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见图3，对蛋白表达水平的影响见表5。
p-AKT （Thr308） （56 kDa）
表 3 不同条件下 NRK-52E 细胞中 PPARγ、PTEN、
AKT1（56 kDa）
α-SMA、E-cadherin和 p-AKT （Thr308） 蛋白表达水平
α-SMA（42 kDa）
的动态变化（x±±s，n＝6）
Tab 3 Dynamic changes of protein expression of E-cadherin（88 kDa）
PPAR γ ，PTEN，α-SMA，E-cadherin and PTEN（54 kDa）
p-AKT （Thr308） in NRK-52E cells under different PPARγ（53 kDa）
conditions（x±±s，n＝6）
β-actin（42 kDa）
培养时 PPARγ/ PTEN/ α-SMA/ E-cadherin/ p-AKT （Thr308） /
组别 对照组 高糖组 PIO干预组 GW9662干预组
间，h β-actin β-actin β-actin β-actin AKT1
对照组 6 1.21±0.04 1.24±0.05 0.16±0.06 1.80±0.05 0.13±0.05 图 3 PIO 和 GW9662 对高糖条件下 NRK-52E 细胞中
12 1.22±0.03 1.21±0.06 0.17±0.10 1.73±0.06 0.13±0.06 PPARγ、PTEN、E-cadherin、α-SMA、p-AKT （Thr308）
24 1.18±0.08 1.20±0.05 0.15±0.10 1.80±0.06 0.11±0.06 蛋白表达影响的电泳图
48 1.23±0.06 1.20±0.06 0.16±0.11 1.78±0.07 0.12±0.07 Fig 3 Electropherograms of effects of PIO and
高糖组 6 1.13±0.03 1.10±0.04 ＊ 0.86±0.04 ＊ 1.34±0.06 ＊ 0.35±0.07 ＊
12 0.91±0.05 ＊ 0.99±0.02 ＊ 1.19±0.08 ＊ 0.95±0.04 ＊ 0.60±0.03 ＊ GW9662 on protein expression of PPAR γ ，
24 0.36±0.06 ＊ 0.45±0.03 ＊ 1.65±0.09 ＊ 0.54±0.05 ＊ 1.03±0.04 ＊ PTEN，E-cadherin，α-SMA and p-AKT （Thr308）
48 0.19±0.04 ＊ 0.16±0.03 ＊ 2.27±0.06 ＊ 0.09±0.03 ＊ 1.54±0.07 ＊ in NRK-52E cells under high-glucose condition
PIO干预组 6 1.15±0.04 1.22±0.05 0.48±0.08 ＊# 1.64±0.08 # 0.23±0.07
12 1.09±0.03 ＊# 1.12±0.05 # 0.67±0.09 ＊# 1.42±0.04 ＊# 0.30±0.04 ＊# 表 5 PIO 和 GW9662 对高糖条件下 NRK-52E 细胞中
24 0.57±0.03 ＊# 0.68±0.06 ＊# 0.65±0.11 ＊# 1.36±0.06 ＊# 0.61±0.08 ＊# PPARγ、PTEN、α-SMA、E-cadherin、p-AKT （Thr308 ）
48 0.45±0.06 ＊# 0.54±0.04 ＊# 0.98±0.11 ＊# 0.52±0.04 ＊# 0.96±0.08 ＊#
蛋白表达的影响（x±±s，n＝6）
＊
注：与对照组相同时间点比较，P＜0.05；与高糖组相同时间点比 Tab 5 Effects of PIO and GW9662 on protein expres-
#
较，P＜0.05
sion of PPAR γ ，PTEN，α-SMA，E-cadherin
＊
Note：vs. control group at the same time point， P＜0.05；vs. high-
