Page 86 - 《中国药房》2021年2期
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1.2 药品与试剂 心 5 min，取上清液，经 0.22 μm 微孔滤膜滤过，取续滤
没 食 子 酸 对 照 品（批 号 110831-201906，纯 度 液，即得。
91.5％）、5-羟甲基糠醛对照品（批号 111626-201912，纯 2.2.4 精密度考察 取“2.2.3”项下供试品溶液适量（编
度 99.2％）、莫诺苷对照品（批号 111998-201703，纯度 号S1），按“2.2.1”项下色谱条件连续进样测定6次，记录
97.4％）、马 钱 苷 对 照 品（批 号 111640-201808，纯 度 色谱图。以马钱苷（4 号峰）为参照，计算各共有峰的相
99.0％）均购自中国食品药品检定研究院；乙腈、磷酸均 对保留时间和相对峰面积。结果，6 个共有峰相对保留
为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为超纯水。 时间和相对峰面积的 RSD 均小于 3％（n＝6），表明方法
10 批山茱萸药材经广东一方制药有限公司魏梅主 精密度良好。
任药师鉴定为山茱萸科植物山茱萸C. officinalis Sieb. et 2.2.5 重复性考察 取山萸肉饮片粉末（编号 S1），约
Zucc.的干燥成熟果实。样品信息来源见表1。 0.2 g，共 6 份，精密称定，按“2.2.3”项下方法制备供试品
表1 10批山茱萸药材样品信息来源 溶液，再按“2.2.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱
Tab 1 Sample source information of 10 batches of C. 图。以马钱苷（4 号峰）为参照，计算各共有峰的相对保
officinalis 留时间和相对峰面积。结果，6 个共有峰相对保留时间
和相对峰面积的 RSD 均小于 3％（n＝6），表明方法重复
编号 批号 采收时间 产地
SZ01 2019120202 2019年11月 河南省三门峡市卢氏县 性良好。
SZ02 2019120203 2019年11月 河南省三门峡市卢氏县 2.2.6 稳定性考察 取“2.2.3”项下供试品溶液适量（编
SZ03 2019120302 2019年12月 河南省洛阳市嵩县 号 S1），分别于室温下放置 0、2、4、8、10、12、16、20、24 h
SZ04 2019120101 2019年12月 陕西省汉中城固县
SZ05 2019120102 2019年12月 陕西省汉中城固县 时按“2.2.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱图。以马
SZ06 2019120103 2019年12月 陕西省汉中城固县 钱苷（4 号峰）为参照，计算各共有峰的相对保留时间和
SZ07 2019110301 2019年11月 浙江省杭州市淳安县 相对峰面积。结果，6 个共有峰相对保留时间和相对峰
SZ08 2019110302 2019年11月 浙江省杭州市淳安县
SZ09 2019120201 2019年11月 河南省南阳市西峡县 面积的 RSD 均小于 3％（n＝9），表明供试品溶液于室温
SZ10 2019050401 2019年5月 浙江省杭州市淳安县 下放置24 h内稳定性良好。
2 方法与结果 2.2.7 UPLC特征图谱建立 取10批山萸肉饮片、10批
2.1 山萸肉、酒萸肉饮片的制备 酒萸肉（酒炖）饮片和 10 批酒萸肉（酒蒸）饮片样品，按
[2]
按 2020 年版《中国药典》（一部）“山茱萸”项下饮 “2.2.3”项下方法制备供试品溶液，再按“2.2.1”项下色谱
片炮制方法进行炮制：分别取10批山茱萸药材各200 g， 条件进样测定，采用《中药色谱指纹图谱相似度评价软
除去杂质和残留果核，得山萸肉饮片（编号 S1～S10）。 件（2012A）》对色谱图进行共有峰匹配，以编号为 S1 的
山萸肉饮片色谱图为参照图谱，将时间窗宽度设为 0.1
取山萸肉饮片，按 2020 年版《中国药典》（四部）通则
[11]
“0213 酒炖法或酒蒸法” 炖或蒸至黄酒吸尽，取出，干 min，采用多点校正法进行色谱峰匹配，得UPLC叠加特
征图谱，详见图1～图3；选择中位数法生成山萸肉、酒萸
燥，得酒萸肉饮片（酒炖饮片编号S11～S20；酒蒸饮片编
肉（酒炖、酒蒸）饮片的对照特征图谱，详见图4。
号S21～S30）。
3
2.2 UPLC特征图谱的建立 550 4（S） 7
500 1 5 6
2.2.1 色 谱 条 件 以 ACQUITY UPLC BEH C18 （150 450 S10
400 S9
mm×2.1 mm，1.7 μm）为色谱柱；以乙腈（A）- 0.2％磷酸 350 S8
mV 300 S7
水溶液（B）为流动相梯度洗脱（0～3 min，2％A→8％ U， 250 S6
200
A；3～9 min，8％A→15％A；9～13 min，15％A→23％ 150 S5
S4
100
A；13～19 min，23％A→100％A；19～24 min，100％A→ 50 S3
0 S2
S1
2％A）；检测波长为 260 nm；流速为 0.2 mL/min；柱温为
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24
25 ℃；进样量为1 μL。 t，min
2.2.2 混合对照品溶液的制备 取没食子酸、5-羟甲基 图1 10批山萸肉饮片的UPLC叠加特征图谱
糠醛、莫诺苷、马钱苷对照品适量，精密称定，加 80％甲 Fig 1 UPLC superimposed characteristic chromato-
醇制成上述成分质量浓度分别为 51.68、61.70、50.49、 grams of 10 batches of C. officinalis decoction
48.43 μg/mL的混合对照品溶液。 pieces
2.2.3 供试品溶液的制备 取山萸肉饮片粉末（过三号 2.2.8 共有峰指认 10 批山萸肉饮片色谱图中有 6 个
筛，下同），约 0.2 g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密 共有峰，酒萸肉（酒炖）饮片和酒萸肉（酒蒸）饮片有7个
加入 50％甲醇 20 mL，密塞，称定质量，超声（功率 500 共有峰；通过与混合对照品（见图 5，按“2.2.1”项下色谱
W，频率 40 kHz）处理 30 min，取出，放冷，再次称定质 条件进样分析所得）比对，共指认了其中4个共有峰，分
量，用50％甲醇补足减失的质量，摇匀，以5 000 r/min离 别为没食子酸（1 号峰）、5-羟甲基糠醛（2 号峰）、莫诺苷
·208 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 2 中国药房 2021年第32卷第2期
