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四号筛）2.0 g，精密称定，共 6 份，按“2.1.2”项下方法制 纹图谱中，由于人参皂苷Rb1色谱峰（6号峰）与邻近峰分
备供试品溶液，再按“2.1.1”项下色谱条件进样测定，以 离度较好，峰面积较大，峰位适中，故以其为参照，计算
人参皂苷 Rb1为参照，计算各共有峰的相对保留时间和 其他峰的相对保留时间和相对峰面积，结果见表3、表4。
相对峰面积。结果，13 个共有峰相对保留时间的 RSD 表2 相似度评价结果
均小于 2％（n＝6），相对峰面积的 RSD 均小于 3％（n＝ Tab 2 Results of similarity evaluation
6），表明本方法重复性良好。 编号 相似度 编号 相似度
2.1.7 指纹图谱的生成 取10批红参样品，按“2.1.2”项 HS1 0.971 HS6 0.943
HS2 0.971 HS7 0.947
下方法制备供试品溶液，再按“2.1.1”项下色谱条件进样
HS3 0.924 HS8 0.940
测定。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012 HS4 0.932 HS9 0.935
版）》进行数据分析与处理，设定时间窗宽度为 0.10，通 HS5 0.945 HS10 0.946
过多点校正方法进行色谱峰的自动匹配，以平均数法生 80 6
70
成叠加指纹图谱和对照指纹图谱，详见图1、图2。
60
2 300 mV 50
2 100 12 信号， 40
1 900 30 3
1 700 2 6 11 20 4
1 5 7 8 9
1 500 3 4 10 13 HS10 10
0
mV 1 300 HS9
U， 1 100 HS8 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
HS7 时间，min
900
HS6
700 HS5 注：3.人参皂苷Rg1；4.人参皂苷Re；6.人参皂苷Rb1
500 HS4 Note：3. ginsenoside Rg1；4. ginsenoside Re；6.ginsenoside Rb1
300 HS3 图3 混合对照品溶液的HPLC图
HS2
100 Fig 3 HPLC chromatogram of mixed control solution
HS1
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 表3 10批样品HPLC图谱共有峰的相对保留时间
t，min
图 1 10批样品的HPLC叠加指纹图谱 Tab 3 Relative retention time of common peaks in
Fig 1 HPLC superimposed fingerprint chromato- HPLC fingerprints of 10 batches of samples
grams of 10 batches of samples 峰号 HS1 HS2 HS3 HS4 HS5 HS6 HS7 HS8 HS9 HS10
1 0.197 0.196 0.197 0.197 0.197 0.197 0.197 0.197 0.197 0.197
290 12
270 2 0.300 0.301 0.300 0.300 0.299 0.300 0.300 0.301 0.300 0.300
250 3 0.812 0.813 0.812 0.812 0.813 0.812 0.812 0.812 0.813 0.812
230
210 4 0.825 0.826 0.825 0.825 0.826 0.826 0.825 0.825 0.825 0.825
190 6
170 5 0.993 0.995 0.993 0.994 0.994 0.994 0.993 0.994 0.994 0.993
150
mV 130 11 6 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000
U， 110 2 7 7 1.013 1.013 1.013 1.013 1.013 1.013 1.013 1.013 1.013 1.013
90 8
70 3 13 8 1.023 1.024 1.023 1.023 1.023 1.023 1.023 1.023 1.023 1.023
50 1 5 9
30 4 10 9 1.052 1.053 1.052 1.052 1.052 1.052 1.052 1.052 1.052 1.052
10 对照
10 1.238 1.236 1.238 1.238 1.238 1.238 1.237 1.237 1.236 1.238
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 11 1.416 1.414 1.416 1.416 1.416 1.416 1.416 1.416 1.415 1.416
t，min 12 1.472 1.471 1.472 1.472 1.472 1.472 1.472 1.472 1.471 1.472
图2 样品的HPLC对照指纹图谱 13 1.506 1.505 1.506 1.506 1.506 1.506 1.506 1.506 1.505 1.506
Fig 2 HPLC reference fingerprint chromatogram of 2.2 定量分析
samples 本研究按 2015 年版《中国药典》（一部）“红参”项下
2.1.8 相似度评价 取10批红参样品，按“2.1.2”项下方 含量测定方法 对人参皂苷 Rg1、Re、Rb1含量进行测定。
[1]
法制备供试品溶液，以人参皂苷Rg1峰面积的5％作为最 前期方法学考察结果显示，精密度、稳定性、重复性试验
小峰面积，与红参样品HPLC对照指纹图谱中的13个特 的 RSD 均小于 2％，加样回收率分别为 96.7％（RSD＝
征峰进行多点校正并行全峰匹配，采用《中药色谱指纹 1.37％ ，n＝9）、99.4％（RSD＝1.56％ ，n＝9）、100.7％
图谱相似度评价系统（2012 版）》进行整体相似度分析， （RSD＝1.30％，n＝9），符合药典要求。
结果见表2。 2.3 炮制工艺优化
2.1.9 共有峰指认及相关性分析 10 批红参样品共有 2.3.1 试验设计 参考炮制企业加工工艺参数及相关
13 个共有峰，通过与混合对照品溶液 HPLC 图谱（图 3） 文献 [11-12] ，将红参蒸制温度设为80～120 ℃，根据根茎大
比对，指认了其中的3个：峰3为人参皂苷Rg1、峰4为人 小将蒸制时间设为 60～180 min 不等，根据研究样本量
参皂苷 Re、峰 6 为人参皂苷 Rb1。10 批红参的 HPLC 指 或红参干燥设备等因素，设置晾晒自然干燥以及 60 ℃

·1230 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 10 中国药房 2020年第31卷第10期