Page 75 - 《中国药房》2021年07期

表8 止得咳颗粒水提工艺提取次数考察结果 表11 止得咳颗粒水提工艺正交试验的方差分析结果
Tab 8 Investigation result of extraction times of Zhide- Tab 11 Results of variance analysis of orthogonal test
ke granules in water extraction technology for water extraction technology of Zhideke
次野鸢尾黄素 granules
序号 提取次数，次 总黄酮，mg/g
含量，μg/g 转移率，％ 指标成分 方差来源 偏差平方和 自由度 均方 F P
1 1 9.77 7.76 42.78 次野鸢尾黄素 A 927.9 2 464.0 22.1 ＞0.05
2 2 40.01 31.80 55.84 B 77.5 2 38.8 1.8 ＞0.05
3 3 49.57 39.40 76.09 C 1 973.1 2 986.6 47.0 ＜0.05
4 4 51.28 40.77 82.78
D（误差） 41.9 2 21.0 ＞0.05
加水倍量（A）、提取时间（B）、提取次数（C）为考察因素， 总黄酮 A 242.1 2 121.1 11.6 ＞0.05
B 19.4 2 9.7 0.9 ＞0.05
4
进行L9 （3）正交试验。各试验均在药材浸泡50 min后进
C 2 825.4 2 1 412.7 135.8 ＜0.05
行。止得咳颗粒水提工艺正交试验的因素与水平见表 D（误差） 20.8 2 10.4 ＞0.05
9，其试验设计与结果见表10，其方差分析结果见表11。 2.3.5 验证试验
表9 止得咳颗粒水提工艺正交试验的因素与水平 按处方比例称取药材，共 3 份，每份 962 g；先按
Tab 9 Factors and levels of orthogonal test for water “2.2”项下方法提取荆芥和薄荷挥发油后，再将药材残渣
extraction technology of Zhideke granules 与其余8味药材混合，按上述最优水提工艺进行提取，最
水平 A（加水倍量），倍 B（提取时间），min C（提取次数），次 后按“2.3.1”“2.3.2”项下方法检测提取物中次野鸢尾黄
1 8 30 1 素和总黄酮的含量。结果，3 次验证试验所得提取物中
2 10 60 2
3 12 90 3 次野鸢尾黄素的含量分别为77.84、77.41、74.16 μg/g，平
表10 止得咳颗粒水提工艺正交试验设计与结果 均含量为 76.47 μg/g（RSD＝2.15％，n＝3）；总黄酮的含
Tab 10 Orthogonal experiment design and results of 量分别为 93.07、92.23、92.06 mg/g，平均含量为 92.45
water extraction technology of Zhideke gra- mg/g（RSD＝0.48％，n＝3）。这提示该优化水提工艺稳
nules 定、可行。
3 讨论
次野鸢尾黄素 总黄酮含量，
试验号 A，倍 B，min C，次 D（空白）
含量，μg/g mg/g 3.1 止得咳颗粒药效学模型的建立
1 1 1 1 1 13.21 32.23 诱发咳嗽常用的化学刺激法包括气雾吸入和直接
2 1 2 2 2 28.90 59.08
3 1 3 3 3 37.34 76.40 注入两种方法，其中气雾吸入法主要是将没有麻醉的实
4 2 1 2 3 38.34 67.16 验动物（如大鼠、小鼠）置于恒定容积的密闭容器内，放
5 2 2 3 1 53.44 85.40 入一定量的刺激性气体，诱发其咳嗽；直接注入法则是
6 2 3 1 2 8.52 40.56 给麻醉动物（如兔）插入气管套管，把规定剂量的刺激性
7 3 1 3 2 68.65 83.55
[27]
8 3 2 1 3 30.21 44.75 气体直接充入气管套管中，诱发其咳嗽 。但有研究指
9 3 3 2 1 53.06 76.72 出，后一种方法若操作不当或麻醉过深则有可能会抑制
次野鸢尾黄素 均值1 79.45 120.20 51.94 119.71 咳嗽反射，影响实验结果 。通过比较两种方法，本研
[27]
均值2 100.30 112.55 120.30 106.07
均值3 151.92 98.92 159.43 105.89 究选择使用气雾吸入氨水法来诱发咳嗽，此法操作简便
极差 72.47 21.28 107.49 13.82 且实验结果易观察。
总黄酮 均值1 167.71 182.94 117.54 194.35 本研究通过化学试剂二甲苯涂抹小鼠耳朵致肿胀
均值2 193.12 189.23 202.96 183.19
均值3 205.02 193.68 245.35 188.31 来建立急性炎症模型，二甲苯致炎机制与临床常见急性
极差 37.31 10.74 127.81 11.16 炎症类似，且有操作简单、流程少、无需专用设备、效果
由表10、表11可知，表中极差值的大小提示各因素 好、价格便宜等优点，被广泛应用于抗炎效果评价和抗
对次野鸢尾黄素和总黄酮含量的影响大小依次均为：提 炎靶点化合物的筛选 。有研究指出，二甲苯可引起组
[28]
取次数＞加水倍量＞提取时间，其中提取次数对上述成 胺激肽和纤维蛋白等炎症介质的溶出释放，导致局部血
分含量的影响均有统计学意义（P＜0.05），而加水倍量 管扩张、毛细管通透性增加、炎症细胞浸润，诱发耳部急
[29]
和提取时间的影响则无统计学意义（P＞0.05）；直观分 性渗出性炎症水肿，从而建立急性炎症模型 。
析表明，以次野鸢尾黄素含量为评价指标的最优条件为 3.2 止得咳颗粒工艺优化中评价指标的选择
A3B1C3，以 总 黄 酮 含 量 为 评 价 指 标 的 最 优 条 件 为 通过处方分析，方中龙脷叶和射干作为君药，故选
A3B3C3。由于提取时间的影响较弱，综合考虑资源节约 择其中的有效成分作为指标性成分。在预试验中，笔者
等生产实际，最终确定最优水提工艺为 A3B2C3，即用 12 发现龙脷叶的指标性成分山柰酚-3-O-龙胆二糖苷缺乏
倍量的水，浸泡50 min后提取3次，每次提取1 h。 特应性的色谱条件（即阴性对照有干扰），故暂未选择该

中国药房 2021年第32卷第7期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 7 ·837 ·