Page 74 - 《中国药房》2021年07期

中总黄酮的含量（以芦丁计）。 表6 止得咳颗粒水提工艺药材浸泡时间考察结果
（1）溶液的制备：精密称取芦丁对照品 48.5 mg，置 Tab 6 Investigation result of immersion time of Zhide-
于 50 mL 量瓶中，加乙醇溶解并定容，制成质量浓度为 ke granules in water extraction technology
0.97 mg/mL 的芦丁对照品溶液。取止得咳颗粒水提物 序号 加水倍量，倍 浸泡时间，min 药材吸水后的质量，g 吸水率，％
约 0.1 g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入水 10 1 10 10 375.95 95.40
2 10 20 434.90 126.04
mL，称定质量，超声（功率 200 W，频率 40 kHz）提取 30
3 10 30 470.05 144.31
min，放冷，再称定质量，用水补足减失的质量，摇匀，滤 4 10 40 505.92 162.95
过，即得供试品溶液。 5 10 50 536.04 178.61
6 10 60 539.85 180.59
（2）测定波长的确定：取“2.3.2（1）”项下芦丁对照品 7 10 70 543.32 182.39
溶液，分别加 5％亚硝酸钠溶液 0.4 mL，摇匀，静置 6 8 10 80 544.82 183.17
min；加入 10％硝酸铝溶液 0.4 mL，摇匀，静置 6 min；加 酮的含量，并计算次野鸢尾黄素的转移率（总黄酮无转
入1 mol/L氢氧化钠溶液4 mL，再加乙醇定容至25 mL， 移率之说，故不作考察）：转移率＝水提取浸膏中次野鸢
放置15 min。以相应试剂（即乙醇）作空白，使用紫外-可 尾黄素含量/药材中次野鸢尾黄素含量×100％，以考察
见分光光度计在 400～800 nm 波长范围内扫描。结果， 不同提取时间的影响。结果，随着提取时间的延长，次
芦丁的最大吸收波长为509 nm，故将其作为测定波长。 野鸢尾黄素和总黄酮的含量也有所增加。当提取时间
（3）方法学考察：按 2015 年版《中国药典》（四部） [26] 达到90 min时，次野鸢尾黄素和总黄酮的含量分别达到
要求进行方法学考察。结果，以待测物质量浓度（X， 了 12.28 μg/g、40.25 mg/g，次野鸢尾黄素的转移率为
μg/mL）为横坐标、峰面积（Y）为纵坐标，求得回归方程为 8.51％；当再增加提取时间后，次野鸢尾黄素的含量和转
Y＝1.099 1X+0.002 7（r＝0.999 8），表明芦丁检测质量浓 移率均变化不大，而总黄酮的含量有所下降；此外，当提
度的线性范围为 0.019 4～0.077 6 mg/mL。精密度试验 取时间为 60、90 min 时，该方君药指标性成分次野鸢尾
的 RSD 为 0.39％（n＝6）；稳定性（24 h）试验的 RSD 为 黄素的含量差异不明显，详见表 7。从减少耗能等生产
0.28％（n＝7）；重复性试验结果显示，总黄酮的平均含量 实际出发，选择提取时间为60 min。
为52.61 mg/g，RSD为1.52％（n＝6）；平均加样回收率为 表7 止得咳颗粒水提工艺提取时间考察结果
99.54％，RSD 为 1.34％（n＝6）。这表明方法的精密度、 Tab 7 Investigation result of extraction time of Zhide-
重复性、准确度均良好，供试品溶液在 24 h 内稳定性 ke granules in water extraction technology
良好。
序号 提取时间，min 次野鸢尾黄素 总黄酮含量，mg/g
（4）样品测定：精密称取水提物样品，按“2.3.2（1）” 含量，μg/g 转移率，％
项下方法制备供试品溶液，再按“2.3.2（2）”项下条件测 1 30 8.00 5.55 32.32
2 60 10.67 7.39 30.58
定吸光度。每份样品重复测定3次，按外标法计算样品
3 90 12.28 8.51 40.25
中总黄酮的含量，取平均值。 4 120 12.99 9.00 37.29
2.3.3 止得咳颗粒水提工艺的单因素考察 5 150 15.26 8.09 24.06
本研究对药材浸泡时间、提取时间、提取次数等因 （3）提取次数：按处方比例称取药材，共 4 份，每份
素进行单因素考察 [25，27] 。 192.4 g，加入 10 倍量水，浸泡 50 min 后，分别提取 1、2、
（1）药材浸泡时间：按处方比例称取药材，共8份，每 3、4次，每次均加入10倍量水、提取60 min。合并提取液
份192.4 g（为原组方药材总质量的1/5，其中荆芥和薄荷 并浓缩后，按“2.3.1”“2.3.2”“2.3.3（2）”项下方法测定水
为提取挥发油后的药材残渣，下同），加入10倍量水分别 提物中次野鸢尾黄素、总黄酮的含量和次野鸢尾黄素的
浸泡10、20、30、40、50、60、70、80 min，滤过，称取药材吸 转移率，以考察不同提取次数的影响。结果，随着提取
水后的质量，按“2.2.1”项下方法计算其吸水率，以考察 次数的不断增加，各指标含量均呈不同程度的上升趋
不同浸泡时间的影响。结果表明，当浸泡时间≥50 min 势；当提取次数达到3次时，次野鸢尾黄素和总黄酮的含
时，药材的吸水率未见明显变化，说明药材吸水性已到 量分别为 49.57 μg/g、76.09 mg/g，次野鸢尾黄素的转移
达饱和状态，此时的吸水率为178.61％，详见表6。从生 率为 39.40％；而当提取次数为 4 次时，各指标含量及次
产实际出发，为确保药材得以充分浸泡，确定药材的浸 野鸢尾黄素转移率的增幅均不大，详见表 8。从减少能
泡时间为50 min。 耗等生产实际出发，选择提取次数为3次。
（2）提取时间：按处方比例称取药材，共 5 份，每份 2.3.4 正交试验优化止得咳颗粒的水提工艺
192.4 g，加入 10 倍量水，浸泡 50 min 后，分别提取 30、 在单因素考察的基础上，以次野鸢尾黄素和总黄酮
60、90、120、150 min，提取次数固定为1次。将提取液浓 的含量为评价指标（因次野鸢尾黄素转移率的变化趋势
缩，按“2.3.1”“2.3.2”项下方法测定次野鸢尾黄素和总黄 与其含量基本一致，故未将转移率作为评价指标），选定

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