Page 78 - 《中国药房》2021年21期
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传毒性、生殖毒性，并具有致癌性               [3－5] 。环氧氯丙烷、缩        品的单一贮备液①适量，置于不同量瓶中，用甲醇稀释
        水甘油分别为 3-氯-1，2-丙二醇合成的起始物料和合成                        制成各对照品质量浓度均为 10 μg/mL 的单一贮备液
        副产物。其中，环氧氯丙烷又称表氯醇、3-氯-1，2-环氧                        ②。分别精密量取各对照品的单一贮备液②适量，置于
        丙烷，因其具有警示结构——环氧结构，故被视为潜在                            同一量瓶中，用甲醇稀释制成环氧氯丙烷质量浓度分别
        的遗传毒性杂质，具有潜在的致突变性、致畸性和致癌                            为 29.86、199.06、248.83、298.65、398.20、497.65、746.48
        性 ；缩水甘油又称环氧丙醇，相关动物实验证明其具有                           ng/mL，缩 水 甘 油 质 量 浓 度 分 别 为 172.91、230.54、
          [6]
        致癌作用 。目前，对于环氧氯丙烷、缩水甘油和 3-                           345.82、461.09、576.36、691.63、922.18 ng/mL，3-氯-1，2-
                 [7]
        氯-1，2-丙二醇常见的检测方法为气相色谱（GC）法和                         丙 二 醇 质 量 浓 度 分 别 为 21.18、31.78、42.37、52.96、
        气-质联用（GC-MS）法       [7－11] 。但目前文献报道的方法多             84.74、105.92、211.85 ng/mL的系列混合对照品溶液。
        是针对食品和环境中这3种遗传毒性杂质的检测，笔者                            2.3.2  供试品溶液的制备          精密称定甘磷酸胆碱原料
        尚未见甘磷酸胆碱化学原料药中上述3种遗传毒性杂质                            药1 g，置于10 mL量瓶中，用甲醇溶解并定容，摇匀，经
        同时测定的文献报道。由于不同样品的基质和检测要                             0.22 μm滤膜过滤，收集滤液，即得。
        求均有差异，既有文献方法不能满足甘磷酸胆碱原料药                            2.3.3 空白溶剂      以甲醇为空白溶剂。
        中上述3种遗传毒性杂质的检测要求。鉴于此，本研究                            2.4 方法学考察
        拟建立GC-MS法同时测定甘磷酸胆碱原料药中环氧氯                           2.4.1  专属性试验      分别精密吸取“2.3”项下环氧氯丙
        丙烷、缩水甘油和3-氯-1，2-丙二醇等3种遗传毒性杂质                        烷 质 量 浓 度 为 248.83 ng/mL、缩 水 甘 油 质 量 浓 度 为
        的含量，为该原料药的质量控制提供参考。                                 345.82 ng/mL、3-氯-1，2-丙二醇质量浓度为42.37 ng/mL
        1 材料                                                的混合对照品溶液以及供试品溶液（批号 200101）和空
        1.1 主要仪器                                            白溶剂，分别按“2.1”“2.2”项下条件进样测定，记录色谱
            Trace DSQ 型 GC-MS 仪（包 括 FINNIGAN Trace          图。结果显示，环氧氯丙烷、缩水甘油、3-氯-1，2-丙二醇
        DSQ 型质谱仪、Thermo FINNIGAN Trace GC ultra 型气          的保留时间分别为4.11、5.30、7.73 min，各待测成分峰均
        相仪、Xcalibur 工作站）购自美国 Thermo Electron 公司；            分离良好，无干扰峰，表明该方法的专属性较好。专属
        XPE-205型电子天平购自瑞士Mettler-Toledo公司。                   性考察的色谱图见图1。
        1.2  主要药品与试剂                                        2.4.2  线性关系考察        精密吸取“2.3.1”项下系列混合
            环氧氯丙烷对照品（批号G154861，纯度99.9％）、3-                  对照品溶液各 1 μL，分别按“2.1”“2.2”项下条件进样测
