Page 83 - 《中国药房》2021年2期
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并按外标法计算样品含量。结果，马甲子素含量的RSD                          洗脱时，各色谱峰出现时间适宜且峰形对称、分离度好、
        为1.02％（n＝6），表明本方法重复性良好。                            基线漂移小，故选择甲醇-0.05％磷酸水溶液为流动相进
        2.4.7  稳定性试验      取“2.4.1”项下供试品溶液适量，分              行梯度洗脱。此外，本研究采用二极管阵列检测器对不
        别于室温下放置 0、2、4、8、12、24 h时按“2.4.2”项下色谱               同检测波长（210、230、260、290、320、350、380 nm）进行
        条件进样测定，记录峰面积。结果，马甲子素峰面积的                           了考察。结果，当检测波长为320 nm处时，各色谱峰分
        RSD 为 0.31％（n＝6），表明供试品溶液于室温下放置                     离度较好，响应值较高且马甲子素峰在此波长下有较大
        24 h内稳定性良好。                                        吸收，故选择320 nm为检测波长。
        2.4.8  加样回收率试验        取“1.2”项下马甲子总三萜粉                  本研究前期发现，广西桂林全州县白宝镇产马甲子
        末 0.1 g，共 6 份，精密称定，置于 25 mL 量瓶中，加入                 药材中的马甲子素含量相对较高，故以其为样品进行含
       “2.4.4”项下质量浓度为 844 μg/mL 的线性工作溶液 10                 量测定的方法学考察，对另外10批样品进行指纹图谱、
        mL，按“2.4.1”项下方法制备供试品溶液，按“2.4.2”项下                  聚类分析和主成分分析以及定量测定。本研究指纹图
        色谱条件进样测定，记录峰面积并计算加样回收率，结                           谱分析结果显示，10 批马甲子总三萜中有 6 个共有峰，
        果见表9。                                              且相似度均大于0.990。这提示不同来源的马甲子总三
        表9   马甲子总三萜样品中马甲子素的加样回收率试验                         萜样品中的特征峰有较高的一致性。通过与对照品比
             结果（n＝6）                                       对，指认 4 号峰为马甲子素。聚类分析结果显示，10 批
        Tab 9 Results of recovery tests of paliurusene in 10  马甲子总三萜样品可聚为4类，其中S1聚为一类、S2聚
               batches of P. ramosissimus total triterpenes  为一类、S3～S6 聚为一类、S7～S10 聚为一类。主成分
              （n＝6）                                        分 析 结 果 显 示 ，2 个 主 成 分 的 累 积 方 差 贡 献 率 为
        已知含量，g  加入量，mg  测得量，mg  加样回收率，％  平均加样回收率，％  RSD，％  99.430％，可代表马甲子总三萜样品指纹图谱的大部分
        0.63     0.67     1.30    100.00                   信息；其中，重庆潼南柏梓镇、四川德阳罗江县、四川彭
        0.66     0.67     1.32    98.50
        0.60     0.67     1.27    100.00                   州天彭镇等地区产马甲子药材的综合质量较好。10 批
        0.58     0.67     1.25    100.00    99.75   1.13   马甲子总三萜样品中马甲子素的平均含量为0.576％～
        0.62     0.67     1.30    101.50                   0.712％，以重庆潼南柏梓镇产马甲子的马甲子素含量最
        0.63     0.67     1.29    98.50
                                                           高，其他地区药材样品中马甲子素含量有所差异，可能
        2.4.9  样品含量测定       取 10 批同法制备的马甲子总三
                                                                                              [25]
                                                           与不同产地的环境、气候及采收时间有关 。
        萜样品，按“2.4.1”项下方法制备供试品溶液，再按
                                                               综上所述，所建 HPLC 指纹图谱和含量测定方法稳
       “2.4.2”项下色谱条件进样测定（平行测定 3 次），记录峰
                                                           定、可靠，可用于马甲子药材的质量控制。
        面积并按外标法计算样品含量，结果见表10。                              参考文献
        表 10  10 批马甲子总三萜样品的含量测定结果（％％，
                                                           [ 1 ]  国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草：第十三
              n＝3）
                                                                卷[M].上海：上海科学技术出版社，1999：242-245.
        Tab 10  Results of content determination of sample of  [ 2 ]  南京中医药大学.中药大辞典：上册[M].上海：上海科学
                10 batches of P. ramosissimus total triterpenes  技术出版社，2014：364-365.
               （％％，n＝3）                                    [ 3 ]  朱华，张可锋，高雅，等.马甲子的生药学研究[J].广西中
        编号            马甲子素       编号           马甲子素              医药，2008，31（1）：56-57.
        S1             0.712     S6            0.626       [ 4 ]  于磊，张东明.铁篱巴果化学成分的研究[J].中国中药杂
        S2             0.576     S7            0.656            志，2006，31（24）：2049-2052.
        S3             0.650     S8            0.682
        S4             0.603     S9            0.644       [ 5 ]  LEE SS，SU WC，LIU KC，et al. Cyclopenptide alkaloids
        S5             0.650     S10           0.619            from stems of Paliurus ramosissimus[J]. Phytochemistry，
        3 讨论                                                    2001，58（8）：1271-1276.
            本研究前期对 Agilent SB-C18 （150 mm×4.6 mm，2.7       [ 6 ]  陈晨.马甲子化学成分的研究[D].扬州：扬州大学，2016.
                                                           [ 7 ]  王京.马甲子总三萜生物学性质研究[D].成都：成都中医
        μm）、Agilent PheHex（100 mm×4.6 mm，2.7 μm）、Agilent
        PheHex（150 mm×4.6 mm，2.7 μm）等不同色谱柱的分离                   药大学，2018.
                                                           [ 8 ]  白筱璐，周静，胡竟一，等.马甲子对实验性结肠炎的干预
        效果进行了考察。结果，以 Agilent PheHex（100 mm×
                                                                及Th1/Th2漂移相关作用机理研究[J].中药药理与临床，
        4.6 mm，2.7 μm）为色谱柱时的色谱峰峰形、分离度均较                         2019，35（4）：116-119.
        好，出峰数量较多，色谱信息较全面，故选择Agilent Phe-                   [ 9 ]  余悦，周静，陈健，等.马甲子诱导 AGS/人胃腺癌细胞凋
        Hex（100 mm×4.6 mm，2.7 μm）为色谱柱。同时，本课题                    亡的研究[J].中药药理与临床，2019，35（5）：56-60.
        组还比较了乙腈-0.1％磷酸水溶液、甲醇-水、甲醇-0.1％                     [10]  韦国锋，覃道光，黄志文.马甲子镇咳祛痰作用的研究[J].
        磷酸水溶液、甲醇-0.05％磷酸水溶液等流动相的分离效                             数理医药学杂志，1999，20（2）：3-5.
        果。结果，以甲醇-0.05％磷酸水溶液为流动相进行梯度                        [11]  何颖，辜义陆，欧丽兰，等.马甲子叶抗炎有效部位的筛选


        中国药房    2021年第32卷第2期                                               China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 2  ·205 ·
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