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5.0％（n＝2），表明本方法的耐用性较好。耐用性试验结 表4 耐用性试验结果（n＝2，mg/g）
果见表4。 Tab 4 Results of durability tests（n＝2，mg/g）
表3 加样回收率试验结果（n＝6） 去氢土 3-表去氢 3-O-乙酰基-16α- 去氢茯 松苓
考察项目 猪苓酸C 茯苓酸
Tab 3 Results of recovery tests（n＝6） 莫酸 土莫酸 羟基-氢化松苓酸 苓酸 新酸
色谱柱
称样量， 样品中含 加入量， 测得量， 加样回收 平均加样回 RSD， Thermo Acclaim 120 C18 0.274 0 0.176 6 0.126 5 0.199 0 0.221 0 0.643 5 0.122 3
待测成分
g 量，mg mg mg 率，％ 收率，％ ％
Speax GP-C18 0.279 4 0.179 3 0.119 3 0.206 1 0.225 4 0.642 5 0.124 0
去氢土莫酸 1.000 2 0.274 0 0.282 5 0.565 7 103.26 104.04 0.56
Agela Venusil C18 0.280 0 0.177 2 0.118 2 0.203 6 0.223 2 0.639 3 0.123 2
1.000 5 0.274 0 0.282 5 0.566 4 103.50 RSD，％ 1.19 0.78 3.70 1.77 0.98 0.34 0.68
1.000 4 0.274 0 0.282 5 0.568 1 104.11 柱温
1.000 5 0.274 0 0.282 5 0.568 4 104.21 30 ℃ 0.274 0 0.176 6 0.126 5 0.199 0 0.221 0 0.643 5 0.122 3
1.000 3 0.274 0 0.282 5 0.570 2 104.85 35 ℃ 0.275 4 0.174 5 0.121 8 0.201 1 0.222 3 0.644 5 0.122 3
1.000 4 0.274 0 0.282 5 0.568 7 104.32 RSD，％ 0.37 0.85 2.71 0.73 0.42 0.11 0.01
猪苓酸C 1.000 2 0.176 6 0.162 4 0.338 6 99.75 96.74 1.55
1.000 5 0.176 6 0.162 4 0.332 6 96.06 有 31 批样品满足要求，占样品量的 86.1％；若以样品数
1.000 4 0.176 6 0.162 4 0.333 4 96.55 的90％合格计，则总含量为1.304 3 mg/g，共有32个样品
1.000 5 0.176 6 0.162 4 0.332 4 95.94 满足要求。以上结果说明，各产区茯苓中7种成分含量
1.000 3 0.176 6 0.162 4 0.332 8 96.18
1.000 4 0.176 6 0.162 4 0.332 4 95.94 测定值相对集中，比较稳定，总体差异不明显。
3-表去氢土莫酸 1.000 2 0.126 5 0.118 7 0.248 1 102.44 102.71 0.75 2.5 聚类分析
1.000 5 0.126 5 0.118 7 0.247 4 101.85 将 36 批茯苓样品中 7 种三萜类成分的含量测定结
1.000 4 0.126 5 0.118 7 0.250 1 104.13
1.000 5 0.126 5 0.118 7 0.248 5 102.78 果导入 SPSS 21.0 软件中，采用聚类分析法结合平均欧
1.000 3 0.126 5 0.118 7 0.248 0 102.36 氏距离（d）进行分析，生成 36 批不同产地茯苓中三萜类
1.000 4 0.126 5 0.118 7 0.248 4 102.70 成分含量的聚类分析树状图，详见图2。以d＝14划分，
3-O-乙酰基-16α-羟基- 1.000 2 0.199 0 0.204 1 0.401 7 99.31 99.93 0.54
氢化松苓酸 1.000 5 0.199 0 0.204 1 0.401 6 99.27 36批样品共聚为5类：样品S27单独聚为第Ⅰ类，来自湖
