Page 93 - 《中国药房》2021年10期

定，分别以信噪比 3 ∶ 1 和 10 ∶ 1 计算检测限和定量限，结 表4 马钱苷酸等7个待测成分的加样回收率试验结果
果见表3。 （n＝6）
表3 马钱苷酸等7个待测成分的检测限及定量限 Tab 4 Results of recovery tests of 7 components to be
Tab 3 Detection limits and quantification limits of 7 tested as loganin acid（n＝6）
components to be tested as loganin acid 待测成分 称样量，g 已知量，mg 加入量，mg 测得量，mg 回收率，％ 平均回收率，％ RSD，％

待测成分 检测限，μg/mL 定量限，μg/mL 待测成分 检测限，μg/mL 定量限，μg/mL 马钱苷酸 0.201 7 0.198 6 0.195 3 0.390 2 98.11 98.81 0.42
马钱苷酸 0.060 1 0.200 4 隐丹参酮 0.031 6 0.079 1 0.200 2 0.197 1 0.195 3 0.391 1 99.33
龙胆苦苷 0.161 0 0.503 0 丹参酮Ⅰ 0.051 8 0.259 2 0.200 8 0.197 7 0.195 3 0.390 9 98.92
芍药苷 0.399 6 0.999 0 丹参酮ⅡA 0.082 5 0.412 6 0.200 4 0.197 3 0.195 3 0.389 9 98.62
丹酚酸B 0.159 8 0.399 5 0.201 0 0.197 9 0.195 3 0.391 3 99.03
0.200 5 0.197 4 0.195 3 0.390 4 98.82
2.2.8 精密度试验 精密吸取“2.2.6”项下稀释后的混
龙胆苦苷 0.201 7 0.966 7 0.955 7 1.931 9 100.99 100.17 0.47
合对照品溶液（马钱苷酸、龙胆苦苷、芍药苷、丹酚酸B、 0.200 2 0.959 6 0.955 7 1.916 9 100.17
隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮Ⅱ A 的质量浓度分别为 0.200 8 0.962 4 0.955 7 1.914 8 99.65
0.200 4 0.960 5 0.955 7 1.919 4 100.33
27.054、90.540、89.910、89.892、17.802、11.664、18.564
0.201 0 0.963 4 0.955 7 1.920 0 100.09
μg/mL）各10 μL，按“2.2.1”项下色谱条件连续进样6次， 0.200 5 0.961 0 0.955 7 1.914 8 99.80
记录峰面积。结果，马钱苷酸、龙胆苦苷、芍药苷、丹酚 芍药苷 0.201 7 0.764 2 0.749 2 1.507 0 99.15 99.55 1.03
0.200 2 0.758 5 0.749 2 1.518 2 101.40
酸 B、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮Ⅱ A峰面积的 RSD 分
0.200 8 0.760 8 0.749 2 1.504 0 99.20
别 为 1.99％ 、2.15％ 、1.98％ 、1.06％ 、1.17％ 、1.03％ 、 0.200 4 0.759 3 0.749 2 1.498 9 98.72
1.20％（n＝6），表明仪器精密度良好。 0.201 0 0.761 5 0.749 2 1.511 0 100.04
2.2.9 稳定性试验 取“2.2.3”项下同一供试品溶液（编 0.200 5 0.759 7 0.749 2 1.499 9 98.80
丹酚酸B 0.201 7 0.359 7 0.349 6 0.709 5 100.06 100.05 1.21
号S1），分别于室温下放置0、3、6、9、12、24 h时按“2.2.1”
0.200 2 0.357 0 0.349 6 0.699 9 98.08
项下色谱条件进样测定，记录峰面积。结果，马钱苷酸、 0.200 8 0.358 0 0.349 6 0.710 3 100.77
龙胆苦苷、芍药苷、丹酚酸B、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参 0.200 4 0.357 3 0.349 6 0.704 3 99.26
