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质谱法（LC-HR-MS/MS）定性研究了头孢丙烯干混悬剂 2.3 方法学考察
中杂质 K 附近的未知杂质，并进行结构鉴定，旨在为头 2.3.1 专属性试验 精密量取“2.1”项下杂质 K 对照品
孢丙烯干混悬剂生产中的杂质控制提供参考。 溶液、空白辅料溶液和供试品溶液各20 μL，按“2.2”项下
1 材料 条件进样测定，记录色谱图。另对头孢丙烯干混悬剂进
1.1 仪器 行高温（以水溶解，60 ℃水浴2 h）、酸（以0.1 mol/L盐酸溶
Q-Exactive Focus 型 高 分 辨 质 谱 仪 、Dionex Ulti- 液溶解，60 ℃水浴6 h）、碱（以0.08 mol/L氢氧化钠溶液
Mate 3000 RS 型超高效液相色谱（UPLC）仪（包括四元 溶解，室温静置1 h）、氧化（以1％过氧化氢溶液溶解，室
泵洗脱系统、自动进样器、柱温箱、二极管阵列检测器） 温静置1 h）、光照（以水溶解，4 500 lx光照18 h）破坏后，
均购自美国Thermo Fisher Scientific公司；1260型HPLC 按“2.1.2”项下方法制备成供试品溶液，再按“2.2”项下条
仪（美国 Agbilent 公司）；AR2140 型分析天平（上海奥豪 件进样测定，记录色谱图。结果显示，空白辅料对头孢
斯仪器有限公司）。 丙烯 2 个主峰（异构体 Z、E）测定均无干扰；头孢丙烯干
1.2 药品与试剂 混悬剂经高温、酸、碱、氧化、光照破坏后也均无明显降
头孢丙烯干混悬剂（批号：02180802，规格：0.125 g） 解。色谱图见图1（图中，1～6号峰依次为头孢丙烯异构
及其空白辅料均由广州白云山医药集团股份有限公司 体 Z、头孢丙烯异构体 E、杂质 K1、杂质 K2、杂质 K3、杂
白云山制药总厂提供；头孢丙烯杂质K标准品[广州牌牌 质K4，下同）。
500
生物科技有限公司，批号：PITBBX-K-EP-20181017-01，
400
纯度：96.64％（以 4 个异构体的总和计）]；乙腈、甲酸均 300 4
为质谱纯，磷酸二氢铵为分析纯，其余试剂均为分析纯， mAU 200 3 5 6
水为自制纯水。 100
2 方法与结果 0
2.1 溶液的制备 0 5 10 15 20 25 30
t，min
2.1.1 杂质 K 对照品溶液 精密称取头孢丙烯杂质 K A.杂质K对照品溶液
标准品适量，用水配制成质量浓度为0.02 mg/mL的对照 2 000
1 750
品溶液。 1 500
2.1.2 供试品溶液 精密称取头孢丙烯干混悬剂 100 mAU 1 250
1 000
mg，溶于水5 mL中，超声（功率：360 W，频率：40 kHz，下 750
500
同）使溶解，滤过，取滤液，即得。 250
2.1.3 空白辅料溶液 精密称取头孢丙烯干混悬剂 0
0 5 10 15 20 25 30
空白辅料 1.97 g，溶于水 5 mL 中，超声使溶解，滤过， t，min
B.空白辅料溶液
即得。
2 000
2.2 色谱与质谱条件 1 750 1 2
2.2.1 色 谱 条 件 色 谱 柱 ：Thermo HyPURITY TM C18 1 500
1 250
（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：乙腈（A）-0.013％甲酸 mAU 1 000
水溶液（B），梯度洗脱（洗脱程序见表1）；检测波长：230 750
500
6
nm；流速：1.0 mL/min；柱温：40 ℃；进样量：20 μL。 250
0
表1 梯度洗脱程序 0 5 10 15 20 25 30
Tab 1 Gradient elution conditions t，min
C.供试品溶液
时间，min 流动相A，％ 流动相B，％ 2 000 1 2
0 5 95 1 750
2 5 95 1 500
1 250
23 40 60 mAU 1 000
24 5 95 750 5
30 5 95 500
250
2.2.2 质谱条件 离子源：电喷雾离子源（ESI），正离子
0
扫描；扫描模式：全扫描；扫描范围：质荷比（m/z）100～ 0 5 10 15 20 25 30
t，min
1 500；喷雾电压：3.8 kV；金属毛细管温度：320 ℃；鞘气 D.高温破坏溶液
压力：60 Arb；辅助气压力：10 Arb；喷雾温度：280 ℃；相 图1 高效液相色谱图
对碰撞能（NCE）：10、20、30。 Fig 1 HPLC chromatograms

·1218 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 10 中国药房 2020年第31卷第10期