Page 80 - 《中国药房》2021年2期
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马甲子为鼠李科植物马甲子属马甲子 Paliurus ra-                             表1 11批马甲子样品信息来源
        mosissimus（Lour.）Poir 的叶，在《中华本草》 和《中药大              Tab 1 Sample source information of 11 batches of
                                             [1]
        辞典》 中均有记载。其性平、味苦，无毒，具有祛风湿、                                 P. ramosissimmus
              [2]
        消肿止痛、解毒等功效，可用于治疗风湿痹痛、跌打损                            编号       产地                 批号          采收时间
                                 [3]
        伤、咽喉肿痛、痈疽溃脓等症 。有文献报道，马甲子主                           S1     重庆潼南柏梓镇             20191001     2019年10月
                                                            S2     广西桂林石塘镇             20190901     2019年9月
        要含有三萜类、黄酮类、环肽生物碱类等成分                    [4－6] ，具有
                                                            S3     四川成都双流东升镇           20190902     2019年9月
        抗肿瘤、抗炎、抗溃疡、镇咳祛痰等作用                [7－10] 。韦国锋等      S4     四川成都双流公兴镇           20191002     2019年10月
        [10] 研究发现，马甲子乙醇提取物的止咳祛痰效果优于马                        S5     四川成都新津花桥镇           20190903     2019年9月
                           [11]
        甲子水提物。何颖等 发现，马甲子叶醇提物的正丁醇                            S6     四川成都新津牧马镇           20190904     2019年9月
                                                            S7     四川成都温江柳城镇           20190801     2019年8月
        部位能显著降低角叉胶致胸膜炎模型大鼠体内的丙二
                                                            S8     四川彭州天彭镇             20190905     2019年9月
        醛（MDA）、前 列 腺 素 E2（PGE2 ）、肿 瘤 坏 死 因 子 α              S9     四川德阳罗江县万安镇          20191003     2019年10月
        （TNF-α）、白细胞介素 1β（IL-1β）水平，具有明显的抗炎                   S10    四川德阳广汉三水镇           20190701     2019年7月
        作用。本课题组前期对马甲子总三萜类化合物纯化工                             S11    广西桂林全州县白宝镇          20190802     2018年8月
        艺以及生物活性研究的结果显示，其植株中所含的五环                            得率为 0.60％）。取上述马甲子总三萜粉末 0.1 g，精密
        三萜类衍生物群是该药产生体外抗肿瘤活性的关键化                             称定，置于 25 mL 量瓶中，加甲醇定容，称定质量，超声
        合物，因此对马甲子总三萜化合物进行质量检测是保证                           （功率 250 W，频率 50 kHz）处理 10 min，冷却至室温，再
        其药理活性的关键         [12－15] 。目前，关于马甲子的研究多集             次称定质量，用甲醇补足减失的质量，定容，摇匀，滤过，
        中在新剂型      [16－18] 、药理作用 [8－11] 以及农业园艺  [19－22] 等方  取续滤液，即得。
        面，有关其化学成分的研究相对较少；此外，目前尚无马                           2.1.2  对照品溶液的制备         取马甲子素对照品适量，精
        甲子总三萜的质量标准，且该药材尚未被 2020 版《中国                        密称定，加甲醇制成质量浓度为0.8 mg/mL的对照品溶
        药典》或相关药品标准收录。基于此，本研究采用高效                            液，置于4 ℃冰箱中避光密封保存，备用。
        液相色谱法（HPLC）建立了马甲子总三萜的指纹图谱，                          2.1.3  色谱条件     以 Agilent PheHex（100 mm×4.6 mm，
        并进行聚类分析和主成分分析；同时检测其主要成分马                            2.7 μm）为色谱柱；以甲醇（A）-0.05％磷酸水溶液（B）为
              [7]
        甲子素 的含量，旨在为其质量控制提供参考。                               流动相，梯度洗脱（0～30 min，0→74％A；30～50 min，
        1 材料                                                74％A→100％A）；检测波长为320 nm；流速为1 mL/min；
        1.1  仪器                                             柱温为30 ℃；进样量为5 μL。
            分析所用仪器为：Agilent 1260 型 HPLC 仪（包括二               2.1.4  精密度试验 取“2.1.1”项下供试品溶液（编号S1）
        极管阵列检测器、二元泵、自动进样器及配套液相色谱工                           适量，按“2.1.3”项下色谱条件连续进样测定6次，记录峰
        作站，美国Agilent公司）、XS205 DualRange型分析天平                面积。以马甲子素峰为参照（S），计算各共有峰的相对保
        （瑞士Mettler Toledo公司）、RE-52AA型旋转蒸发器（上                留时间和相对峰面积。结果，6个共有峰相对保留时间的
        海亚荣生化仪器厂）、DZF-6050型真空干燥箱（上海精宏                       RSD 为 0.056％～0.108％（n＝6），相对峰面积的 RSD 为
        实验设备有限公司）、SB5200D型超声波清洗机（宁波新                        0.089％～2.308％（n＝6），表明本方法精密度良好。
        芝生物科技股份有限公司）、玻璃层析柱（成都市凌云玻璃                          2.1.5  稳定性试验       取“2.1.1”项下供试品溶液（编号
        仪器厂，规格3.3 cm×60 cm）、AB-8型大孔吸附树脂（粒径                  S1）适量，分别于室温下避光放置 0、2、4、8、12、24 h时按
        300～1 250 mm，沧州宝恩吸附材料科技有限公司）等。                     “2.1.3”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。以马甲子
        1.2  药品与试剂                                          素峰为参照（S），计算各共有峰的相对保留时间和相对
            所用药品与试剂为：马甲子素对照品（成都普思生                          峰面积。结果，6 个共有峰相对保留时间的 RSD 为
        物科技股份有限公司，批号 20150801，纯度≥98％）、马                     0.037％～0.184％（n＝6），相对峰面积的RSD为0.066％～
        甲子总三萜粉末（由 S11 马甲子药材按前期研究方法                    [15]  2.330％（n＝6），表明供试品溶液于室温下避光放置24 h
        制得，得率为0.60％，马甲子素含量为1.269 2％，用于含                     内稳定性良好。
        量测定方法学考察）等；甲醇为色谱纯，磷酸为分析纯，                           2.1.6  重复性试验       取同法制备的马甲子总三萜粉末
        水为纯净水。                                             （编号S1）0.1 g，共6份，精密称定，按“2.1.1”项下方法制
            11批马甲子药材（编号S1～S11），经四川省中医药科                     备供试品溶液，再按“2.1.3”项下色谱条件进样测定，记
        学院舒光明研究员鉴定为鼠李科马甲子属马甲子P. ra-                         录峰面积。以马甲子素峰为参照（S），计算各共有峰的
        mosissimus（Lour.）Poir的鲜叶。样品信息来源见表1。                 相对保留时间和相对峰面积。结果，6 个共有峰相对保
        2 方法与结果                                             留时间的 RSD 为 0.089％～0.223％（n＝6），相对峰面积
        2.1  马甲子总三萜HPLC指纹图谱的建立                              的 RSD 为 0.078％～2.381％（n＝6），表明本方法重复性
        2.1.1  供试品溶液的制备           取 10 批药材（编号 S1～           良好。
        S10），按前期研究方法 制得马甲子总三萜粉末（平均                          2.1.7  马甲子总三萜 HPLC 指纹图谱的建立               取同法
                            [15]

        ·202 ·  China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 2                                    中国药房    2021年第32卷第2期
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