酮Ⅱ A 峰面积的 RSD 分别为 0.59％、0.28％、0.65％、 0.201 0 0.358 4 0.349 6 0.712 8 101.37
0.200 5 0.357 5 0.349 6 0.709 8 100.77
1.24％、1.35％、0.95％、1.38％（n＝6），表明供试品溶液 隐丹参酮 0.201 7 0.070 4 0.096 2 0.167 6 101.04 100.28 1.16
在室温下放置24 h内稳定性良好。 0.200 2 0.069 8 0.096 2 0.166 5 100.52
2.2.10 重复性试验 精密称取同一批筋骨痛消丸样品 0.200 8 0.070 0 0.096 2 0.164 8 98.54
0.200 4 0.069 9 0.096 2 0.165 3 99.17
（编号 S1）6 份，按“2.2.3”项下方法制备供试品溶液，再
0.201 0 0.070 1 0.096 2 0.167 8 101.56
按“2.2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并按标准 0.200 5 0.069 9 0.096 2 0.166 9 100.83
曲线法计算含量。结果，马钱苷酸、龙胆苦苷、芍药苷、 丹参酮Ⅰ 0.201 7 0.059 0 0.064 8 0.123 7 99.85 99.44 0.47
0.200 2 0.058 6 0.064 8 0.122 6 98.77
丹酚酸 B、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮Ⅱ A含量的 RSD
0.200 8 0.058 8 0.064 8 0.123 0 99.07
分别为 2.71％、1.42％、1.65％、1.78％、0.82％、1.48％、 0.200 4 0.058 7 0.064 8 0.123 2 99.54
1.25％（n＝6），表明该方法重复性良好。 0.201 0 0.058 8 0.064 8 0.123 6 100.00
2.2.11 加样回收率试验 精密称取已知含量的筋骨痛 0.200 5 0.058 7 0.064 8 0.123 1 99.38
丹参酮ⅡA 0.201 7 0.104 8 0.103 1 0.206 4 98.55 98.82 0.20
消丸样品（编号S1）0.2 g，共6份，置于具塞锥形瓶中，分 0.200 2 0.104 0 0.103 1 0.205 8 98.74
别加入与待测成分近似等量的混合对照品溶液，按 0.200 8 0.104 3 0.103 1 0.206 2 98.84
“2.2.3”项下方法制备供试品溶液，再按“2.2.1”项下色谱 0.200 4 0.104 1 0.103 1 0.205 9 98.74
0.201 0 0.104 4 0.103 1 0.206 6 99.13
条件进样测定，记录峰面积并计算加样回收率。结果，7
0.200 5 0.104 1 0.103 1 0.206 1 98.93
个待测成分的平均加样回收率为 98.81％～100.28％，
RSD为0.20％～1.21％（n＝6），详见表4。 列检测器在190～400 nm波长范围内对待测成分进行扫
2.2.12 样品含量测定 取10批筋骨痛消丸样品粉末各 描。结果显示，在 230 nm 波长处色谱图中的峰容量较
0.4 g，精密称定，按“2.2.3”项下方法制备供试品溶液，再 多、峰形较好，故本研究选择230 nm作为最终检测波长。
按“2.2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并按标准 3.1.2 流动相的选择 由于筋骨痛消丸中化学成分众
曲线法计算马钱苷酸、龙胆苦苷、芍药苷、丹酚酸B、隐丹 多、理化性质各异，故本研究采用梯度洗脱的模式，先后
参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮Ⅱ A的含量。每样品重复测定3 考察了甲醇-水、乙腈-水以及甲醇-0.1％甲酸水溶液、乙
次，取平均值，结果见表5。 腈-0.1％甲酸水溶液、乙腈-磷酸水溶液（0.02％～0.1％）
3 讨论 的分离效果。结果表明，当流动相为乙腈-磷酸水溶液
3.1 色谱条件的选择 时，所得色谱图基线平稳，各色谱峰分离效果相对更
3.1.1 检测波长的选择 本课题组前期采用二极管阵 好。同时，本课题组对流动相中磷酸的浓度进行了考

中国药房 2021年第32卷第10期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 10 ·1239 ·