glucose group at the same time point，P＜0.05 and p-AKT （Thr308） in NRK-52E cells under
#
表 4 PIO 和 GW9662 对高糖条件下 NRK-52E 细胞中 high-glucose condition（x±±s，n＝6）
PPARγ、PTEN mRNA 表达水平的影响（x±±s， 组别 PPARγ/β-actin PTEN/β-actin α-SMA/β-actin E-cadherin/β-actin p-AKT （Thr308） /AKT1
n＝6） 对照组 0.76±0.05 0.98±0.04 0.16±0.04 1.41±0.08 0.16±0.08
高糖组 0.14±0.02 ＊ 0.14±0.05 ＊ 1.78±0.09 ＊ 0.19±0.08 ＊ 1.73±0.13 ＊
Tab 4 Effects of PIO and GW9662 on mRNA expres-
PIO干预组 0.58±0.05 ＊# 0.77±0.09 ＊# 1.03±0.04 ＊# 0.85±0.10 ＊# 1.01±0.05 ＊#
sion of PPARγ and PTEN in NRK-52E cells un- GW9662干预组 0.15±0.01 ＊ 0.14±0.06 ＊ 1.76±0.07 ＊ 0.21±0.09 ＊ 1.76±0.07 ＊
＊
der high-glucose condition（x±±s，n＝6） 注：与对照组比较，P＜0.05；与高糖组比较，P＜0.05
#
#
＊
组别 PPARγ PTEN Note：vs. control group，P＜0.05；vs. high-glucose group，P＜0.05
对照组 1.02±0.06 0.99±0.07 高糖处理时间的逐渐延长，体外培养的肾小管上皮细胞
高糖组 0.34±0.07 ＊ 0.37±0.06 ＊ NRK-52E中PPARγ和PTEN的mRNA及蛋白表达水平，
PIO干预组 0.75±0.08 ＊# 0.73±0.09 ＊#
GW9662干预组 0.38±0.09 ＊ 0.38±0.09 ＊ 以及上皮细胞标志物E-cadherin的蛋白表达水平均较对
注：与对照组比较，P＜0.05；与高糖组比较，P＜0.05 照组进行性降低，而间质细胞标志物α-SMA和PI3K/AKT
#
＊
＊
#
Note：vs. control group，P＜0.05；vs. high-glucose group，P＜0.05 （Thr308）
通路因子p-AKT 的蛋白表达水平均较正常对照组进
4 讨论 行性升高。这提示，PI3K/AKT 信号通路可以在高糖条
DN 是糖尿病最常见的并发症，主要有肾小球硬化 件下被激活，同时高糖培养的NRK-52E细胞中PPARγ和
和肾小管间质纤维化等病理表现，但其发病机制中的很 PTEN 的表达较正常时明显降低，表明肾小管上皮细胞
多具体环节目前尚不甚清楚。近年来研究认为，肾小管 发生了明显的EMT。
间质纤维化在 DN 的发生发展中具有更为重要的作 噻唑烷二酮类药物是PPARγ的选择性激动剂，有研
用 [10-11] 。而已有研究表明，促进肾间质纤维化并进一步 究发现，其抗肾脏纤维化病变的机制是通过活化PPARγ
导致DN肾脏损伤的主要机制是EMT [1-2] 。目前认为，上 而实现的 。研究表明，PPARγ对PTEN表达进行调控的
[9]
皮细胞标志物E-cadherin表达于上皮细胞中，在EMT过 机制可能是其可以与位于PTEN上游的2个反应元件直
程中其表达减少甚至消失，而间质细胞标志物α-SMA在 接结合 [6-7] 。然而，噻唑烷二酮类药物是否通过活化
[12]
EMT早期则表达增多 。PTEN是第一个被发现具有磷 PPARγ而具有上调高糖诱导的 NRK-52E 细胞中 PTEN
酸酶活性的抑癌基因，可通过负性调控 PI3K/AKT 信号 表达的功能，从而发挥抗 EMT 的作用，尚未有研究阐
[3]
通路而发挥抗纤维化效应 。本研究结果也验证了随着 明。本研究选用噻唑烷二酮类抗糖尿病药物 PIO，通过

中国药房 2020年第31卷第16期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 16 ·1953 ·