Page 81 - 《中国药房》2021年2期
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制备的 10 批马甲子总三萜粉末(编号 S1~S10),按 80
70
“2.1.1”项下方法制备供试品溶液,再按“2.1.3”项下色谱 60
mV 50
条件进样测定,将色谱数据导入《中药色谱指纹图谱相 U, 40 4(S)
30
似度评价系统(2012 版)》,得到马甲子总三萜样品的叠 20
10
加指纹图谱,详见图1。 0
0 10 20 30 40 50
450 2 3 4(S)
1 5 6 t,min
400 R A.对照品溶液
350 S10 80
70
S9 60
300
S8 mV 50
mV 250 S7 U, 40
U, 200 S6 20
30
150 S5 10 0
S4
100 0 10 20 30 40 50
S3
50 S2 t,min
B.空白溶液(甲醇)
0 S1
80
70
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 60
t,min 50 4(S)
图1 10批马甲子总三萜样品的HPLC叠加指纹图谱 mV U, 40 2 3
30
Fig 1 HPLC superimposed fingerprints of 10 batches 20 1 6
10 5
of P. ramosissimus total triterpenes 0
0 10 20 30 40 50
2.1.8 相似度评价 采用《中药色谱指纹图谱相似度评 t,min
价系统(2012版)》对10批马甲子总三萜样品(编号S1~ C.供试品溶液(编号:S11)
S10)的指纹图谱进行相似度评价,采用多点校正方法对 注:4.马甲子素
Note:4. paliurusene
各色谱峰进行全峰匹配,生成马甲子总三萜对照图谱
图2 马甲子总三萜样品的高效液相色谱图
(图 1 中的“R”曲线)。结果,10 批样品相似度均大于
0.990,详见表2。 Fig 2 HPLC chromatograms of P. ramosissimus total
表2 10批马甲子总三萜样品及对照图谱的相似度评价 triterpenes
结果 表3 10批马甲子总三萜样品共有峰的相对保留时间
Tab 2 Results of similarity evaluation of 10 batches of Tab 3 Relative retention time of common peaks of 10
P. ramosissimus total triterpenes and control batches of P. ramosissimus total triterpenes
chromatograms 峰号 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 RSD,%
1 0.644 0.644 0.638 0.638 0.640 0.640 0.640 0.642 0.642 0.641 0.332
编号 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 R
2 0.705 0.705 0.699 0.705 0.701 0.701 0.701 0.703 0.703 0.703 0.293
S1 1.000 0.992 0.995 0.991 0.993 0.996 0.994 0.999 0.998 0.998 0.996
S2 0.992 1.000 1.000 1.000 1.000 0.999 1.000 0.996 0.998 0.998 0.999 3 0.926 0.926 0.920 0.920 0.926 0.926 0.926 0.927 0.927 0.925 0.285
S3 0.995 1.000 1.000 0.999 1.000 1.000 1.000 0.998 0.999 0.999 1.000 4(S) 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 0.000
5 1.116 1.122 1.116 1.116 1.121 1.121 1.121 1.121 1.121 1.117 0.229
S4 0.991 1.000 0.999 1.000 1.000 0.999 1.000 0.995 0.997 0.997 0.999
S5 0.993 1.000 1.000 1.000 1.000 0.999 1.000 0.997 0.998 0.998 0.999 6 1.441 1.441 1.435 1.435 1.439 1.439 1.445 1.442 1.442 1.444 0.233
S6 0.996 0.999 1.000 0.999 0.999 1.000 1.000 0.999 1.000 1.000 1.000 表4 10批马甲子总三萜样品共有峰的相对峰面积
S7 0.994 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 0.998 0.999 0.999 1.000 Tab 4 Relative peak area of common peaks of 10
S8 0.999 0.996 0.998 0.995 0.997 0.999 0.998 1.000 1.000 1.000 0.999 batches of P. ramosissimus total triterpenes
S9 0.998 0.998 0.999 0.997 0.998 1.000 0.999 1.000 1.000 1.000 1.000
S10 0.998 0.998 0.999 0.997 0.998 1.000 0.999 1.000 1.000 1.000 1.000 峰号 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 RSD,%
R 0.996 0.999 1.000 0.999 0.999 1.000 1.000 0.999 1.000 1.000 1.000 1 0.274 0.357 0.240 0.261 0.242 0.243 0.267 0.252 0.318 0.302 14.014
2 0.698 0.828 0.616 0.667 0.599 0.633 0.684 0.652 0.755 0.717 10.070
2.1.9 共有峰指认 根据马甲子总三萜的 HPLC 叠加
3 0.633 0.667 0.605 0.607 0.605 0.607 0.623 0.620 0.645 0.633 3.275
指纹图谱生成结果,得到6个共有峰;通过与马甲子素对 4(S) 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 0.000
照品色谱图(图 2A)进行对比,指认 4 号峰为马甲子素。 5 0.458 0.479 0.458 0.461 0.460 0.460 0.459 0.461 0.466 0.470 1.449
因马甲子素色谱峰分离度较好、峰面积较大,故以其为 6 0.573 0.563 0.579 0.579 0.580 0.578 0.577 0.578 0.570 0.572 0.936
参照峰(S)计算其余共有峰的相对保留时间和相对峰面 距离为度量标准进行聚类分析。结果,10批马甲子总三
积,结果见表3、表4。 萜样品可聚为4类,其中S1聚为一类、S2聚为一类、S3~
2.2 聚类分析 S6聚为一类、S7~S10聚为一类,详见图3。
将 10 批马甲子总三萜粉末样品(编号 S1~S10)指 2.3 主成分分析
纹图谱中的6个共有峰峰面积经过标准化处理后,采用 采用SPSS 26.0 软件对10批马甲子总三萜样品的6
SPSS 26.0 软件,以组间平均数连接法、平方 Euclideam 个共有峰标准化的峰面积进行主成分分析。结果,共提
中国药房 2021年第32卷第2期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 2 ·203 ·