Page 81 - 《中国药房》2021年2期
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制备的 10 批马甲子总三萜粉末(编号 S1~S10),按                             80
                                                                  70
       “2.1.1”项下方法制备供试品溶液,再按“2.1.3”项下色谱                           60
                                                                 mV  50
        条件进样测定,将色谱数据导入《中药色谱指纹图谱相                                 U,  40        4(S)
                                                                  30
        似度评价系统(2012 版)》,得到马甲子总三萜样品的叠                              20
                                                                  10
        加指纹图谱,详见图1。                                               0
                                                                    0     10     20    30     40     50
         450         2  3  4(S)
                     1     5   6                                                   t,min
         400                                        R                            A.对照品溶液
         350                                        S10           80
                                                                  70
                                                    S9            60
         300
                                                    S8           mV  50
         mV  250                                    S7           U,  40
         U,  200                                    S6            20
                                                                  30
         150                                        S5            10 0
                                                    S4
         100                                                        0     10     20    30     40     50
                                                    S3
          50                                        S2                             t,min
                                                                               B.空白溶液(甲醇)
          0                                         S1
                                                                  80
                                                                  70
            0   5   10  15  20  25  30  35  40  45  50            60
                               t,min                              50           4(S)
         图1 10批马甲子总三萜样品的HPLC叠加指纹图谱                                mV  U,  40  2  3
                                                                  30
        Fig 1 HPLC superimposed fingerprints of 10 batches        20       1       6
                                                                  10            5
              of P. ramosissimus total triterpenes                 0
                                                                    0     10     20    30     40     50
        2.1.8  相似度评价      采用《中药色谱指纹图谱相似度评                                           t,min
        价系统(2012版)》对10批马甲子总三萜样品(编号S1~                                        C.供试品溶液(编号:S11)
        S10)的指纹图谱进行相似度评价,采用多点校正方法对                             注:4.马甲子素
                                                               Note:4. paliurusene
        各色谱峰进行全峰匹配,生成马甲子总三萜对照图谱
                                                                 图2   马甲子总三萜样品的高效液相色谱图
       (图 1 中的“R”曲线)。结果,10 批样品相似度均大于
        0.990,详见表2。                                        Fig 2 HPLC chromatograms of P. ramosissimus total
        表2 10批马甲子总三萜样品及对照图谱的相似度评价                                 triterpenes
             结果                                             表3 10批马甲子总三萜样品共有峰的相对保留时间
        Tab 2 Results of similarity evaluation of 10 batches of  Tab 3  Relative retention time of common peaks of 10
               P. ramosissimus total triterpenes and control      batches of P. ramosissimus total triterpenes
               chromatograms                               峰号  S1  S2   S3  S4  S5  S6  S7  S8  S9  S10 RSD,%
                                                           1   0.644  0.644  0.638  0.638  0.640  0.640  0.640  0.642  0.642  0.641  0.332
        编号  S1  S2  S3  S4  S5  S6  S7  S8  S9  S10  R
                                                           2   0.705  0.705  0.699  0.705  0.701  0.701  0.701  0.703  0.703  0.703  0.293
        S1  1.000  0.992  0.995  0.991  0.993  0.996  0.994  0.999  0.998  0.998  0.996
        S2  0.992  1.000  1.000  1.000  1.000  0.999  1.000  0.996  0.998  0.998  0.999  3  0.926  0.926  0.920  0.920  0.926  0.926  0.926  0.927  0.927  0.925  0.285
        S3  0.995  1.000  1.000  0.999  1.000  1.000  1.000  0.998  0.999  0.999  1.000  4(S) 1.000  1.000  1.000  1.000  1.000  1.000  1.000  1.000  1.000  1.000  0.000
                                                           5   1.116  1.122  1.116  1.116  1.121  1.121  1.121  1.121  1.121  1.117  0.229
        S4  0.991  1.000  0.999  1.000  1.000  0.999  1.000  0.995  0.997  0.997  0.999
        S5  0.993  1.000  1.000  1.000  1.000  0.999  1.000  0.997  0.998  0.998  0.999  6  1.441  1.441  1.435  1.435  1.439  1.439  1.445  1.442  1.442  1.444  0.233
        S6  0.996  0.999  1.000  0.999  0.999  1.000  1.000  0.999  1.000  1.000  1.000  表4  10批马甲子总三萜样品共有峰的相对峰面积
        S7  0.994  1.000  1.000  1.000  1.000  1.000  1.000  0.998  0.999  0.999  1.000  Tab 4  Relative peak area of common peaks of 10
        S8  0.999  0.996  0.998  0.995  0.997  0.999  0.998  1.000  1.000  1.000  0.999  batches of P. ramosissimus total triterpenes
        S9  0.998  0.998  0.999  0.997  0.998  1.000  0.999  1.000  1.000  1.000  1.000
        S10  0.998  0.998  0.999  0.997  0.998  1.000  0.999  1.000  1.000  1.000  1.000  峰号  S1  S2  S3  S4  S5  S6  S7  S8  S9  S10 RSD,%
        R  0.996  0.999  1.000  0.999  0.999  1.000  1.000  0.999  1.000  1.000  1.000  1  0.274  0.357  0.240  0.261  0.242  0.243  0.267  0.252  0.318  0.302 14.014
                                                           2   0.698  0.828  0.616  0.667  0.599  0.633  0.684  0.652  0.755  0.717 10.070
        2.1.9  共有峰指认       根据马甲子总三萜的 HPLC 叠加
                                                           3   0.633  0.667  0.605  0.607  0.605  0.607  0.623  0.620  0.645  0.633  3.275
        指纹图谱生成结果,得到6个共有峰;通过与马甲子素对                          4(S) 1.000  1.000  1.000  1.000  1.000  1.000  1.000  1.000  1.000  1.000  0.000
        照品色谱图(图 2A)进行对比,指认 4 号峰为马甲子素。                      5   0.458  0.479  0.458  0.461  0.460  0.460  0.459  0.461  0.466  0.470  1.449
        因马甲子素色谱峰分离度较好、峰面积较大,故以其为                           6   0.573  0.563  0.579  0.579  0.580  0.578  0.577  0.578  0.570  0.572  0.936
        参照峰(S)计算其余共有峰的相对保留时间和相对峰面                          距离为度量标准进行聚类分析。结果,10批马甲子总三
        积,结果见表3、表4。                                        萜样品可聚为4类,其中S1聚为一类、S2聚为一类、S3~
        2.2  聚类分析                                          S6聚为一类、S7~S10聚为一类,详见图3。
            将 10 批马甲子总三萜粉末样品(编号 S1~S10)指                   2.3 主成分分析
        纹图谱中的6个共有峰峰面积经过标准化处理后,采用                               采用SPSS 26.0 软件对10批马甲子总三萜样品的6
        SPSS 26.0 软件,以组间平均数连接法、平方 Euclideam                个共有峰标准化的峰面积进行主成分分析。结果,共提


        中国药房    2021年第32卷第2期                                               China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 2  ·203 ·
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