Page 38 - 202009
P. 38
液。另取“2.1”项下所得 CHE-SD 适量(约相当于 CHE 0.010 7(R =0.994 9),CHE检测质量浓度的线性范围为
2
40 mg),置于100 mL量瓶中,加无水乙醇约70 mL,超声 2.4~5.6 μg/mL。
处理15 min使其充分溶解,冷却至室温后用无水乙醇定 (3)检测限与定量限:取“2.2.1”项下 CHE 对照品贮
容,摇匀,用干燥滤纸滤过;精密量取续滤液1 mL,置于 备液适量,以无水乙醇倍比稀释,分别按信噪比 3 ∶ 1、
100 mL 量瓶中,用无水乙醇稀释并定容,即得供试品 10 ∶ 1计算检测限和定量限。结果,CHE的检测限、定量
溶液。 限分别为0.022 1、0.066 9 μg/mL。
2.2.2 测定波长的选择 (4)精密度试验:取“2.2.1”项下 CHE 对照品贮备液
取对照品溶液适量,在 200~400 nm 波长范围内扫 适量,以无水乙醇分别配制成低、中、高质量浓度(2.4、
描。结果,CHE在282 nm波长处有最大吸收,故将其作 3.0、3.6 μg/mL)的对照品溶液,各溶液均连续测定 6 次,
为定量分析的检测波长,详见图1。 记录吸光度值,考察日内精密度;连续测定 3 d,考察日
1.000 间精密度。结果,低、中、高质量浓度溶液吸光度的日
0.745 282 内、日间 RSD 分别为 0.37%、0.39%、0.38%(n=6)和
A 0.490 0.57%、0.59%、0.55%(n=18),均小于 2%,表明仪器精
0.235 密度良好。
-0.020 (5)重复性试验:按“2.1.1”项下方法制备 CHE-SD,
200 250 300 350 400
并按“2.2.1”项下方法制备供试品溶液,取同一份上述供
λ,nm
图1 CHE紫外吸收扫描光谱图 试品溶液于282 nm波长处重复测定6次,按外标法计算
Fig 1 UV absorption scanning spectrum of CHE 其质量浓度(cx ):cx=(AX/AR )×cR (式中,cx、cR分别为供试
品溶液、对照品溶液质量浓度,AX、AR分别为供试品溶
2.2.3 方法学考察
液、对照品溶液的吸光度)。以质量浓度换算成含量
(1)专属性:按处方比例精密称取载体材料、CHE对
(X,%):X=(cx×10/m)×100%(式中,X为CHE-SD含量,
照品、CHE 原料药各适量,先后按“2.1.1”(以该法为例,
下同)、“2.2.1”项下方法制得不含CHE的空白载体溶液、 m为CHE-SD质量,10为稀释倍数)。结果,CHE平均含
CHE对照品+空白载体溶液(CHE质量浓度为5.4 μg/mL)、 量 为 33.27% ,RSD 为 0.55%(n=6),表 明 方 法 重 复
CHE-SD供试品溶液,并同法制得不含载体和CHE的空 性好。
白对照溶液。取上述溶液各适量,于 282 nm 波长处扫 (6)加样回收率试验:按“2.1.1”项下方法制备CHE-
描。结果,空白载体溶液和空白对照溶液在282 nm波长 SD,并按“2.2.1”项下方法制备供试品溶液。取上述供试
处均无吸收,而 CHE+空白载体溶液和 CHE-SD 供试品 品溶液各5 mL,共9份,分别置于10 mL量瓶中,分别精
溶液在此波长处均有最大吸收,且不受辅料和空白对照 密加入“2.2.1”项下对照品贮备液 30、50、70 μL(每种体
的干扰,提示本方法专属性良好,详见图2。 积各3份),以无水乙醇定容,得低、中、高质量浓度溶液,
0.010 1.000 于 282 nm 波长处检测各溶液吸光度并计算加样回收
-0.117 0.625 率。结果,低、中、高质量浓度溶液的平均加样回收率分
A -0.245 A 0.250
-0.372 -0.125 别 为 98.33% 、98.03% 、98.80% ,RSD 分 别 为 0.83% 、
-0.500 -0.500
200 250 300 350 400 200 250 300 350 400 0.48%、0.53%(n=3),详见表1。
λ,nm λ,nm 加样回收率试验结果
A.空白载体溶液 B. CHE对照品+空白载体溶液 表1
0.010 0 Tab 1 Results of recovery tests
0.625 -0.125
0.250 A -0.250 已知样品含量,μg 加入量,μg 测得量,μg 加样回收率,% 平均加样回收率,% RSD,%
A
-0.125 -0.375 20 12 31.80 98.33 98.33 0.83
-0.500 -0.500
200 250 300 350 400 200 250 300 350 400 20 12 31.70 97.50
λ,nm λ,nm 20 12 31.90 99.17
C. CHE-SD供试品溶液 D.空白对照溶液
20 20 39.51 97.55 98.03 0.48
图2 紫外吸收光谱图 20 20 39.70 98.50
Fig 2 UV absorption spectra 20 20 39.61 98.05
20 28 47.50 98.21 98.80 0.53
(2)线性关系:精密量取“2.2.1”项下 CHE 对照品贮 20 28 47.70 98.93
备液 60、80、100、120、140 μL,分别置于 10 mL 量瓶中, 20 28 47.79 99.25
用无水乙醇稀释至刻度,得 CHE 质量浓度分别为 2.4、 (7)稳定性试验:按“2.1.1”项下方法制备 CHE-SD,
3.2、4.0、4.8、5.6 μg/mL的标曲溶液,于282 nm波长处测 并按“2.2.1”项下方法制备供试品溶液,分别于室温放置
定吸光度。以待测物吸光度(A)为纵坐标、质量浓度(c) 0、1、2、4、8、12、24 h 时测定其吸光度。结果,其吸光度
为横坐标进行线性回归,得回归方程为 A=0.143 2c+ 的 RSD<2%(n=7),表明供试品溶液在室温放置 24 h
·1056 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 9 中国药房 2020年第31卷第9期