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味甘、淡,性平,具有健脾补中、养心安神、利水渗湿的功 100%A);流速:1 mL/min,柱温:30 ℃;检测波长:210
效,主要用于水肿尿少、痰饮眩悸、脾虚食少、便溏泄泻、 nm;进样量:20 μL。
心神不安、惊悸失眠等症 [1-2] 。茯苓中主要有效成分为多 表1 36批茯苓样品信息
糖类和三萜类 。在三萜类化合物中,去氢土莫酸、猪苓 Tab 1 Information of 36 batches of P. cocos
[3]
酸 C、3-表去氢土莫酸、3-O-乙酰基-16α-羟基-氢化松苓 编号 产地 批号
S1 云南永仁县猛虎乡Ⅰ 201711
酸、去氢茯苓酸、茯苓酸、松苓新酸含量较高,且具有抗
S2 云南永仁县猛虎乡Ⅱ 201811
癌、利尿、神经伸展促进、免疫抑制、抗炎等药理活性 [4-6] 。 S3 湖北罗田县九资河镇 201711
目前,茯苓中三萜类成分的含量测定方法有比色法 S4 湖北恩施州利川市 201803
S5 云南保山市腾冲县团田乡 201711
和高效液相色谱(HPLC)法,但由于比色法的自身局限
S6 云南普洱市宁洱镇Ⅰ 201807
性,所以更多的是采用 HPLC 法进行测定。以往采用 S7 云南普洱市宁洱镇Ⅱ(阴干) 201807
HPLC 法进行多成分测定的研究中,一般是考虑茯苓中 S8 贵州凯里市碧浪镇Ⅰ 201807
S9 贵州凯里市碧浪镇Ⅱ(阴干) 201807
含量较高或易得的三萜类成分,最多的测了6种三萜类 S10 云南永仁县猛虎乡Ⅲ(阴干) 201811
[12]
成分 [7-11] 。近期,田双双等 同时测定了茯苓中 10 种三 S11 贵州铜仁市德江县Ⅰ 201808
萜类成分的含量,其中平均含量大于万分之一的仅有 5 S12 贵州铜仁市德江县Ⅱ 201808
S13 湖北黄冈市麻城市 201709
种。本研究以不同产地(湖北、安徽、云南、贵州等)的茯 S14 安徽安庆市岳西县 201711
苓为样品,采用 HPLC法同时测定其中含量大于万分之 S15 云南楚雄市大地基乡 201804
S16 云南大理永平县 201711
一且具有显著药理活性的7种三萜类化学成分(去氢土
S17 云南丽江永胜镇 201804
莫酸、猪苓酸C、3-表去氢土莫酸、3-O-乙酰基-16α-羟基- S18 云南景谷傣族自治县 201804
氢化松苓酸、去氢茯苓酸、茯苓酸、松苓新酸)的含量,并 S19 云南保山腾冲市 201804
S20 广西云林市岑溪镇 201807
比较不同产地茯苓药材中上述成分的差异性,为茯苓药
S21 湖北罗田九资河镇Ⅰ(打引巴) 201811
材的质量控制提供参考。 S22 湖北英山县石头咀镇 201811
1 材料 S23 湖北英山雷家店镇Ⅰ(打引巴) 201811
S24 湖北罗田九资河镇Ⅱ(未打引巴) 201811
1.1 仪器 S25 湖北麻城木子店镇 201811
U3000 型 HPLC 仪[戴安(上海)分析仪器有限公 S26 湖北英山雷家店镇Ⅱ(未打引巴) 201811
司];Chromeleon 色谱工作站、FA604C 型万分之一分析 S27 湖北英山石头咀元量村 201811
S28 湖北麻城木子店镇双冲村 201811
天平(美国OHAUS公司);DV215CD型十万分之一分析 S29 湖北罗田九资河罗家畈村 201811
天平(瑞士 Pricisa 公司);JP-04OST 型超声提取机(昆山 S30 湖北英山石头咀镇(代料栽培品) 201810
S31 湖北英山吉利公司种植基地 201811
市超声仪器厂)。
S32 安徽岳西白幅镇 201812
1.2 药品与试剂 S33 云南楚雄双柏县 201812
36 批茯苓药材分别采自湖北、云南、安徽、贵州等 S34 云南普洱孟连县 201812
S35 云南保山市腾冲县(未打引巴) 201812
地,经湖北省中医院/湖北省中医药研究院药事部陈树和
S36 云南保山市腾冲县(打引巴) 201812
主任药师鉴定均为多孔菌科真菌茯苓[P. cocos(Schw.)
2.2 溶液的制备
Wolf]的干燥菌核;去氢土莫酸、猪苓酸C、3-表去氢土莫
2.2.1 混合对照品溶液的制备 精密称取一定量的去
酸、3-O-乙酰基-16α-羟基-氢化松苓酸、去氢茯苓酸、茯
氢土莫酸、猪苓酸 C、3-表去氢土莫酸、3-O-乙酰基-16α-
苓酸、松苓新酸对照品均为本实验室自制(批号均为
羟基-氢化松苓酸、去氢茯苓酸、茯苓酸、松苓新酸对照
20191021),经峰面积归一化法计算得上述对照品的质
品,分别置于不同25 mL量瓶中,用甲醇溶解并定容,制
量分数均大于 98%;甲醇、乙腈为色谱纯,磷酸为分析
备各单一对照品母液。分别取一定量的各对照品母液
纯,水为超纯水。36批茯苓样品信息详见表1(注:表中
置于同一 10 mL 量瓶中,加甲醇稀释制成去氢土莫酸、
“打引巴”为茯苓在覆土下窖栽培时加一块鲜菌核于段 猪苓酸 C、3-表去氢土莫酸、3-O-乙酰基-16α-羟基-氢化
木上,起到了菌丝诱引生长作用,也称肉引栽培)。 松苓酸、去氢茯苓酸、茯苓酸、松苓新酸质量浓度分别为
2 方法与结果 0.040 4、0.040 6、0.029 7、0.014 6、0.020 4、0.126 8、0.019 4
2.1 色谱条件 mg/mL的混合对照品溶液。
色谱柱:Thermo Acclaim 120 C18 (250 mm×4.6 mm, 2.2.2 供试品溶液的制备 精密称取茯苓细粉(过 80
5 μm);流动相:乙腈(A)-0.05%磷酸水(B),梯度洗脱 目,下同)2 g,置于50 mL锥形瓶中,加入甲醇10 mL,称
(0~7 min,65%A;7~25 min,68%A;25~27 min,70% 定质量,摇匀,超声(频率:40 kHz,功率:500 W)提取 30
A;27~45 min,76%A;45~56 min,80%A;56~62 min, min,静置15 min后再次称定质量,用甲醇补足减失的质
·2102 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 17 中国药房 2020年第31卷第17期