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3 讨论                                                    China[J]. Phytother Res，2004，18（9）：718-722.
            猴耳环加入至双水相萃取体系后，在超声的物理效                         [ 4 ]  LEUNG K T，CHIU L C，LAM W S，et al. In vitro antivi-
        应下，多酚从植物细胞中快速释放、扩散，并在上相富                                ral activities of chinese medicinal herbs against duck hepa-
                                                                titis B virus[J]. Phytother Res，2006，20（10）：911-914.
        集，而杂质（如多糖类、蛋白类）由于极性较大易富集于
                                                           [ 5 ]  WANG Y X，DUAN Z K，CHANG Y，et al. Triterpenes
        下相，以此达到提取纯化的目的。本课题组前期曾对双
                                                                from Archidendron clypearia（Jack）I.C.N. with anti-β-amy-
        水相萃取体系中的超声温度进行考察，发现随着温度的
                                                                loid aggregation activity[J]. Nat Prod Res，2021，35（16）：
        升高，双水相萃取体系的稳定性变差，在 60 ℃时不分
                                                                2789-2792.
        相。双水相萃取体系受分子间的作用力（范德华力、疏
                                                           [ 6 ]  THAO N P，LUYEN B T T，VINH L B，et al. Rat intesti-
        水作用、分子间的氢键、分子与分子之间电荷作用等）影                               nal sucrase inhibited by minor constituents from the
        响，在超声和高温条件下，体系黏度和密度均会发生改                                leaves and twigs of Archidendron clypearia （Jack.）
        变，从而影响分子间的作用力             [29－30] ，故应严格控制在室             nielsen[J]. Bioorg Med Chem Lett，2016，26（17）：4272-
        温下提取。                                                   4276.
            灰色关联度分析对大、小样本量和有、无规律样本                         [ 7 ]  CIRIC A，KRAJNC B，HEATH D，et al. Response surface
        均同样适用，而且计算量小，十分方便，用于“成分-药                               methodology and artificial neural network approach for
        效”分析的优势明显         [31－33] 。本课题组前期研究发现，猴                 the optimization of ultrasound-assisted extraction of poly-
                                                                phenols from garlic[J]. Food Chem Toxicol，2020，135：
        耳环不同极性部位色谱峰峰面积与DPPH、ABTS的IC50
        呈负相关，因此本研究将 DPPH、ABTS 的 IC50进行倒数                        110976.
                                                           [ 8 ]  SHAO Y，ZHANG Y H，ZHANG F，et al. Thermostable
        转换，再进行灰色关联度分析。结果显示，猴耳环多酚
                                                                tannase from aspergillus niger and its application in the en-
        中各色谱峰与 IC50 的倒数的关联度（前 10 位）均大于
                                                                zymatic extraction of green tea[J]. Molecules，2020，25
        0.5，表明猴耳环的抗氧化活性与多酚类成分具有一定的
                                                                （4）：952.
        关联性，抗氧化活性可能是各成分共同作用的结果。
                                                           [ 9 ]  SRIDHAR A，PONNUCHAMY M，KUMAR P S，et al.
            本研究结果显示，乙酸乙酯可富集抗氧化活性贡献
                                                                Techniques and modeling of polyphenol extraction from
        较大的多酚类成分，因此选择乙酸乙酯作为改良剂。以                                food：a review[J]. Environ Chem Lett，2021，17：1-35.
        10％乙酸乙酯-乙醇混合溶剂配制的改良型双水相萃取                          [10]  巫永华，陆文静，刘梦虎，等.响应面优化超声波辅助双水
        体系提取猴耳环多酚的结果显示，萃取物中还含有较多                                相提取牛蒡多糖及抗氧化分析[J].食品与发酵工业，
        的硫酸铵晶体；而以 70％乙酸乙酯-乙醇混合溶剂配制                              2020，46（5）：215-223.
        的改良型双水相萃取体系提取猴耳环多酚的结果显示，                           [11]  NG H S，KEE P E，YIM H S，et al. Characterization of al-
        上相中由于增加了有机溶剂的含量，扩大了两相的极性                                cohol/salt aqueous two-phase system for optimal separa-
        差异，使上相含水量降低，导致硫酸铵向下相转移，从而                               tion of gallic acids[J]. J Biosci Bioeng，2021，131（5）：
                          [34]
        减少了硫酸铵的残留 。因此，选择70％乙酸乙酯-乙醇                              537-542.
        混合溶液配制改良型双水相萃取体系。                                  [12]  刘小琴，张薇，范华均，等.双水相萃取分离苦参生物
            回流/超声提取法是中药最常用的传统提取方法，与                             碱[J].过程工程学报，2012，12（4）：641-647.
                                                           [13]  刘哲.微波辅助分离及纯化葛根异黄酮[D].武汉：武汉工
        其比较，以 70％乙酸乙酯-乙醇混合溶液的改良型双水
                                                                程大学，2015.
        相萃取体系提取的萃取物中猴耳环多酚含量、抗氧化活
                                                           [14]  孙伟鹏.沙棘果渣中主要有效成分的盐析萃取[D].石河
        性均无明显差异，但得率和转移率显著升高。
                                                                子：石河子大学，2018.
            综上所述，本研究成功建立了改良型双水相萃取体                         [15]  李超.猴耳环提取方法和体外抑菌活性研究[J].四川畜牧
        系，可一步提取猴耳环中的多酚类成分，为多酚的提取                                兽医，2018，45（1）：27-28.
        和双水相萃取的应用提供了参考。                                    [16]  付元凤.猴耳环的化学成分研究及对咪喹莫特诱导小鼠
        参考文献                                                    银屑病模型的干预作用[D].上海：上海中医药大学，
        [ 1 ]  付元凤，刘芳，李思佳，等.猴耳环的研究进展[J].中草药，                    2019.
             2018，49（5）：1174-1183.                         [17]  王欢.猴耳环化学成分研究及其含量测定[D].广州：广州
        [ 2 ]  YANG W S，LEE J，KIM T W，et al. SRC/NF-κB-targeted  中医药大学，2014.
             inhibition of LPS-induced macrophage activation and dex-  [18]  ALBERTSSON P A. Partition of cell particles and macro-
             tran sodium sulphate-induced colitis by Archidendron  molecules[M]. New York：Wiley，1971：58-71.
             clypearia methanol extract[J]. J Ethnopharmacol，2012，  [19]  邵圣娟，胡学豪，郭佳仪，等.超声辅助双水相提取山药皮
             142（1）：287-293.                                    总多酚工艺的优化[J].中成药，2020，42（3）：740-744.
        [ 3 ]  LI Y L，OOI L S，WANG H，et al. Antiviral activities of  [20]  刘景煜，李晨，肖林刚，等.双水相萃取法分离纯化金针菇
             medicinalherbs traditionally used in southern mainland  子实体多糖[J].食品与发酵工业，2017，43（5）：255-260.


        中国药房    2021年第32卷第18期                                            China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 18  ·2241 ·
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