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液。另取“2.1”项下所得 CHE-SD 适量(约相当于 CHE                    0.010 7(R =0.994 9),CHE检测质量浓度的线性范围为
                                                                     2
        40 mg),置于100 mL量瓶中,加无水乙醇约70 mL,超声                   2.4~5.6 μg/mL。
        处理15 min使其充分溶解,冷却至室温后用无水乙醇定                            (3)检测限与定量限:取“2.2.1”项下 CHE 对照品贮
        容,摇匀,用干燥滤纸滤过;精密量取续滤液1 mL,置于                         备液适量,以无水乙醇倍比稀释,分别按信噪比 3 ∶ 1、
        100 mL 量瓶中,用无水乙醇稀释并定容,即得供试品                         10 ∶ 1计算检测限和定量限。结果,CHE的检测限、定量
        溶液。                                                 限分别为0.022 1、0.066 9 μg/mL。
        2.2.2 测定波长的选择                                          (4)精密度试验:取“2.2.1”项下 CHE 对照品贮备液
            取对照品溶液适量,在 200~400 nm 波长范围内扫                    适量,以无水乙醇分别配制成低、中、高质量浓度(2.4、
        描。结果,CHE在282 nm波长处有最大吸收,故将其作                        3.0、3.6 μg/mL)的对照品溶液,各溶液均连续测定 6 次,
        为定量分析的检测波长,详见图1。                                    记录吸光度值,考察日内精密度;连续测定 3 d,考察日
                 1.000                                      间精密度。结果,低、中、高质量浓度溶液吸光度的日
                 0.745          282                         内、日间 RSD 分别为 0.37%、0.39%、0.38%(n=6)和
              A  0.490                                      0.57%、0.59%、0.55%(n=18),均小于 2%,表明仪器精
                 0.235                                      密度良好。
                -0.020                                         (5)重复性试验:按“2.1.1”项下方法制备 CHE-SD,
                   200     250    300     350    400
                                                            并按“2.2.1”项下方法制备供试品溶液,取同一份上述供
                                  λ,nm
                  图1 CHE紫外吸收扫描光谱图                           试品溶液于282 nm波长处重复测定6次,按外标法计算
           Fig 1 UV absorption scanning spectrum of CHE     其质量浓度(cx ):cx=(AX/AR )×cR (式中,cx、cR分别为供试
                                                            品溶液、对照品溶液质量浓度,AX、AR分别为供试品溶
        2.2.3 方法学考察
                                                            液、对照品溶液的吸光度)。以质量浓度换算成含量
            (1)专属性:按处方比例精密称取载体材料、CHE对
                                                           (X,%):X=(cx×10/m)×100%(式中,X为CHE-SD含量,
        照品、CHE 原料药各适量,先后按“2.1.1”(以该法为例,
        下同)、“2.2.1”项下方法制得不含CHE的空白载体溶液、                      m为CHE-SD质量,10为稀释倍数)。结果,CHE平均含
        CHE对照品+空白载体溶液(CHE质量浓度为5.4 μg/mL)、                   量 为 33.27% ,RSD 为 0.55%(n=6),表 明 方 法 重 复
        CHE-SD供试品溶液,并同法制得不含载体和CHE的空                         性好。
        白对照溶液。取上述溶液各适量,于 282 nm 波长处扫                           (6)加样回收率试验:按“2.1.1”项下方法制备CHE-
        描。结果,空白载体溶液和空白对照溶液在282 nm波长                         SD,并按“2.2.1”项下方法制备供试品溶液。取上述供试
        处均无吸收,而 CHE+空白载体溶液和 CHE-SD 供试品                      品溶液各5 mL,共9份,分别置于10 mL量瓶中,分别精
        溶液在此波长处均有最大吸收,且不受辅料和空白对照                            密加入“2.2.1”项下对照品贮备液 30、50、70 μL(每种体
        的干扰,提示本方法专属性良好,详见图2。                                积各3份),以无水乙醇定容,得低、中、高质量浓度溶液,

           0.010                   1.000                    于 282 nm 波长处检测各溶液吸光度并计算加样回收
          -0.117                   0.625                    率。结果,低、中、高质量浓度溶液的平均加样回收率分
         A  -0.245               A  0.250
          -0.372                  -0.125                    别 为 98.33% 、98.03% 、98.80% ,RSD 分 别 为 0.83% 、
          -0.500                  -0.500
             200  250  300  350  400  200  250  300  350  400  0.48%、0.53%(n=3),详见表1。
                      λ,nm                   λ,nm                            加样回收率试验结果
                  A.空白载体溶液            B. CHE对照品+空白载体溶液                  表1
           0.010                     0                                Tab 1  Results of recovery tests
           0.625                  -0.125
           0.250                 A  -0.250                  已知样品含量,μg  加入量,μg  测得量,μg  加样回收率,% 平均加样回收率,% RSD,%
          A
          -0.125                  -0.375                    20           12     31.80  98.33     98.33  0.83
          -0.500                  -0.500
              200  250  300  350  400  200  250  300  350  400  20       12     31.70  97.50
                      λ,nm                   λ,nm           20           12     31.90  99.17
                C. CHE-SD供试品溶液            D.空白对照溶液
                                                            20           20     39.51  97.55     98.03  0.48
                       图2 紫外吸收光谱图                           20           20     39.70  98.50
                   Fig 2 UV absorption spectra              20           20     39.61  98.05
                                                            20           28     47.50  98.21     98.80  0.53
            (2)线性关系:精密量取“2.2.1”项下 CHE 对照品贮                  20           28     47.70  98.93
        备液 60、80、100、120、140 μL,分别置于 10 mL 量瓶中,             20           28     47.79  99.25
        用无水乙醇稀释至刻度,得 CHE 质量浓度分别为 2.4、                          (7)稳定性试验:按“2.1.1”项下方法制备 CHE-SD,
        3.2、4.0、4.8、5.6 μg/mL的标曲溶液,于282 nm波长处测              并按“2.2.1”项下方法制备供试品溶液,分别于室温放置
        定吸光度。以待测物吸光度(A)为纵坐标、质量浓度(c)                         0、1、2、4、8、12、24 h 时测定其吸光度。结果,其吸光度
        为横坐标进行线性回归,得回归方程为 A=0.143 2c+                       的 RSD<2%(n=7),表明供试品溶液在室温放置 24 h


        ·1056  ·  China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 9                                  中国药房    2020年第31卷第9期
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