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2.2.8 重复性试验 精密称取生附子粉末，每份 2.0 g， 表2 加样回收率试验结果（n＝6）
共6份，按“2.2.3”项下方法制备供试品溶液，再按“2.2.1” Tab 2 Results of recovery tests（n＝6）
项下色谱条件进样测定，记录峰面积并按外标法计算样 已知样品含量， 加入量， 测得量， 加样回收率， 平均加样回收率， RSD，
待测成分
品中6种成分的含量。结果，苯甲酰新乌头碱、苯甲酰次 mg mg mg ％ ％ ％
苯甲酰新乌头碱 0.600 1 0.600 0 1.229 3 104.87 103.77 0.98
乌头碱、苯甲酰乌头碱、新乌头碱、乌头碱、次乌头碱含 0.598 9 0.600 0 1.220 0 103.52
量的RSD分别为1.90％、0.60％、1.40％、1.00％、0.50％、 0.597 2 0.600 0 1.210 0 102.13
0.68％（n＝6），表明本方法重复性良好。 0.613 2 0.600 0 1.232 9 103.28
0.602 0 0.600 0 1.226 8 104.13
2.2.9 稳定性试验 取“2.2.3”项下供试品溶液（生附 0.599 8 0.600 0 1.228 0 104.70
子）适量，分别于室温下放置 0、4、8、12、16、20 h 时，按 苯甲酰次乌头碱 0.001 8 0.002 0 0.003 8 100.00 100.83 2.02
“2.2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。结果，苯 0.002 1 0.002 0 0.004 1 100.00
0.001 9 0.002 0 0.003 9 100.00
甲酰新乌头碱、苯甲酰次乌头碱、苯甲酰乌头碱、新乌头 0.002 0 0.002 0 0.004 1 105.00
碱、乌头碱、次乌头碱峰面积的 RSD 分别为 0.23％、 0.001 9 0.002 0 0.003 9 100.00
0.46％、0.52％、0.32％、0.63％、0.26％（n＝6），表明供试 0.002 0 0.002 0 0.004 0 100.00
苯甲酰乌头碱 0.015 9 0.014 0 0.029 3 95.71 97.38 1.77
品溶液在室温下放置20 h内稳定性良好。 0.014 8 0.014 0 0.028 4 97.14
2.2.10 加样回收率试验 精密称取已知含量的生附子 0.014 8 0.014 0 0.028 1 95.00
粉末，每份 1.0 g，共 6 份，加入一定量的混合对照品，按 0.014 2 0.014 0 0.028 0 98.57
0.014 8 0.014 0 0.028 7 99.29
“2.2.3”项下方法制备供试品溶液，再按“2.2.1”项下色谱 0.014 9 0.014 0 0.028 7 98.57
条件进样测定，记录峰面积并计算加样回收率，结果见 新乌头碱 1.054 4 1.000 0 2.100 0 104.56 103.37 1.78
表2。 1.054 3 1.000 0 2.100 1 104.58
1.055 0 1.000 0 2.099 0 104.40
2.2.11 样品含量测定 精密称取生附子及不同盐制炮 1.053 9 1.000 0 2.070 9 101.70
制品粉末各2.0 g，分别按“2.2.3”项下方法制备供试品溶 1.054 8 1.000 0 2.100 2 104.54
液，再按“2.2.1”项下色谱条件进样测定，平行测定 3 次， 1.054 9 1.000 0 2.059 0 100.41
乌头碱 1.751 5 1.750 0 3.499 8 99.90 99.42 0.41
记录峰面积并按外标法计算样品含量，结果见表 3[表 1.760 2 1.750 0 3.497 6 99.28
中，“-”表示未检出；总生物碱含量（mg/g）＝（单酯型生 1.760 0 1.750 0 3.490 3 98.87
物碱质量+双酯型生物碱质量）/炮制品质量×100％，单 1.758 8 1.750 0 3.493 7 99.14
1.759 6 1.750 0 3.507 0 99.85
－3
酯型生物碱百分含量（％）＝单酯型生物碱含量×10 × 1.759 0 1.750 0 3.500 1 99.49
100％；双酯型生物碱百分含量（％）＝双酯型生物碱含 次乌头碱 0.050 5 0.050 0 0.102 2 103.40 102.67 1.55
－3
量×10 ×100％；单酯型生物碱成分包括苯甲酰乌头碱、 0.050 0 0.050 0 0.102 0 104.00
0.049 8 0.050 0 0.099 9 100.20
苯甲酰次乌头碱、苯甲酰新乌头碱，双酯型生物碱成分 0.049 9 0.050 0 0.100 5 101.20
包括次乌头碱、新乌头碱、乌头碱]。 0.051 0 0.050 0 0.103 0 104.00
由表3可知，经炮制后，不同盐制炮制品中双酯型生 0.050 1 0.050 0 0.101 7 103.20
物碱成分含量均明显低于生附子，表明盐类辅料会促进 2.4 TCI分析
双酯型生物碱成分水解转化。总生物碱含量由高到低 TCI 是一种采用面积归一化法得到的毒性校正系
依次为生附片＞氯化钠炮制品＞胆巴炮制品＞氯化钾 数。本研究通过整合附子毒性成分的含量来计算 TCI，
炮制品＞氯化钙炮制品＞氯化镁炮制品，表明以盐类辅 以达到评价附子药材及炮制品以量评毒效的目的 [16-17] 。
料炮制附子可使总生物碱含量降低。 TCI＝0.338 7×新乌头碱含量+0.183 5×次乌头碱含量+
2.3 效/毒比分析 0.477 8×乌头碱含量，TCI越小表示样品质量越优、毒性
[15]
有研究显示，双酯型生物碱成分是附子主要的毒性 越小 。生附子及其不同盐制炮制品TCI见表4。由表
成分，而单酯型生物碱成分则具有较强的药效活性，尤 4 可知，生附子及其不同盐制炮制品的 TCI 为 0.005 1～
以苯甲酰乌头碱较为显著 [3，13-14] 。由于这些生物碱的毒 0.702 6，由大到小依次为生附子＞氯化钠炮制品＞胆巴
效差异较大，故本研究采用效/毒比（效/毒比＝单酯型生 炮制品＞氯化钙炮制品＞氯化钾炮制品＞氯化镁炮制
物碱含量/双酯型生物碱含量，该值越大表示药效越强、 品，表明附子未炮制前毒性最大，经不同盐类辅料炮制
毒性越弱、品质较优 ）比较生附片及其不同盐制炮制 后其毒性均有不同程度的降低，其中以氯化镁为辅料炮
[15]
品中各成分含量的差异，结果见表4。由表4可知，效/毒 制后的附子毒性最小。
比由大到小依次为氯化钾炮制品＞氯化镁炮制品＞氯 3 讨论
化钠炮制品＞氯化钙炮制品＞胆巴炮制品＞生附子，表 2015年版《中国药典》（一部）规定，附子炮制品含双
明以氯化钾、氯化镁、氯化钠、氯化钙为辅料炮制所得炮 酯 型 生 物 碱 以 次 乌 头 碱（C33H45NO11 ）、新 乌 头 碱
制品中活性成分含量较高、毒性成分含量较低。 （C33H45NO10 ）和乌头碱（C34H47NO11 ）的总量计，不得超过

·1226 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 10 中国药房 2020年第31卷第10期