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3.2 不同条件下 NRK-52E 细胞中相应因子的 mRNA 示，随着高糖培养时间的逐渐延长，高糖组细胞中PPARγ
及蛋白表达的动态变化 （除6 h外）、PTEN、E-cadherin蛋白的相对表达水平均较
3.2.1 mRNA 表达的动态变化 Real-time PCR 法结果 对照组显著降低，α-SMA、p-AKT （Thr308） 蛋白的相对表达
显示，随着高糖处理时间的逐渐延长，高糖组细胞中 水平均显著升高（P＜0.05），且呈时间依赖趋势；与高糖
PPARγ和PTEN mRNA的相对表达水平均较对照组显著 组比较，PIO 干预组细胞中 PPARγ（除 6 h 外）、PTEN（除
降低（P＜0.05），且呈时间依赖趋势；与高糖组比较，PIO 6 h 外）和 E-cadherin 蛋白相对表达水平均显著升高，
干预组细胞中PPARγ、PTEN mRNA的相对表达水平（除 α-SMA、p-AKT （Thr308） （除 6 h 外）蛋白相对表达水平均显
6 h外）均显著升高（P＜0.05），且呈时间依赖趋势。不同 著降低（P＜0.05），且呈时间依赖趋势。不同条件下
条件下NRK-52E细胞中PPARγ、PTEN mRNA表达水平 NRK-52E 细胞中各目的蛋白表达的电泳图见图 2，蛋白
的动态变化见表2。 表达水平的动态变化见表3。
表 2 不 同 条 件 下 NRK-52E 细 胞 中 PPAR γ 、PTEN 3.3 PIO 和 PPAR γ 拮 抗 剂 GW9662 对 高 糖 条 件 下
mRNA表达水平的动态变化（x±±s，n＝6） NRK-52E细胞中相应因子的mRNA及蛋白表达的影响
Tab 2 Dynamic changes of mRNA expression of 3.3.1 对 mRNA 表达的影响 Real-time PCR 法结果显
PPAR γ and PTEN in NRK-52E cells under 示，与高糖组比较，PIO 干预组细胞中 PPARγ、PTEN
different conditions（x±±s，n＝6） mRNA 的 相 对 表 达 水 平 均 显 著 升 高（P＜0.05），而
组别 培养时间，h PPARγ PTEN GW9662 干预组细胞中 PPARγ、PTEN mRNA 相对表达
对照组 6 1.00±0.06 0.98±0.06 水平的差异均无统计学意义（P＞0.05），表明PIO的作用
12 1.01±0.07 0.97±0.03
24 0.98±0.06 0.99±0.06 效应被PPARγ拮抗剂GW9662阻断。PIO和GW9662对
48 0.99±0.08 0.96±0.05 高糖条件下NRK-52E细胞中PPARγ、PTEN mRNA表达
高糖组 6 0.75±0.08 ＊ 0.77±0.04 ＊
12 0.62±0.07 ＊ 0.60±0.06 ＊ 水平的影响见表4。
24 0.48±0.03 ＊ 0.51±0.04 ＊ 3.3.2 对蛋白表达的影响 Western blotting 法结果显
48 0.31±0.04 ＊ 0.38±0.07 ＊ 示，与高糖组比较，PIO 干预组细胞中 PPARγ、PTEN 和
PIO干预组 6 0.92±0.07 0.93±0.05
12 0.85±0.05 ＊# 0.87±0.05 ＊# E-cadherin 蛋白的相对表达水平均显著升高，α-SMA、
24 0.70±0.03 ＊# 0.73±0.04 ＊# p-AKT （Thr308） 蛋白的相对表达水平均显著降低（P＜0.05）；
48 0.70±0.04 ＊# 0.71±0.07 ＊#
而与高糖组比较，GW9662 干预组细胞中各蛋白相对表
注：与对照组相同时间点比较，P＜0.05；与高糖组相同时间点比
＊
达水平的差异均无统计学意义（P＞0.05），表明 PPARγ
#
较，P＜0.05
＊
Note：vs. control group at the same time point， P＜0.05；vs. high- 拮抗剂 GW9662 可以阻断 PIO 的作用效应。PIO 和
glucose group at the same time point，P＜0.05 GW9662对高糖条件下NRK-52E细胞中PPARγ、PTEN、
#
3.2.2 蛋白表达的动态变化 Western blotting法结果显 E-cadherin、α-SMA、p-AKT （Thr308） 蛋白表达影响的电泳图
p-Akt （Thr308） （56 kDa）

AKT1（56 kDa）

α-SMA（42 kDa）

E-cadherin（88 kDa）

PTEN（54 kDa）

PPARγ（53 kDa）

β-actin（42 kDa）
6 h 12 h 24 h 48 h 6 h 12 h 24 h 48 h 6 h 12 h 24 h 48 h
对照组 高糖组 PIO干预组
图2 不同条件下NRK-52E细胞中PPARγ、PTEN、α-SMA、E-cadherin和 p-AKT （Thr308） 蛋白表达的电泳图
Fig 2 Electropherograms of protein expression of PPAR γ ，PTEN，α-SMA，E-cadherin and p-AKT （Thr308） in
NRK-52E cells under different conditions

·1952 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 16 中国药房 2020年第31卷第16期