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indexes(MDA,CAT,SOD)in rats were determined by ELISA. RESULTS:The linear range of genkwanin were 0.147-27.360 μg
(r=0.999 9); RSDs of precision, reproducibility and stability tests were all lower than 3% ; average recoveries were
98.64%-98.92%(RSD<1%,n=3). Before and after processing with“sweat soaking method”,average contents of genkwanin in
W. indica were 0.377 6 and 0.234 0 mg/g. Compared with blank group,the serum content of SOD in raw-product group was
increased significantly,while CAT content was decreased significantly(P<0.05 or P<0.01);the serum content of MDA was
decreased significantly in processed-product group,while SOD content was increased significantly(P<0.05 or P<0.01). MDA
content of processed-product group was significantly lower than that of raw-product group,while SOD content was significantly
higher than raw-product group (P<0.05). CONCLUSIONS:After processing with“sweat soaking method”,the content of
genkwanin in W. indica is decreased,and antioxidant activity is increased.“Sweat soaking method”processes certain function of
“reducing toxicity and increasing efficiency”.
KEYWORDS Wikstroemia indica;Sweat soaking method;Genkwanin;Content;Anti-oxidation ability;Reducing toxicity and
increasing efficiency
了哥王 Wikstroemia indica(L.)C. A. Mey 为瑞香科 型高速冷冻离心机(德国Hettich公司);VX-Ⅲ型多管涡
荛花属植物南岭荛花的干燥根或根皮,始载于《岭南采 旋振荡器(北京踏锦科技有限公司)。
药录》,性寒,味苦、辛,有大毒,归肺、肝经,具有清热解 1.2 药品与试剂
毒、消肿散结、止痛等功效 [1-2] ,临床上主要用于治疗肝 了哥王药材(产地:广西玉林,批号:20160115)购自
炎、支气管炎、扁桃体炎、肢体疼痛等,同时还可用于治 广西壮族自治区玉林市玉林银丰国际中药港,经贵州中
疗肝癌、乳腺癌、肺癌及其他体表癌等 [3-6] 。目前,从了哥 医药大学药学院李玮教授鉴定为瑞香科荛花属植物南
王中分离得到的化合物主要包括香豆素类 [7-8] 、木脂素 岭荛花W. indica(L.)C. A. Mey.的根或根皮。
[12]
类 、黄酮类 [5,10-11] 、蒽醌类 、萜类等;其中,芫花素属于 芫花素对照品(北京坛墨质检科技有限公司,批号:
[9]
[13]
黄酮类化合物,具有一定的抗氧化作用 。细胞试验初 111899-201202,纯度:≥98.0%);丙二醛(MDA)试剂盒
[14]
步证实,了哥王也具有抗氧化活性 ,芫花素可能是其 (批号:20160515)、过氧化氢酶(CAT)试剂盒(批号:
抗氧化活性成分之一。然而,芫花素也是该药的毒性成 20160515)、超 氧 化 物 歧 化 酶(SOD)试 剂 盒(批 号 :
[15]
分之一,存在于了哥王毒性部位乙酸乙酯部位 ,有研 20160515)均购自南京建成生物工程研究所;戊巴比妥
究表明该化合物具有可遗传毒性 [16-18] 。苗族群众通常采 钠(美国 Sigma 公司,批号:922L0310);甲醇为色谱纯,
用“汗渍法”炮制了哥王以降低其毒性。本课题组前期 其余试剂均为分析纯,水为蒸馏水。
[19]
对“汗渍法”进行了深入研究,优选出最佳炮制工艺 ; 1.3 动物
[3]
同时,对了哥王炮制前后的毒理学 [20-21] 和抗炎作用 进行 SPF 级 SD 大鼠,雌雄各半,体质量(200±20)g,购
了比较,发现“汗渍法”具有“减毒增效”作用。考虑到芫 自湖南长沙市天勤生物技术有限公司,动物生产许可证
花素既是了哥王的毒性成分又是活性成分,含有芫花素 号:SCXK(湘)2014-0011。所有大鼠均饲养于 12 h 光
[22]
的毒性中药大多采用醋制法炮制以降低该成分含量 ,而 照、12 h避光交替,室内温度(25±1)℃、相对湿度(50±
关于“汗渍法”炮制对了哥王药材中芫花素含量的影响 10)%的环境中,并给予标准饲料和饮用水。
尚未见报道。基于此,本研究采用高效液相色谱法 2 方法与结果
(HPLC)测定“汗渍法”炮制前后了哥王乙醇提取物中芫 2.1 了哥王生品及“汗渍法”炮制品乙醇提取物的制备
花素的含量,并进行抗氧化作用比较,拟基于“量-效-毒” 参照本课题组前期研究方法 制备了哥王生品和
[23]
关系进一步考察“汗渍法”炮制的“减毒增效”作用,为了 “汗渍法”炮制品(以下简称“炮制品”)的乙醇提取物(批
哥王的炮制方法、质量控制研究和临床应用提供参考。 号分别为YC20180420、PZ20180430),每100 g醇提物均
1 材料 相当于生药992 g。
1.1 仪器 2.2 “汗渍法”炮制前后了哥王中芫花素的含量变化
1260 Infinity Ⅱ型液相色谱系统(美国 Agilent 公 2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取芫花素对照品
司);AUW220D型电子天平(日本Shimadzu公司);800Y 18.4 mg,置于50 mL量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,
型粉碎机(浙江大鹏机械有限公司);自动渗漏管(180 制成质量浓度为 0.368 mg/mL 的对照品溶液,于 4 ℃下
mm×1 000 mm,北京仪器厂);RE-52AA 型旋转蒸发仪 保存,备用。
(上海亚荣生化仪器厂);DZF-6020型减压真干燥箱(上 2.2.2 供试品溶液的制备 分别称取了哥王生品乙醇
海博迅实业有限公司医疗设备厂);C21-SDHCB47型电 提取物和炮制品乙醇提取物适量,粉碎,取粉末各0.5 g,
磁炉(浙江苏泊尔股份有限公司);HH-S4 型水浴锅(北 置于具塞三角烧瓶中,加80%甲醇30 mL,称定质量;密
京科伟永兴仪器有限公司);Thermo Multiskan FC 型酶 塞,超声(功率:150 W,频率:40 kHz)提取 30 min,冷却
标仪(美国Thermo Fisher Scientific公司);MIKRO 220R 至室温,再次称定质量,用80%乙醇补足减失的质量,滤
中国药房 2020年第31卷第19期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 19 ·2321 ·