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表 4 猴耳环多酚各色谱峰峰面积与 IC50 的关联度 于20 mL量瓶中，加70％乙醇溶解、稀释并定容，制成质
（ABTS，前10位） 量浓度均为1 mg/mL的样品溶液。
Tab 4 Correlation of peak area of polyphenols from 2.8.2 萃 取 物 提 取 指 标 和 抗 氧 化 活 性 的 比 较 取
A. clypearia with IC50（ABTS，top 10） “2.8.1”项下样品溶液各适量，分别按照“2.3”项下方法测
序号 峰号 关联度 序号 峰号 关联度 定其中的多酚含量，按如下公式计算得率和转移率：得
1 3 0.782 4 6 1 0.664 1 率＝Mc/M×100％，转移率＝Yc/Ys×100％ [27－28]
2 5 0.715 4 7 2 0.651 9 。式中，Mc
3 4 0.713 0 8 6 0.635 2 为萃取物质量，M 为药材投料量，Yc为萃取物中多酚含
4 8 0.682 3 9 10 0.609 0 量，Ys 为药材中多酚含量。按“2.5.3”项下方法检测
5 17 0.681 2 10 16 0.604 8
“2.8.1”项下各样品溶液对 DPPH 和 ABTS 自由基的
2.7 改良型双水相萃取体系中不同质量分数乙酸乙酯
IC50。采用SPSS 25.0软件对数据进行统计分析，两两比
对猴耳环多酚提取的影响
较采用 LSD 法，检验水准α＝0.05。每样品平行 3 份操
按“2.6”项下方法配制改良型双水相萃取体系，考察
作，结果见表5。
乙酸乙酯-乙醇混合溶液中不同质量分数乙酸乙酯（0、
表 5 不同提取工艺对提取猴耳环多酚的影响（x±±s，
10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％）对
n＝3）
猴耳环多酚提取的影响。结果显示，随着乙酸乙酯质量
Tab 5 Effects of different extraction technology on
分数的增加，多酚含量呈先升高后降低的趋势，提取效
the extraction of polyphenols from A. clypearia
率呈逐渐降低的趋势，且在乙酸乙酯质量分数为 10％
（x±±s，n＝3）
时，多酚含量最高，提取效率和分配系数均较高；此外，
样品 多酚含量，％ 得率，％ 转移率，％ DPPH的IC50，mg/mL ABTS的IC50，mg/mL
在乙酸乙酯质量分数为70％时有一突跃点，且此时分配
A′ 12.21±0.62 257.87±6.70
系数达到最大，详见图 4。这可能与上相极性改变而导 A 65.29±1.04 34.56±0.59 87.42±2.89 0.004 6 0.024 4
致部分大极性多酚转移至下相有关。 B 66.40±1.10 18.54±0.53 ＊ 47.96±2.16 ＊ 0.004 5 0.019 2
C 66.06±1.65 18.04±0.68 ＊ 46.12±0.59 ＊ 0.004 7 0.019 9
40 100 18 D 69.32±0.90 14.14±0.71 ＊ 37.99±2.40 ＊ 0.004 5 0.021 7
38 多酚含量，％
36 提取效率，％ 95 16 注：与A样品比较，P＜0.05
＊
分配系数
34
32 14 ＊
％ 30 90 ％ 12 Note：vs. sample A， P＜0.05
多酚含量， 28 85 提取效率， 10 分配系数 由表5可知，A′样品的得率超过100％，提示其中含
26
24
22 80 8 有大量的硫酸铵，后续不再纳入分析。A、B、C、D 样品
20
18 75 6 中多酚含量和抗氧化活性组间比较差异均无统计学意
16
14 70 4 义（P＞0.05），但 A 样品的得率和转移率均显著高于 B、
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100
乙酸乙酯-乙醇混合溶液中乙酸乙酯的质量分数，％ C、D 样品（P＜0.05），说明加入适量的改良剂（乙酸乙
图4 改良型双水相萃取体系中不同比例乙酸乙酯对提 酯）将有利于猴耳环多酚溶出和纯化。
取猴耳环多酚的影响 2.8.3 萃取物的成分比较 取“2.8.1”项下A、B、C、D样
Fig 4 Effects of different proportions of ethyl acetate 品溶液各适量，按“2.5.4”项下色谱条件进样分析，记录
on the extraction of polyphenols from A. 色谱图。结果显示，上述4种样品的色谱图基本一致，详
clypearia in modified aqueous two-phase system 见图5。

2.8 改良型双水相萃取方法与传统提取方法的比较 0.20
0.18
2.8.1 样品溶液的制备 分别配制含10％、70％乙酸乙
0.16
酯的乙酸乙酯-乙醇混合溶液的改良型双水相萃取体 0.14
0.12
系，按“2.6”项下方法提取猴耳环多酚，取上相浓缩、冻
AU 0.10
干，制成A′样品和A样品。以70％乙醇为溶剂，液料比 0.08
0.06 A样品
为 1 ∶ 45，室温超声提取 20 min，取提取液浓缩后加入等 0.04 B样品
体积乙酸乙酯萃取，取上层浓缩、冻干，制成B样品。以 0.02 C样品
0 D样品
70％乙醇为溶剂，液料比为 1 ∶ 45，加热回流 1 h，取提取
液浓缩后加入等体积乙酸乙酯萃取，取上层浓缩、冻干， 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55
t，min
制成 C 样品。以水为溶剂，液料比为 1 ∶ 45，加热回流 1 图5 不同提取工艺样品的超高效液相色谱图
h，取提取液浓缩后加入等体积乙酸乙酯萃取，取上层浓 Fig 5 UPLC chromatograms of samples with different
缩、冻干，制成 D 样品。精密称取上述样品各 20 mg，置 extraction technologies

·2240 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 18 中国药房 2021年第32卷第18期