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目前，关于仙茅的炮制研究以酒炙为主，本课题组                          2.1.3  微波炮制法      取上述生仙茅饮片20 g，置于密闭
        前期实验发现，仙茅经酒炙后能够增强其补肾助阳的功                            容器内，加入20％黄酒拌匀，闷透，单层铺于微波炉托盘
        效 。传统酒炙法为加入黄酒闷润后于锅中炒干，但对                            上，微波功率 450 W，微波时间 3 min，干燥，取出，放凉，
          [9]
        炒制火候、炮制时间等条件仅凭经验控制，存在着火候                            即得。
        难以控制、饮片表面易出现焦斑、色泽不均匀等弊端。                            2.2 醇溶性浸出物的测定
        微波炮制不仅操作简单、节能高效、工艺可控，还具有消                               以 95％乙醇为溶剂，按 2020 年版《中国药典》（四
        毒杀菌的作用，可弥补传统炮制方法的不足                   [10－11] 。仙茅   部）通则“2201 浸出物测定法”项下“醇溶性浸出物测定
        以酚苷类化合物为主，其中仙茅苷属苯甲酸酯类酚苷，                            法——热浸法”测定 。
                                                                             [14]
        是2020年版《中国药典》（一部）中规定的仙茅质量控制                         2.3 仙茅苷等3种成分的含量测定
                                                [1]
        的指标性成分，也是其补肝肾的有效成分之一 ；苔黑酚                           2.3.1  色谱条件      ①仙茅苷——以 Diamonsil plus 5
        葡萄糖苷、苔黑酚龙胆二糖苷属苔黑酚类酚苷，在仙茅                           （250 mm×4.6 mm，5 μm）为色谱柱，以乙腈-0.1％磷酸溶
                                                  [12]
        中的含量较高，是其发挥强筋骨作用的有效成分 。基                            液（24 ∶ 76，V/V）为流动相；检测波长为210 nm；流速为1
        于此，本研究采用高效液相色谱法（HPLC）测定仙茅苷、                         mL/min；柱温为 30 ℃；进样量为 10 µL。②苔黑酚葡萄
        苔黑酚葡萄糖苷、苔黑酚龙胆二糖苷的含量，同时以上
                                                            糖苷、苔黑酚龙胆二糖苷——以 Diamonsil plus 5（250
        述3种成分及醇溶性浸出物含量为评价指标，采用正交
                                                            mm×4.6 mm，5 μm）为色谱柱，以乙腈（A）-0.1％磷酸溶
        设计对酒仙茅的微波炮制工艺进行优选，旨在为其微波
                                                            液（B）为流动相进行梯度洗脱（0～7 min，95％B→
        炮制工艺的规范化、标准化操作奠定理论基础，为酒仙
                                                            90％B；7～20 min，90％B）；检测波长为 220 nm；流速
        茅饮片的工业化生产提供参考。
                                                            为 0.6 mL/min；柱温为30 ℃；进样量为10 µL。
        1 材料
                                                            2.3.2  对照品溶液的制备         精密称取仙茅苷、苔黑酚葡
        1.1  主要仪器
                                                            萄糖苷、苔黑酚龙胆二糖苷对照品适量，分别置于10 mL
            本研究所用主要仪器有：Waters e2695 型 HPLC 仪
                                                            量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，混匀，制得仙茅苷、
        （美国 Waters 公司）、KQ-250E 型医用超声波清洗器（江
                                                            苔黑酚葡萄糖苷、苔黑酚龙胆二糖苷质量浓度分别为
        苏昆山市超声仪器有限公司）、XMTD-8222型电热恒温
                                                            0.152 0、0.227 0、0.247 0 mg/mL的单一对照品溶液。
        鼓风干燥箱（上海精宏实验设备有限公司）、HZ-A6002
                                                            2.3.3  供试品溶液的制备          取“2.1.3”项下微波炮制酒
        型电子天平（瑞安市金讯贸易有限公司）、FA1004B型电
                                                            仙茅样品粉末（过三号筛，下同）1.0 g，精密称定，加入甲
        子天平（上海精密科学仪器有限公司）、DFT-200 型高速
                                                            醇50 mL，称定质量，加热回流2 h，取出，放冷，再次称定
        万能粉碎机（浙江温岭市林大机械有限公司）、S7G88C
                                                            质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过。精密量取上
        型微波炉（苏州三星电子有限公司）等。
                                                            述滤液20 mL，蒸干，残渣加甲醇复溶并转移至10 mL量
        1.2  药品与试剂
                                                            瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，经 0.22 μm 微孔滤膜滤
            仙茅苷对照品（批号 S0818AS，纯度＞98％）、苔黑
                                                                             [1]
                                                            过，取续滤液，即得 。同法制得生仙茅饮片、传统酒炙
        酚葡萄糖苷对照品（批号 O0201AS，纯度≥97％）、苔黑
                                                            酒仙茅的供试品溶液。
        酚龙胆二糖苷对照品（批号 J1014AS，纯度＞98％）均购
        自大连美仑生物技术有限公司；黄酒（批号20190202，酒                       2.3.4  阴性对照溶液的制备          以甲醇为阴性对照溶液，
        精度 10％）购自浙江古越龙山绍兴酒股份有限公司；甲                          经0.22 μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。
        醇、乙腈、磷酸均为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为                           2.3.5  系统适用性试验        取上述各单一对照品溶液、供
        超纯水。                                                试品溶液（微波炮制酒仙茅）和阴性对照溶液适量，按
            仙茅药材（批号1805002）购自安国市聚药堂药业有                     “2.3.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱图，详见图 1。
        限公司，经辽宁中医药大学中药鉴定室李峰教授鉴定为                            由图1可知，各色谱峰均基线分离，分离度均大于1.5，阴
        石蒜科植物仙茅C. orchioides Gaertn.的干燥根茎。                  性对照对测定无干扰。
        2 方法与结果                                             2.3.6  线性关系考察        分别精密吸取“2.3.2”项下各单
        2.1 仙茅饮片及其酒炙品的制备                                    一对照品溶液适量，用甲醇稀释，制成仙茅苷质量浓度
        2.1.1  生仙茅饮片       将仙茅药材除去杂质，洗净，切成                  分别为 30.40、60.80、91.20、121.6、152.0 μg/mL，苔黑酚
        2 mm厚片，于60 ℃电热恒温鼓风干燥箱中干燥，即得。                        葡萄糖苷 45.40、90.80、136.2、181.6、227.0 μg/mL，苔黑
        2.1.2  传统酒炙法       取上述生仙茅饮片20 g，置于密闭                酚龙胆二糖苷 49.40、98.80、148.2、197.6、247.0 μg/mL 的
        容器内，加入 10％黄酒（即生仙茅饮片质量的 10％，下                        各单一系列线性溶液，按“2.3.1”项下色谱条件进样测
        同）拌匀，闷透，待黄酒被吸尽后，置于锅中，以文火炒                           定，记录峰面积。以各待测成分进样量（X）为横坐标、峰
                         [13]
        干，取出，放凉，即得 。                                        面积（Y）为纵坐标进行线性回归，结果见表1。

        ·2224 ·  China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 18                                 中国药房    2021年第32卷第18期
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