        氯-1，2-丙二醇对照品（批号G249657，纯度95.6％）均购                   定，记录峰面积。以各待测成分的质量浓度为横坐标
        自德国 Dr.Ehrenstorfer 公司；缩水甘油对照品（批号                  （x，ng/mL）、峰面积为纵坐标（y）进行线性回归，得到环
        101344-201501，供 GC 检查用）购自中国食品药品检定                   氧氯丙烷、缩水甘油、3-氯-1，2-丙二醇的回归方程分别
        研 究 院 ；甘 磷 酸 胆 碱 原 料 药（批 号 分 别 为 191001、            为 y＝100.19x+265.3（r＝0.999 7）、y＝94.114x－795.22
        200101、200102、200103，纯度均为 99.8％）购自湖南华              （r＝0.999 5）、y＝46.85x－296.5（r＝0.999 7）。结果表
        纳大药厂股份有限公司；甲醇为色谱纯。                                  明，环氧氯丙烷、缩水甘油、3-氯-1，2-丙二醇检测的质量
        2 方法与结果                                             浓度线性范围分别为 29.86～746.48、172.91～922.18、
        2.1  色谱条件                                           21.18～211.85 ng/mL。
                                TM
            色谱柱为ZB-WAXplus （30 m×0.25 mm，0.25 μm）；          2.4.3  检测限和定量限考察          取混合对照品溶液（环氧
        进样口温度为 200 ℃ ；进样方式为不分流进样；载气为                        氯丙烷、缩水甘油、3-氯-1，2-丙二醇的质量浓度分别为
        氦气（He），恒流模式；程序升温为初始温度 30 ℃保持 1                      9.95、12.81、10.59 μg/mL，制备方法同“2.3.1”项下），用甲
        min，然后以 30 ℃/min 的速率升温至 220 ℃并保持 5                  醇逐级稀释，然后按“2.1”“2.2”项下条件进样测定，记录
        min；进样量为1 μL。                                       峰面积，以信噪比 3 ∶ 1、10 ∶ 1 分别测得检测限和定量
        2.2 质谱条件                                            限。结果显示，环氧氯丙烷、缩水甘油、3-氯-1，2-丙二醇
            离子源为电子轰击源（EI），电离电压为70 eV，离子                     的检测限分别为19.91、115.27、10.59 ng/mL，定量限分别
        源温度为200 ℃；质谱传输接口温度为250 ℃；质谱监测                       为29.86、172.91、21.18 ng/mL。
        模式为选择离子（SIM）；检测特征离子为环氧氯丙烷[质                         2.4.4  精密度试验      取“2.3.1”项下混合对照品溶液（环
        荷比（m/z）49、57、62]、缩水甘油（m/z 31、43、44）、3-氯-            氧氯丙烷、缩水甘油、3-氯-1，2-丙二醇的质量浓度分别
        1，2-丙二醇（m/z 44、61、79）；溶剂延迟时间为3 min。                 为248.83、345.82、42.37 ng/mL），按“2.1”“2.2”项下条件
        2.3 溶液制备                                            连续进样测定 6 次，记录峰面积。结果显示，环氧氯丙
        2.3.1  混合对照品溶液的制备            分别取环氧氯丙烷、缩             烷、缩水甘油、3-氯-1，2-丙二醇峰面积的 RSD 分别为
        水甘油、3-氯-1，2-丙二醇对照品各约 10 mg，精密称定，                    6.1％、3.3％、5.0％（n＝6），表明仪器精密度良好。
        置于不同10 mL量瓶中，分别用甲醇溶解并定容，摇匀，                         2.4.5  稳定性试验      取“2.3.1”项下混合对照品溶液（环
        作为各对照品的单一贮备液①。分别精密量取各对照                             氧氯丙烷、缩水甘油、3-氯-1，2-丙二醇的质量浓度分别


        ·2632 ·  China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 21                                 中国药房    2021年第32卷第21期
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