1.000 4 0.199 0 0.204 1 0.403 2 100.05 北英山；样品 S30、S34 聚为第Ⅱ类，分别来自湖北英山
1.000 5 0.199 0 0.204 1 0.403 4 100.15 （代料栽培品）和云南普洱；样品S2、S8、S9聚为第Ⅲ类，
1.000 3 0.199 0 0.204 1 0.404 5 100.69
1.000 4 0.199 0 0.204 1 0.403 3 100.10 分别来自云南永仁县孟虎乡（S2）、贵州凯里市碧浪镇
去氢茯苓酸 1.000 2 0.221 0 0.245 0 0.469 9 101.59 102.39 0.57 （S8、S9）；样品S10、S11、S12、S14聚为第Ⅳ类，分别来自
1.000 5 0.221 0 0.245 0 0.470 7 101.92 云南永仁县孟虎乡（S10）、贵州铜仁市德江县（S11、
1.000 4 0.221 0 0.245 0 0.472 1 102.49
1.000 5 0.221 0 0.245 0 0.471 8 102.37 S12）、安徽安庆市岳西县（S14）；其余 26 批样品聚为第
1.000 3 0.221 0 0.245 0 0.473 9 103.22 Ⅴ类，均来自湖北、云南广西等多个产地。其中，第Ⅰ类
1.000 4 0.221 0 0.245 0 0.472 8 102.78 样品中各个成分的含量均相对较高，第Ⅰ～Ⅲ类样品中
茯苓酸 1.000 2 0.643 5 0.676 5 1.332 3 101.82 102.10 1.31
1.000 5 0.643 5 0.676 5 1.334 9 102.20 7 种成分总含量均大于 2.00 mg/g，第Ⅳ类样品中各成分
1.000 4 0.643 5 0.676 5 1.338 6 102.75 含量均较低，第Ⅴ类样品中总含量在1.47～2.18 mg/g之
1.000 5 0.643 5 0.676 5 1.339 8 102.93 间。由此可知，仅湖北、云南、贵州地区部分茯苓药材中
1.000 3 0.643 5 0.676 5 1.342 5 103.33
1.000 4 0.643 5 0.676 5 1.317 3 99.60 7 种成分含量相对较高，且 26 批来自湖北、云南、广西、
松苓新酸 1.000 2 0.122 3 0.116 4 0.241 0 101.98 102.86 1.26 安徽等地的样品均聚为一大类，表明大部分产区产出的
1.000 5 0.122 3 0.116 4 0.240 6 101.63 茯苓药材含量均一、质量稳定，仅少量存在差异。
1.000 4 0.122 3 0.116 4 0.244 7 105.15
1.000 5 0.122 3 0.116 4 0.242 5 103.26 3 讨论
1.000 3 0.122 3 0.116 4 0.241 1 102.06 3.1 供试品提取时间和色谱条件的筛选
1.000 4 0.122 3 0.116 4 0.242 3 103.09
在前期研究中，本课题组考察了供试品超声提取时
2.4 样品含量测定 间（15、20、30、40 min）对提取效果的影响。结果显示，以
取36批不同产地茯苓药材粉末，分别按“2.2.2”项下 甲醇为提取溶剂超声提取30 min后，样品中7种三萜类
方法制备供试品溶液，然后按“2.1”项下色谱条件进行测 成分的含量最高。在波长的选择上，本课题组根据7种
定，记录峰面积，以外标法计算样品中7种成分的含量， 待测成分的吸收波长特点 [13-14] ，分别考察了在 210、240
结果见表5。 nm 波长下的检测效果。结果发现，在 210 nm 波长下 7
结果显示，36批茯苓样品中7种三萜类成分的总含 种三萜类成分均有最大吸收，在240 nm波长下茯苓酸无
量在 0.887 7～2.519 0 mg/g 之间，多数样品中总含量分 吸收，故最终选择 210 nm 为测定波长。在流动相选择
布在1.3～1.9 mg/g范围内。若以7个成分总含量的平均 上，本课题组分别考察了乙腈-磷酸水溶液、乙腈-甲酸水
值（1.740 1 mg/g）下浮 20％计，含量为 1.392 1 mg/g，共 溶液的分离效果。结果发现，以乙腈-0.05％磷酸水溶液

·2104 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 17 中国药房 2020年第31卷第17期