Page 40 - 《中国药房》2020年22期
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DMAP 0.1 g（约0.82 mmol），再加入含有小分子γ-聚谷氨                25 ℃下，使用FT-IR光谱仪检测400～4 000 cm 波数范
                                                                                                    －1
        酸 1.24 g（约 9.37 mmol）的 DMSO 180 mL，置于集热式            围内的 FT-IR 光谱，结果见图 3（γ-聚谷氨酸在此范围内
        磁力搅拌器中，于 40 ℃下搅拌反应。利用蛇葡萄素与                          无最大吸收，图略）。
        三氯化铁溶液反应显紫色，采用薄层色谱（TLC）监测酯
                                                               80
        化反应过程。反应进行24 h时，TLC显示原料蛇葡萄素
                                                               70
        点消失，停止反应。然后在反应液中加入10倍体积的无                              60
        水乙醚，洗涤、振荡，4 ℃下静置过夜待溶液分为两层。                             50
                                                              ％
        收集下层浅黄色溶液，冷冻干燥后，即得黄色粉状合成                              透光 率，  40
        产物γ-PGA-AMP 1.02 g，产率为55.7％。                           30
        2.3 表征                                                 20
        2.3.1  紫外光谱检测       取合成产物γ-PGA-AMP、蛇葡萄                 10
        素原料药各 0.005 g，分别用 DMSO 1 mL 溶解，在 200～                   0
                                                                4 000  3 500  3 000  2 500  2 000  1 500  1 000  500
        800 nm波长范围内进行紫外光谱扫描，结果见图2（γ-聚                                             波数，cm －1
        谷氨酸在此范围内无最大吸收，图略）。                                                      A. γ-PGA-AMP

               1.000                                            40
                          293.66
                                                                35
                                                                30
                                                               ％  25
             吸光度  0.500                                        透光 率，  20
                                                                15
                                                                10
                                                                5
                                                                0
                 0
              －0.050                                            4 000      3 000      2 000       1 000
                205.5      300.0       400.0      494.4                           波数，cm －1
                                波长，nm
                               A. γ-PGA-AMP                                       B.蛇葡萄素
                                                             图3   γ-PGA-AMP和蛇葡萄素的FT-IR光谱图（KBr）
               1.000
                                                            Fig 3 FT-IR spectra of γ-PGA-AMP and ampelopsin
                                                                 （KBr）

                                                                由合成产物γ-PGA-AMP 的 FT-IR 光谱图（图 3A）可
              吸光度  0.500       291.77                       见，酯键上的碳氧单键σC-O：1 090、1 249 cm ；酯键的羰
                                                                                                 －1
                                                                          －1
                                                                                                     －1
                                                            基σ C＝O：1 728 cm ；羧酸的羰基σ C＝O：1 646 cm ；亚甲
                                                            基σ C-H：2 921 cm ；芳环σ Ar-H：955 cm ，δ Ar-H：1 352、1 315
                                                                                           －1
                                                                          －1
                         256.32                               －1
                 0                                          cm （σ：伸缩震动；δ：面内弯曲震动）。对比蛇葡萄素的
                 200.0           300.0           400.0      FT-IR 光谱图（图 3B），3 630 cm 处蛇葡萄素游离羟基
                                                                                       －1
                                波长，nm
                                                                                     －1
                               B.蛇葡萄素                       的吸收峰已经消失，1 650 cm 处的羰基吸收峰由于取
             图2   γ-PGA-AMP和蛇葡萄素的紫外光谱图                      代基团的改变位移至1 646 cm 。这提示蛇葡萄素上的
                                                                                      －1
           Fig 2 UV spectra of γ-PGA-AMP and ampelopsin     游离羟基与γ-聚谷氨酸上的羧基可能已发生了酯化
            由图2可见，γ-PGA-AMP苯环上的最大吸收峰位于                      反应。
        293.66 nm波长处；与蛇葡萄素相比，苯环上最大吸收峰                       2.3.3  1 H-NMR 分析   以 DMSO 为溶剂、四甲基硅烷
        红移约 2 nm。这可能是由于蛇葡萄素的 7 位羟基与聚                       （TMS）作 为 内 标 ，使 用 NMR 仪 分 析 合 成 产 物
        谷氨酸 a 位碳上的羧基发生酯化反应，聚谷氨酸酯基团                          γ-PGA-AMP 和蛇葡萄素原料药的波谱信息，结果见
        的吸电子能力略强于羟基基团，降低了分子内电子跃迁                            图4。
                                                                              1
        的能级差，使分子紫外吸收发生了红移                    [14-15] 。另外，       与 蛇 葡 萄 素 的 H-NMR 图 谱      [16]  比 较 ，合 成 产 物
        γ-PGA-AMP 紫外光谱中 200～270 nm 波长范围内有多                  γ-PGA-AMP 的 H-NMR 图谱（图 4A）中，2，3，2′，3′，4′，
                                                                         1
        个γ-聚谷氨酸羧基双键的吸收峰。这可能与γ-聚谷氨酸                          5′，6′位的氢信号峰基本不变，蛇葡萄素7位羟基氢信号
        结构中处于分子链末端和分子链内部的羰基基团的吸                             峰（10.7 ppm）消失，4.90 ppm 处出现了酯键邻位叔碳上
        收波长略有差异有关。                                          的氢信号峰；另外，4.12 ppm，1.97、1.73 ppm，2.18 ppm处
        2.3.2 FT-IR 检测    取合成产物γ-PGA-AMP、蛇葡萄素               的信号峰分别归属于聚谷氨酸部分 a、b、c 位碳上的氢
        原料药各适量，分别与少量 KBr 混匀后压片，于 20～                       （详见图 1），8.09 ppm 处的信号峰归属于仲氨上的氢，


        ·2722 ·  China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 22                                 中国药房    2020年第31卷第22期
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