2.2.1  对照品溶液      取吡咯替尼对照品约 10 mg，精密
        99％，以下简称“吡咯替尼对照品”）购自青岛英纳维生                          称定，置于 50 mL 量瓶中，加甲醇溶解并定容，混匀，制
        物科技有限公司；甲磺酸伊马替尼对照品（内标，批号                            成质量浓度为200 μg/mL的对照品溶液。
        S102608，纯度≥99％，以下简称“内标对照品”）购自美                      2.2.2  标准曲线溶液和质控样品溶液               取“2.2.1”项下
        国 Selleck Chemicals 公司；健康人空白血浆由青岛大学                 对照品溶液适量，用甲醇稀释，混匀，制成质量浓度分别
        附属医院输血科提供；乙腈（色谱纯）、甲醇（色谱纯）均                          为5、10、20、50、100、200、300 ng/mL的系列工作溶液；分
        购自德国 Merck 公司；甲酸（色谱纯）购自美国 Tedia 公                   别取上述系列工作溶液各 50 µL，置于试管中，于 60 ℃
        司；其余试剂均为分析纯，水为超纯水。                                  下以氮气流吹干，残渣分别加入空白血浆 50 µL，混匀，
        2 方法与结果                                             制成质量浓度分别为 5、10、20、50、100、200、300 ng/mL
        2.1 色谱与质谱条件                                         的系列标准曲线溶液。同法制备吡咯替尼质量浓度分
        2.1.1  色谱条件     以Ultimate AQ-C18 （100 mm×2.1 mm，    别为10、50、200 ng/mL的质控样品溶液。
        3.0 µm）为色谱柱，以甲醇（含0.1％甲酸，A）-水（含0.1％                  2.2.3  内标溶液     取内标对照品约10 mg，精密称定，置
        甲酸，B）为流动相进行梯度洗脱（0～0.5 min，32％A；                     于50 mL量瓶中，加甲醇溶解并定容，混匀，制成质量浓
        0.5～2.0 min，32％A→75％A；2.0～6.0 min，75％A）；流           度为200 μg/mL的内标贮备液；取上述内标贮备液适量，
        速为0.4 mL/min；柱温为40 ℃；进样量为5 µL。                      用甲醇稀释，混匀，制成质量浓度为 150 ng/mL 的内标


        ·2768 ·  China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 22                                 中国药房    2021年第32卷第22期
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