Page 75 - 《中国药房》2021年21期

表 4 茵芋苷等 3 种待测成分的加样回收率试验结果 表5 消瘤藤药材中茵芋苷等3种待测成分的含量测定
（n＝6） 结果（n＝3，mg/g）
Tab 4 Results of recovery tests of 3 components such Tab 5 Results of content determination of 3 com-
as skimmin（n＝6） ponents such as skimmin in P. tomentella（n＝

取样量， 已知量， 加入量， 测得量， 加样回收率， 平均加样回 RSD， 3，mg/g）
成分
g mg mg mg ％ 收率，％ ％ 编号 茵芋苷 7-羟基香豆素 7-羟基-8-甲氧基香豆素
茵芋苷 0.251 7 1.526 1.522 3.029 98.75 99.47 0.95 S1 6.055 1.594 1.088
0.253 2 1.535 1.522 3.066 100.59 S2 3.808 1.424 0.778
0.250 8 1.520 1.522 3.028 99.08 S3 4.452 0.722 0.183
0.255 4 1.548 1.522 3.081 100.72 S4 3.973 0.678 0.174
0.251 9 1.527 1.522 3.027 98.55 S5 1.337 0.348 0.083
0.254 6 1.543 1.522 3.052 99.15 S6 1.522 0.449 0.089
S7 9.534 1.611 0.576
7-羟基香豆素 0.251 7 0.399 0.392 0.802 102.81 101.07 1.47
0.253 2 0.401 0.392 0.796 100.77 S8 2.929 0.810 0.221
S9 2.981 0.858 0.268
0.250 8 0.398 0.392 0.799 102.30
S10 6.362 2.236 0.712
0.255 4 0.405 0.392 0.804 101.79
平均值 4.295 1.073 0.417
0.251 9 0.399 0.392 0.789 99.49
0.254 6 0.404 0.392 0.793 99.23 3 讨论
7-羟基-8-甲氧基香豆素 0.251 7 0.273 0.274 0.551 101.50 99.89 1.12
0.253 2 0.275 0.274 0.548 99.64 3.1 TLC鉴别条件的选择
0.250 8 0.272 0.274 0.541 98.18 笔者前期分别考察了不同展开剂[氯仿-乙酸乙酯
0.255 4 0.277 0.274 0.552 100.36 （9 ∶ 1，V/V）、氯仿-丙酮（9 ∶ 1，V/V）、氯仿-丙酮（9.5 ∶ 0.5，
0.251 9 0.274 0.274 0.545 98.91
0.254 6 0.276 0.274 0.552 100.73 V/V）和正己烷-正丙醇（9 ∶ 1，V/V）]、不同观察方法（紫外
光灯 254 nm、紫外光灯 365 nm、日光）、不同展距（8、10、
4.6 mm，5 μm）测定同一供试品溶液（编号S1）中茵芋苷、
7-羟基香豆素和7-羟基-8-甲氧基香豆素的含量，其余条 12 cm）对 TLC 鉴别结果的影响。结果显示，以氯仿-丙
件同“2.7.2”项。结果显示，3 种待测成分的平均含量依 酮（9.5 ∶ 0.5，V/V）为展开剂、展距为 8 cm、在紫外光灯
次为6.045、1.601、1.097 mg/g，RSD分别为1.24％、1.16％、 365 nm条件下观察到的分离效果较好，主斑点的比移值

1.35％（n＝3）。（2）不同HPLC仪：分别采用Waters e2695 （Rf ）适宜，且斑点清晰。
和 Agilent 1260 两台不同 HPLC 仪测定同一供试品溶液 3.2 HPLC法供试品溶液制备方法的选择
（编号S1）中茵芋苷、7-羟基香豆素和7-羟基-8-甲氧基香 笔者在前期研究中对消瘤藤药材超声提取和回流
豆素的含量，其余条件同“2.7.2”项。结果显示，3种成分 提取的结果进行了对比，发现回流提取的样品含量略高
的平均含量依次为6.055、1.594、1.088 mg/g，RSD 分别为 于超声提取，但回流提取所得杂质相对较多，同时考虑
0.94％、1.08％、1.52％（n＝2）。上述结果均表明本方法 到超声提取比较方便，因此最终选择超声提取法来提取
耐用性良好。 样品。在提取溶剂上，笔者曾对甲醇、无水乙醇、95％乙
2.7.9 样品含量测定 取10批消瘤藤药材样品，分别按 醇、80％乙醇、80％甲醇的提取效果进行比较，发现采用
“2.7.1（1）”项下方法制备供试品溶液，再按“2.7.2”项下 80％甲醇提取所得样品含量较高，因此选择80％甲醇作
色谱条件进样测定，计算峰面积，以外标法计算各批药 为提取溶剂。在提取时间上，笔者发现提取40 min后样
材中茵芋苷、7-羟基香豆素和7-羟基-8-甲氧基香豆素的 品含量无明显增加，故选择提取时间为40 min。
含量，每批样品平行测定3次，结果如表5所示。 3.3 HPLC条件的选择
由表5可知，10批样品中茵芋苷、7-羟基香豆素和7- 笔者通过HPLC-二极管阵列检测器在210～400 nm
羟 基 -8- 甲 氧 基 香 豆 素 的 含 量 分 别 为 1.337～9.534、 波长范围内进行全波长扫描，可得茵芋苷、7-羟基香豆

0.348～2.236、0.083～1.088 mg/g，平 均 含 量 分 别 为 素和 7-羟基-8-甲氧基香豆素的最大吸收波长分别为
4.295、1.073、0.417 mg/g。考虑到药材来源差异，本研究 318、324、321 nm，其中在 320 nm 波长下检测时各色谱
以略低于含量最低值设限，初步拟定本品中茵芋苷的含 峰的分离度均大于 1.5 且基线平稳，故综合各方面因素
量不得少于 1.30 mg/g、7-羟基香豆素的含量不得少于 考虑，最终选择320 nm作为检测波长。笔者前期还对甲
0.30 mg/g、7-羟基-8-甲氧基香豆素的含量不得少于0.06 醇-水、乙腈-水、甲醇-0.1％磷酸溶液、乙腈-0.1％磷酸溶
mg/g。 液 、甲 醇 -0.1％ 甲 酸 溶 液 、乙 腈 -0.1％ 甲 酸 溶 液 、甲

中国药房 2021年第32卷第21期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 21 ·2629 ·